TdT加尾法DNA探针标记试剂盒现货供应

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

TdT加尾法DNA探针标记试剂盒现货供应是高品质的探针标记及检测产品，由北京百奥莱博供应，用于科研实验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多TdT加尾法DNA探针标记试剂盒等探针标记及检测产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：TdT加尾法DNA探针标记试剂盒现货供应
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
编号：BTN90605A
规格：5次
本试剂盒是基于TdT末端转移酶能够在DNA的3´端添加dNTP尾巴的原理而设计，该反应的示意图如下：


产品特点：
1.快速，15分钟即可完成标记反应。
2. 不但可用于单链DNA和DNA Oligo标记，还可用于3´突出的双链DNA标记，但后者标记效率稍低。
3.可用同位素底物和非同位素底物(生物素和地高*(代"辛")标记的核苷酸等)。
4. 提供不带标记核苷酸、带生物素标记核苷酸和带地高*(代"辛")标记核苷酸三种选择。
5. 同时提供非标记的dATP，用户可以用其调节加尾长短和标记核苷酸掺入比例。
6. 标记的探针可用于电泳迁移率实验(EMSA)、原位杂交(ISH)、Northern Blot(不推荐用于低丰度RNA检测)、小RNA Northern、Southern Blot(不推荐用于单拷贝基因检测)、菌落杂交、斑点印迹杂交分析等。

试剂盒组成：

 

成分	规格
TdT缓冲液，5×	20μl
TdT(末端转移酶，10U/μL)	10μl
dATP，2mM	5μl
标记核苷酸	(A、B、C不同，见注)
超纯水	1ml
说明书	1份

注：A型用于自选标记，用户需自备标记核苷酸，本产品不提供标记核苷酸；B型提供5μl Biotin-11-dUTP；C型提供含5μl DIG-11-dUTP。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1.在0.2mL微量离心管中按下表设置一个20μl体系的标记反应(如果需要标记更多探针，请增加标记体积而不要增加探针DNA的浓度)：

成份	用量
探针DNA	100-200 pmol
TdT Buffer，5×	4μl
标记核苷酸，1mM (A型需自备标记核苷酸)	1μl
dATP，2mM	(见下注)
TdT末端转移酶(10U/μL)	2μl
超纯水	补到20μl

注：dATP可以不加，但这样得到的加尾全部是标记核苷酸，由于空间阻碍，灵敏度不一定最佳。如果杂交效果不好，掺入一定比例的dATP到标记核苷酸中，以控制标记的密度，提高比活。具体比例如何可以自己优化。
2. 37℃反应15分钟，延长到30分钟也可以。如果没有非标记核苷酸存在，一般可以加尾3-5个Biotin或DIG标记的核苷酸(标记物空间阻碍抑制延长)；如果有在加尾反应中加入一定比例的非标记核苷酸dATP(其他dNTP也可，只是本试剂盒只提供dATP而已)，每条探针上可加上约100个核苷酸，平均含5个标记核苷酸
3. 70℃ 10分钟灭活TdT酶。
4. 如果需要，可以PAGE电泳+银染(相关试剂需要另购)检测标记效率，带标记的探针泳动速度将低于没标记的探针。
5. 如果是非同位素标记，探针不需纯化可以直接用于杂交。如果需要纯化非同位素标记的探针，请不要酚/*仿抽提，因为非同位素标记物一般会使探针DNA进入有机相而丢失。
6. 使用时需将探针以1-8 ng/μL的终浓度加入到杂交液中(如果探针是双链DNA，加入前还需热变性)。如果不立即使用，非同位素标记的探针DNA可-20℃长期放置一年，同位素标记的探针DNA不能放置。

想要了解更多关于TdT加尾法DNA探针标记试剂盒现货供应的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息，请和我们联*(代"系")。此外我公司还销*(代"售")下面的产品：

