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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
358
- 英文名:
Column Probe Purification Kit
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货柱式探针纯化试剂盒优惠价,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京现货柱式探针纯化试剂盒优惠价
英文名:Column Probe Purification Kit
产地:国产|进口
规格:10次
品牌:百奥莱博
编号:BTN121122
本试剂盒是基于分子排阻层析原理的、专门用于纯化同位素和非同位素标记的核酸探针的试剂盒。在分子排阻层析过程中,大分子(标记的核酸探针或Oligo探针)将绕过层析介质,快速穿透出层析柱,小分子(未参入的核苷酸)将进入层析介质中,缓慢穿透出层析柱。根据这一时间差而将两者分开。此过程的示意图如下:

产品特点:
1. 即开即用,提供纯化所需要的所有溶液和介质,不需要单独准备每种试剂,免去用户自己摸索条件。
2.适用于PCR 标记、随机引物标记、切口平移和填入法标记。
3. 能去掉绝大部分的未标记物、盐离子等小分子。
4. 足够10次纯化使用,每次可以纯化50μl的标记反应液。
5.可用于DIG、生物素、Cy3、Cy5等非同位素标记的DNA和RNA探针(由于标记分子带非极性基团,容易进入有机相,因此这些探针不能用传统的酚*仿抽提-乙醇沉淀法纯化)。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| Sephadex G50 介质 | 15ml |
| 0.7mL离心柱及管套 | 10套 |
| TE溶液 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输及保存,有效期一年。
使用方法:
注意:由于非同位素标记的探针浓度一般都比较低,非常容易吸附到枪头或离心管的表面,造成探针的损失,因此最好使用硅化的离心管和枪头。
1. 摇晃Sephadex G50介质至均匀,迅速转移0.5mL 到离心柱中,套上套管(又叫收集管)。
2. 2000rpm室温离心1分钟,Sephadex G50介质将压紧在柱子里面。
3. 倒掉套管中的穿透液,再加0.5mL的摇晃后得到的Sephadex G50 介质,2000rpm室温离心1分钟。
4. 经上述步骤会得到体积约为0.5mL 压紧后的Sephadex G50介质。如不足,再加入少量的G50介质离心,直到体积达到0.5mL左右。倒掉套管中的穿透液。
5.在柱子中Sephadex G50 界面的上面加入50μl TE缓冲液,套上套管,2000rpm室温离心1分钟,测量收集管中穿透液的体积。
6. 重复上步3-5次,直到收集管中穿透液的体积跟加入的体积一样(50μL)。
7. 将50μl的标记探针(必须使用50μl样品。如果没有50μl,需要用TE缓冲液或水补足到50μl)加到柱子中Sephadex G50 界面的上面,套上一个自备的(最好是硅化的)离心管。
8. 2000rpm室温离心1分钟,离心管中的穿透液将含标记探针,未参入的标记物将滞留在介质中。
9.电泳或点杂交检测探针回收效率后直接使用或放-20℃长期保存。
更多有关北京现货柱式探针纯化试剂盒优惠价的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·生物素化的牛血清白蛋白
编号:BTN131094
英文名称:Biotin-BSA
规格:25mg
本产品为生物素标记的BSA,可在酶联免疫吸附试验、免疫印迹和免疫组化研究中作为对照。本产品以冻干粉末形式提供,每摩尔BSA含有8-12 摩尔生物素。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
·无RNase的DNase溶液
编号:BTN90903
英文名称:RNase-Free DNase Solution
规格:500U
本产品是从牛胰DNase中精制的无RNase污染的DNase,专门用于降解RNA样品中的DNA污染。
产品特点:
1.高效,能使总RNA中的基因组DNA污染降低到电泳检测不到的水平。
2. 同时降解单链DNA和双链DNA。
3. 不含RNase,可以保证RNA分子完整性不受任何影响。
