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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
408
- 英文名:
Acid-Washed Glassbeads(400μm)
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")酸洗玻璃珠(400μm)厂商,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:酸洗玻璃珠(400μm)厂商
产地:国产|进口
规格:10g
英文名:Acid-Washed Glassbeads(400μm)
品牌:百奥莱博
本品是用浓酸充分洗涤后的玻璃珠,它是玻璃珠法破碎细菌和真菌的必备成分,主要用于从具有坚硬外壁的微生物细胞(如真菌孢子、酵母细胞、结核细胞等)中提取DNA、RNA和蛋白质大分子,因为用其他方法,包括酶解方法都很难沉底破碎具有坚硬外壁的微生物细胞。
产品特点:
1. 经过充分的酸洗,免去用户接触具有腐蚀性的浓酸。
2. 用本产品破碎具有坚硬外壁的微生物细胞,属于物理方法,不但比温和的化学破壁法普适性更好、重复性更好,同时不需要使用酶,因此不容易被酶中的外源核酸或蛋白质污染。
3. 用玻璃珠破碎法提取一个样品只需要10余分钟时间,非常快捷。注意:本产品需要跟本公司提供的裂解液、上柱液、离心吸附柱等配合使用才能用于核酸纯化。
4.一次可以处理5mL的微生物样品。
5. 本系列产品有各种规格、适用于不同材料。具体请参考下表:
| 编号 | 玻璃珠直径 | 最适用途 |
| BTN100307A | 100μm | 作为超声破碎细菌时的添加物 |
| BTN100307B | 200μm | 破碎细菌 |
| BTN100307C | 400μm | 破碎酵母(如酿酒酵母) |
| BTN100307D | 800μm | 破碎霉菌、孢子等 |
储存条件:常温运输及保存,保存期为两年。
使用方法:
以我公司玻璃珠法柱式真菌DNA提取试剂盒(BTN100303)为例:离心收集1-5mL过夜培养的真菌细胞,加入0.5mL溶液A和体积相当于0.5mL的、直径为400μm玻璃珠(大约0.5克),振荡器上以最高速度振荡10分钟,,再加入0.5mL溶液B,震荡2分钟,2000rpm离心2分钟,在上清中加入3倍体积的溶液C,上柱,用通用洗涤液洗两次,干甩一次,最后用50-100μL DNA洗脱液洗脱基因组DNA待用。
使用效果:
图注:使用本产品C型(BTN100307C)提取3mL过夜培养的毕赤酵母菌液,最后用50μl DNA洗脱液洗脱,5μl用于琼脂糖电泳。电压300V,电泳时间5分钟,染料为绿如蓝,缓冲液为SuperBuffer。
欲了解更多酸洗玻璃珠(400μm)厂商的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:
·一站式长效期SDS-PAGE套装B(2-30KD)
编号:BTN100908B
英文名称:One-Stop Stable SDS-PAGE Pack(B)
规格:30次
本产品是在SDS-聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)套装基础上改良而得,主要改良的地方有两处:一是配胶液的pH偏酸,二是将还原剂加入到电泳液中。
产品特点:
1.偏酸的pH使PAGE胶比常规SDS-PAGE 更加稳定,便于配预制胶,增加实验的可重复性。
2.能降低蛋白质的脱*反应和烷基化反应,也能阻止蛋白质的二硫键再生成。
3.把还原剂整合到电泳液中,避免了蛋白质在电泳过程中重新形成二硫键,蛋白条带比常规SDS-PAGE 更加锐利。
4.可把分离胶和浓缩胶配胶液整合成一个,成分更简单。
5.更换电泳液即可用于不同大小的蛋白(A型电泳液适合20 kD以上蛋白,B型适合2-50 kD蛋白),分离多肽时不需要Tricine-SDS-PAGE。