4.反应条件经过优化,可以用于快速降解硅胶膜上吸附的DNA,也可以用于快速降解液体反应体系中的DNA。
5.可以用于总RNA提取和体外转录中去除DNA。也可用于切口平移(Nick Translation)和DNase印迹法研究DNA-蛋白质相互作用。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| RNase-free DNase(1U/μL) | 300μl |
| 10×DNase Buffer | 300μl |
| 50mM EDTA溶液 | 300μl |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一、去除RNA样品中污染的基因组DNA(仅供参考,本试剂盒不含RNase-free DNase以外的所需试剂)
1.在一无RNA酶的离心管中配制50μl的反应液:
| 成分 | 用量 |
| RNA样品 | 1μg |
| 10×DNase Buffer | 1μl |
| RNase-free DNase(1U/μL) | 1μl |
| 自备的RNase inhibitor(40U/μL) | 0.5-1μL(可不加) |
| 补超纯水到 | 10μL |
2. 混匀,短暂离心,37℃放置30分钟;
3. 加入2μl 50mM EDTA溶液,65℃放置15分钟。此步可以灭活DNase。RNA在加热时容易水解,也可以使用酚/*仿抽提去除DNase,然后再乙醇沉淀RNA。如果RNA在20μg以上,也可以使用本公司的RNAadsorp
试剂盒进行柱式纯化,回收RNA。
4.电泳检测是否去除了基因组 DNA,然后进行后续实验。
二、除去硅胶膜离心吸附柱上的DNA(仅供参考,本试剂盒不含 RNase-free DNase以外的所需试剂)
1.在柱式法提取过程中,完成洗涤步骤。
2. 配制 50μl DNase工作液。
| 成分 | 用量 |
| 10×DNase Buffer | 5μl |
| RNase-free DNase(1U/μL) | 10μl |
| 自备的RNase inhibitor(40U/μL) | 0.5-1μL(也可不加) |
| 补超纯水到 | 50μL |
3. 加在离心吸附柱中间,室温放置5-30分钟。
4. 加入0.5mL自备洗柱液洗涤两次。
5. 用RNA洗脱液洗脱即得无DNA的RNA样品。
三、除去RNA体外转录反应中的DNA模板(仅参考,本试剂盒不含RNase-free DNase以外的所需试剂)
1. 按2 U RNase-free DNase/μg DNA模板的比例在RNA体外转录反应中加入RNase-free DNase。注意:酶的最佳用量也许需要优化。
2. 37℃放置15分钟。
3. 加入2μl 50mM EDTA溶液,65℃放置15分钟;此步可以灭活DNase。RNA在加热时容易水解,也可以使用酚/*仿抽提去除DNase,然后再乙醇沉淀RNA。如果RNA在20μg以上,也可以使用本公司的RNAadsorp试剂盒(需另购)进行柱式纯化,回收RNA。
四、用于切口平移法(Nick Translation)DNA探针标记(仅供参考,本试剂盒不含RNase-free DNase以外的所需试剂)
1. 按下表设置切口平移标记反应:
| 成分 | 用量 |
| 10×DNA聚合酶I缓冲液 | 2.5μl |
| 3 dNTP mixture,1mM each | 1.25μl |
| 标记核苷酸:非标记核苷酸混合(3:7,1mM) | 1μl |
| RNase-free DNase(0.002U/μL,见注) | 1μl |
| DNA聚合酶 I(10U/μL) | 0.5-1.5μl |
| 模板 DNA | 0.25μg |
| 加水到 | 25μl |
注:稀释 RNase-free DNase的缓冲液为1×DNA聚合酶 I缓冲液:50mM
2. 15℃放置 15-60分钟。
3. 加入10μl 50mM EDTA溶液。
4. 65℃放置 15分钟灭活酶。
5. 所得探针可以纯化后使用,也可以直接使用。
北京现货柱式探针纯化试剂盒优惠价关键词:Column Probe Purification Kit,BTN121122,柱式探针纯化试剂盒
·血液细胞核DNA和线粒体DNA共提试剂盒
编号:BTN120810
英文名称:Blood nuclear DNA and mitochondrial DNA extraction kit
规格:25次
本试剂盒是在本公司血液DNA提取试剂盒产品基础上开发的、专门用于从新鲜或冷冻的哺乳动物抗凝全血中同时提取细胞核DNA和线粒体DNA的试剂。