6.即开即用,用户不需单独准备各种成分,十分方便。
7.安全,免去了实验人员接触粉末状的剧毒物品丙*(代"烯")酰胺。
8.电泳后可直接用于考染、银染、Western杂交等实验。
产品组成:
| 成分 | 30T(A) | 30T(B) |
| 丙*(代"烯")酰胺(干粉) | 60g | 60g |
| 甲叉双丙*(代"烯")酰胺(干粉) | 3g | 3g |
| 长效期SDS-PAGE 配胶液,4× | 200ml | 200ml |
| 长效期SDS-PAGE还原剂 | 10ml | 10ml |
| TEMED | 1.5ml | 1.5ml |
| 过硫*(代"酸")铵 | 1g | 1g |
| 长效SDS-PAGE上样液,5× | 1ml | 1ml |
| 长效期SDS-PAGE电泳液A型 | 20L | - |
| 长效期SDS-PAGE电泳液B型 | - | 20L |
| 说明书 | 1份 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存(SDS-PAGE上样液需-20℃保存),有效期一年。
使用方法:
一、使用本产品不需要浓缩胶,直接配制分离胶。如果使用A型电泳液(分离30 KD以上蛋白质用),最好配制10%的PAGE胶;如果使用B型电泳液(分离2-30 KD的蛋白质用),最好配制12%的PAGE胶。也可以选择其他胶浓度,但各成分用量需要按比例调整。
1.第一次使用本产品时需先配制30%丙*(代"烯")酰胺溶液:在本产品提供的装有60克丙*(代"烯")酰胺干粉的塑料瓶中加入146mL自备的去离子水,充分摇晃直到溶解即得200mL 30%丙*(代"烯")酰胺溶液(用手大约摇10-20分钟)。
2.第一次使用本产品时还需配制30%丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺(19:1)溶液(简称30% AB溶液,下同): 不同实验需要加入不同比例的甲叉双丙*(代"烯")酰胺。对长效期SDS-PAGE电泳,丙*(代"烯")酰胺与甲叉双丙*(代"烯")酰胺比例一般在19:1,因为此时PAGE胶的孔径最小,分辨率最高。制备方法是将3g甲叉双丙*(代"烯")酰胺干粉加入到200mL上步配好的30%丙*(代"烯")酰胺溶液中,摇晃溶解即得30%的AB溶液,该溶液最好4℃避光(可包上锡箔纸壁光)保存并在一个月内用完。30% AB溶液具有神经毒性,一定要戴手套操作。
3.新鲜配制10%的APS(过硫*(代"酸")铵):按每0.1克过硫*(代"酸")铵干粉加1mL 去离子水的比例将去离子水加到装有硫*(代"酸")铵干粉的1.5mL EP 管中,摇晃到粉末全部溶解。配制好的10%的APS溶液可以在4℃存放一周。
4.本产品不需要配制分离胶和浓缩胶两种胶,只需要配一种连续胶。配制方法如下(以下是以配制10mL的胶的用量为例,用户自己需要根据胶的大小决定所需体积):
| 胶浓度 | 用量(mL) | 总体积 (mL) |
||
| 去离子水 | 30% AB溶液 | 4×长效期SDS-PAGE配胶液 | ||
| 10%(对A型) | 4.20 | 3.30 | 2.50 | 10 |
| 12%(对B型) | 3.50 | 4.00 | 2.50 | 10 |
5.摇晃混匀后抽真空10-15分钟以去除溶液中的氧气(氧气能抑制丙*(代"烯")酰胺聚合反应,不去除的话将影响丙*(代"烯")酰胺聚合反应)。
6.加入50μL新配制的10%APS和30μL TEMED(这是配制10mL胶的用量,配制更大体积的胶则按比例增加),迅速摇匀后倒胶。
7.在胶的液面达到顶部的时候停止灌胶并插入梳子,室温聚合30-60分钟(低温抑制聚合反应)。
8.拔出梳子,用水冲洗加样孔。
9.配制的PAGE胶可以在4℃长期放置数月,直到使用。注意:需要盖上1×长效期SDS-PAGE 配胶液,否则PAGE胶会变干而无法使用。
10.使用时,将凝胶板固定在电泳装置上,往上槽和下槽加入足够量的1×长效期SDS-PAGE电泳液(A型或B型)。
注意:长效期SDS-PAGE电泳液A型或B型均以干粉形式提供,足够配20 L 1×电泳液。配制时需将全部干粉(含多种没有充分混合的成分,必须一次性全部使用)溶解在去离子水中,并定容到1 L,得到20×长效期SDS-PAGE电泳液,使用时再用去离子水稀释成1×电泳液。20×长效期SDS-PAGE电泳液不需要调pH,可以室温放置。
11.在上槽中加入适量的1×长效期SDS-PAGE电泳液和1/200 体积(以电泳液体积为基数)的长效期SDS-PAGE还原剂并用玻璃棒搅拌混合均匀。
12.在蛋白质样品中加入5×长效期SDS-PAGE上样液(8μL样品加2μL上样液),72℃加热10分钟。注意:上样液中的一些成分在低温保存时会沉淀,所以用前需要65℃保温10分钟左右使沉淀溶解,混匀后才能使用。上样液中的2-巯基乙*(代"醇")容易挥发,使用多次后用户可以在10μl样品(蛋白质样品+上样液的混合液)中补加0.5μl自备的2-巯基乙*(代"醇")原液,以便使蛋白质充分变性。如果样品是蛋白质沉淀(如TCA沉淀得到的蛋白质),则需要用Tris缓冲液将其pH调到中性(可用pH试纸检测),否则残留溶剂可能会改变上样液的pH,严重影响电泳效果。
13.短暂离心,取上清液上样。上样的蛋白总量跟检测方法相关,如果用银染,可以只上样ng级别(对每条带的蛋白量而言),如果用考染,需要上样μg级别(对每条带的蛋白量而言)。
14.用150V恒压电压进行电泳,直到染料进入胶底部(在B型电泳液中,*酚蓝的速度相当于3-5 KD的蛋白质)。注意:在长效期SDS-PAGE中的电泳速度要快于普通SDS-PAGE。在B型电泳液中的速度又快于A型电泳液。过程中,电流会降低,属于正常现象。
15.终止电泳,取出凝胶进行后续的实验处理(如染色或转膜)。注意:Western转膜需要专门的转膜液(百奥莱博可以提供)。
二、如果需要更高分辨率,也可把上法配制的胶当成分离胶,并在其上再叠加4%的浓缩胶,操作如下:
16.按上面方法配制分离胶,只是倒胶后在胶面距离顶部1.5cm的时候,或者距梳子齿0.5cm时,停止灌胶。然后覆盖一层1-5 mm 厚的水,使胶顶部液面平整。室温聚合30-60分钟(低温抑制聚合反应)后,用1×长效期SDS-PAGE 配胶液洗涤凝固的胶的顶部,待用。
17.配制4%浓缩胶(参考上节第4-6 步)。倒胶后在液面达到顶部时停止灌胶,插入梳子,室温聚合30-60分钟(低温抑制聚合反应)。
18.拔出梳子,用1×电泳液(A型或B型)冲洗加样孔,后续处理接第7步。
酸洗玻璃珠(400μm)厂商关键词:BTN100307C,酸洗玻璃珠,400μm,Acid-Washed Glassbeads(400μm),酸洗玻璃珠(400μm)
·热稳定无机焦磷酸酶(PPase)
编号:BTN130657
英文名称:Inorganic Pyrophosphatase,Thermostable
规格:250U
无机焦磷酸酶催化无机焦磷酸盐水解生成正磷*(代"酸")盐,其反应示意图如下:
产品特点:
1.增强DNA复制。
2.100℃加热4小时,该酶仍具有100%活性。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1单位指标准反应条件下[0.5mL反应体系,50mM Tricine(pH8.5),1mM MgCl2和0.32mM PPi,75℃反应,10分钟],每分钟催化无机焦磷酸盐生成1μmol磷酸盐的酶量。
来源:重组E.coli菌株,携带从极度耐热的Thermococus litoralis中克隆的无机焦磷酸酶基因。
酸洗玻璃珠(400μm)厂商关键词:BTN100307C,酸洗玻璃珠,400μm,Acid-Washed Glassbeads(400μm),酸洗玻璃珠(400μm)
12774-36-6 葡聚糖凝胶G-150 Sephadex G-150medium