产品特点:
1.一份样品可以同时得到细胞核DNA和线粒体DNA,节约宝贵的实验材料。
2. DNA产率高。细胞核DNA产率一般为30-50μg/mL 新鲜血液,线粒体DNA产率约为1μg/mL 新鲜血液。陈旧血液DNA产率差别较大。
3. DNA 纯净,OD260/OD280在1.8-2.0 之间,可直接用于PCR、酶切、杂交等实验。
4.适用于哺乳动物血液,不适用于其他动物血液。
5. 所用试剂安全无毒,健康环保。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 红细胞裂解液D型 | 250mL |
| 溶液A | 25ml |
| 溶液B | 2ml |
| 溶液C | 5ml |
| DNA 洗脱液2.0 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,保存期限一年。
使用方法:
一:白细胞核和线粒体的分离
1. 将3mL 用EDTA 抗凝管收集的新鲜血液转移到一个干净的15mL塑料离心管中。注意:最好使用新鲜血液。对于陈旧血液,由于冻凝过程中冰晶已经对细胞核膜和线粒体膜产生损伤,所以DNA 得率会大大减少,具体减少多少根据冻凝时间长短不同而不同。
2. 向血液中加入等体积(3mL)的D型红细胞裂解液;轻柔颠倒数次混匀,室温静置10分钟以裂解红细胞和白细胞的细胞膜,直至溶液变成清澈的红色。注意:D型红细胞裂解液一旦打开后,非常容易污染细菌,未用完的部分最好-20℃保存,下次使用前,要溶解后充分摇匀。
3.室温下1000 g离心10分钟沉淀白细胞核。
4.转移上清(含线粒体)到新的15mL塑料离心管中,注意不要触及白细胞核沉淀。
5.在白细胞核沉淀中加入3mL D型红细胞裂解液。轻柔颠倒数次混匀后,室温下1000 g离心10分钟以沉淀白细胞核。
6.转移上清(含线粒体)到第4 步所得的、已经含有上清的15mL塑料离心管中。
将白细胞核沉淀放置冰上,和即将准备好的线粒体一起用于DNA提取,也可以放置在-20℃待用。
7. 将汇集的含线粒体的上清于4℃下15000g离心30分钟。
8.小心移弃上清,小心将线粒体沉淀重悬在1mL D型红细胞裂解液中,然后转移到1.5mL塑料离心管中,15000g离心5分钟,移弃上清得到线粒体沉淀。
9. 用1mL D型红细胞裂解液洗涤线粒体2次(每次先重悬线粒体,再15000g离心5分钟得沉淀)。
10. 所得线粒体可以直接用于DNA提取,也可放置在-20℃待用。
二:DNA的提取(下面步骤为白细胞核DNA提取和线粒体DNA提取通用)
11.在白细胞沉淀或线粒体沉淀中加入0.5mL溶液A,用移液枪吹打数次混匀后再加入75μL溶液B,混匀后于55℃温育10分钟。注意:溶液将成浑浊状。
12. 再加入0.2mL溶液C充分颠倒混匀。
13.在4℃下13000g离心20分钟后,将上清(含DNA)转入一新的1.5mL塑料离心管中。
14. 加入两倍体积的自备无水乙醇充分震荡混匀后,室温13000 g离心5分钟,去尽上清。
15. 加入1mL 75%乙醇,充分混匀后室温13000g离心5分钟,去尽上清。
16. 重复上步一次。
17. 短暂离心,去尽残留溶液(此步十分重要,不要省略)。
18. 短暂晾干半分钟,加入适量DNA 洗脱液2.0 溶解DNA(对细胞核DNA,可加入500μL DNA 洗脱液2.0,对线粒体DNA,可加入50μL DNA 洗脱液2.0)。
19. 65℃保温15分钟以便彻底溶解DNA沉淀。溶解后的DNA可以立即用于后续的OD 检测、酶切、PCR或其他实验,也可以放置在-20℃长期保存。
北京现货柱式探针纯化试剂盒优惠价关键词:Column Probe Purification Kit,BTN121122,柱式探针纯化试剂盒
137-08-6 D-泛酸* D-Pantothenic acid(Vitamin B5)
PCR产物纯化试剂盒 50次|100次
BTN100539 胰凝乳蛋白酶抑制剂溶液 Chymostatin Solution
黑色素(醇溶) 12-Aminolauric acid 8005-02-5
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004001 小牛胸腺DNA 50mg|100mg
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司盘80 Ammonium iodide 1338-43-8
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