BL0822 HRP标记兔抗猪IgG抗体
1,3-二甲基脲 Toluidine bule 96-31-3
FAB固定液 500ml
F030508 FITC标记兔抗人血清白蛋白抗体 Rabbit Anti-HSA*FITC
SJ0689 500bp
F040315 鸡IgY抗原 Chicken IgY
BTN130641 T4 核酸内切酶 V T4 Endonuclease V
ARB12535 大鼠胰岛细胞抗体(ICA)Elisa定量检测 Rat islet cell antibody,ica ELISA KIT
CYB163076 人IgG-FITC
ARB11558 人流行性出血热IgM抗体(EHF IgM)尿液中含量检测 Human anti-epidemic hemorrhagic fever igM antibody,ehf igM ELISA KIT
X-gal(20mg/ml) 1ml|5ml
ARB13229 小鼠羟脯*酸(Hyp)elisa检测说明书 Mouse hydroxyproline,hyp ELISA KIT
ARB13546 兔子E选择素(E-SelectIn/CD62E)检测服务 Rabbit e-selectin ELISA KIT
BL0985 Carrageenan 卡拉胶
BL0001 槲皮素标准品
BL1231 1M Hepes溶液(Free Acid,无菌)
喹乙醇 Creatininase amidohydrolase 23696-28-8
ARB13342 牛CD8分子(CD8)Elisa定量检测
钨酸 10% Iron chelate 7783-03-1
ARB13137 小鼠前列腺素E2(PGE2)酶联免疫定量检测 Mouse prostaglandin e2,pg-e2 ELISA KIT
盐*(代"酸")乙醇胺溶液(1mol/L,pH8.0) 500ml
北京百莱博科技有限公司是DNA纯化产品的专业生产供应销*(代"售")商,恭候您的咨询选购酸洗玻璃珠(400μm)厂商。
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文献和实验核酸酶的TE 缓冲液中重悬浮沉淀 16. 37℃培养10min 17. 重复9-12步 18. 在 50μl TE中重悬浮沉淀 裂解缓冲液: 2%(v/v)Triton X-100, 1%(v/v)SDS, 100mM NaCl, 10mM Tris 碱(pH8.0), 1mM EDTA(pH8.0) TE缓冲液: 10mM Tris碱(pH8.0), 1mM EDTA(pH8.0) YPD: 1%酵母浸膏, 2%细菌用蛋白胨,2%葡萄糖, 20min/升 高压灭菌 酸洗玻璃珠
-32P]dNTP或DIG-11-dUTP,所增殖的DNA即被32P或DIG所标定,所以PCR是制备核酸探针非常便捷好用的方法。仪器用具:微量离心机;PCR 反应器药品试剂:模版DNA: pBlueGus 质体DNA (~50 pg)核酸引子对: T3 promoter primer 与T7 promoter primer (各2 μM)矿物油 (是否需要视PCR反应器机型而定)PCR DIG probe synthesis kit (Roche), 内含:Taq DNA polymerase
裂解必需充分且操作迅速。裂解不完全会降低最后得率,因为一部分 RNA 会残留在未裂解的细胞中。细胞裂解之后要看不见颗粒状物质(结缔组织和骨除外)。在清洗和裂解细胞时最好在低温下操作,防止在操作过程中释放的内源 RNase 降解了 RNA。 4. 酵母和一些细菌由于细胞壁的特别结构,可以加入 Trizol 试剂同时加入无 RNase 的玻璃珠并剧烈振荡,使细胞裂解充分。2-8℃ 避光保存一年。 三、预备工作 RNA酶(Rnase)是导致 RNA 降解最主要的物质。此酶非常稳定,在一些极端
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