·超级杂交液(芯片)
编号：BTN130905
英文名称：Super hybrid solution(chip)
规格：10mL
基因芯片是将大量靶基因(DNA片段)有序地、高密度地点在玻璃片或硅片或塑料片上等载体上所形成的矩阵。基因芯片杂交一般情况下是将待测的两种样品(主要是RNA样品)分别用Cy3和Cy5两种荧光染料标记，制备成探针与芯片杂交，杂交信号用激光扫描仪检测，计算机分析检测结果，可获得类似与传统的点杂交的杂交数据，以达到快速、高效、高通量及平行性的分析表达谱的目的。本产品为即用型芯片专用的杂交液，可用于各种标记的探针(主要是Cy3和Cy5标记的RNA探针)跟基因芯片的杂交实验。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
一、预杂交(下面的操作以载玻片为例)
 预杂交的主要作用是在加入标记探针之前从载玻片上洗去未结合的靶基因(靶DNA)，同时封闭载玻片表面可能与标记探针进行非特异性结合的反应性基团(如自由*基)，从而降低非特异的背景。所有的预杂交、杂交、杂交后洗涤都在Coplin染缸或者显微镜载玻片盘等杂交盒中进行。
1.在室温下，将载玻片浸入装有本产品的杂交盒中(本产品的用量根据杂交盒的大小决定，以能够浸埋载玻片为准)。将杂交盒在42℃水浴中放置30～45分钟，无需震动。
2.在室温下用去离子水清洗载玻片数次。
3.(可选)用100%异丙醇(HPLC级)漂洗载玻片。
4.在加入杂交溶液之前，空气晾干或者通过离心(室温下以2000g离心5分钟，有阵列的一面朝外)干燥载玻片，将干燥后的载玻片立即用于杂交。如果载玻片干燥时间超过1小时，杂交效率可能会迅速下降。
二、杂交
1. 将等同于至少1μg polyA RNA或100μg总RNA的Cy3和Cy5标记的探针RNA混合在一起，最终体积约为6μL。如果没有这么多的，则需要进行RNA扩增。
2. 将6μl标记DNA和30μL本产品在塑料离心管中混合，得到杂交液。
3.(可选)将杂交液在微量离心机中10,000 g离心5分钟，然后将上清液转移到新的塑料离心管中。本步骤以去除靶序列纯化过程中带入的微量玻璃纤维和其他高分子质量的颗粒。
4. 将上清液在100℃下加热2分钟，然后在30℃水浴中冷却30秒。加热混合液可以降低背景。不要将溶液放置在冰上，因为可能会有沉淀析出。
5. 将适量的杂交溶液加到DNA微阵列上，再小心的盖上盖玻片，盖玻片和DNA微阵列之间不能有气泡。
6. 将载玻片置于一个空的移液器吸头盒的上层，下层装5mL自备的3×SSC，盖上盖子即得潮湿的环境。由于杂交是在很小的体积下进行的，在密闭的潮湿保持适当的杂交适度非常重要，过分干燥则盖玻片会粘附在DNA微阵列上，背景会很高；过于潮湿则冷凝的液体会进入盖玻片区域，降低杂交信号。
7.在42℃下将载玻片温育14~16小时。
三、杂交后的清洗
 注意在下面的所有操作过程中，一定不要让载玻片干燥。
1.杂交完毕，拆卸杂交盒。如果杂交盒是浸入水浴中的，在松开螺丝之前，仔细擦干水痕，尤其是两个半片盒子之间的水痕。
2.从杂交盒中取出载玻片，浸没于大量的0.5×SSC(含0.01 % SDS)溶液中，直到盖玻片分离。
3. 盖玻片除去后，将载玻片放到玻片夹持器上，然后浸入装有约250mL 0.5×SSC(含0.01 % SDS)溶液的避光容器中。将容器放在轨道振荡器上，并将载玻片振荡2分钟。
4. 将载玻片和夹持器一起浸入到另一个装有约250mL 0.5×SSC溶液的容器中，再次将载玻片振荡3分钟。
5. 将载玻片和夹持器一起浸入到另一个装有约250mL 0.1×SSC溶液的容器中，再次将载玻片振荡3分钟。
6. 重复上一步2次，每次清洗1分钟。
7.快速(<10秒)将载玻片和夹持器一起浸入到另一个装有约250mL 0.01×SSC溶液的容器中，立即将载玻片放到铺有3M Whatman滤纸的离心机微量滴定板夹持器中。低速离心约5分钟迅速干燥玻片。
8. 将载玻片放置在避光的盒子内直到准备扫描。(尽量在当日内进行扫描，因为随着时间的延长信号会降低)

疑难解答：
问题一：高背景(荧光或黑洞)
解决方案：对标记探针进行足够的纯化；清洗过程中操作要迅速，避免载玻片干燥；杂交溶液需要与载玻片基底相匹配。
问题二：没有杂交信号或杂交信号非常弱
解决方案：杂交过程中应该连续振荡，不应该有气泡，避免玻片变干；检查RNA的纯化和标记；更换杂交试剂。


TdT加尾法DNA探针标记试剂盒现货供应关键词：BTN90605A,TdT加尾法DNA探针标记试剂盒,TdT-Tailing DNA Labeling Kit

5-*代水杨酸 Safranine T 89-55-4
ARB12540 大鼠胰岛素样生长因子1(IGF-1)酶标法分析 Rat insulin-like growth factor 1,igf-1 ELISA KIT
ARB13639 兔子脑*素/脑*尿肽(BNP)定量分析 Rabbit brain natriuretic Peptide,bnp ELISA KIT
PY02-290  麦氏培养基(醋酸*培养基)  250克  
2′-脱氧胞苷 TMB 951-77-9
ARB12924 小鼠主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHC-Ⅱ/H-2Ⅱ尿液中含量检测 Mouse major Histocomp*(代"a")tibility complex-Ⅱ,mhc-Ⅱ/h-2Ⅱ ELISA KIT
Tris-EDTA缓冲液(10×TE,pH7.4)   500ml
ARB13689 兔纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)elisa检测说明书 Rabbit plasmin-antiplasmin complex,pap ELISA KIT
DP324 海洋动物基因组DNA提取试剂盒
细胞存活率检测试剂盒   100T
ARB10808 人抗甲型肝炎病毒IgM抗体(Anti-HAV)含量测试 Human anti-hepatitis a virus igM antibody，anti-hav ELISA KIT
ARB13254 小鼠游离脂肪酸(FFA)免费代测 Mouse free fatty acids,ffa ELISA KIT
亮蓝 Enrofloxacin 3844-45-9
PY01-130  6-糠*基嘌呤  1克  
F040306 小鼠IgG抗原 Mouse IgG
1390-65-4 洋红 Carmine
PY08-049  GVPC琼脂 9CM  10皿/盒，用于选择性分离培养军团菌
*化*溶液(60mmol/L)   100ml
酒石酸铵 DL-Homocysteine thiolactone hydrochloride 3164-29-2
002017 草酸*抗凝牛血 100ml|500ml
ARB13810 豚鼠钩端螺旋体IgG(LebtospIrA)代做ELISA实验 Guinea pig lebtospira igG ELISA KIT
TdT加尾法DNA探针标记试剂盒现货供应关键词：BTN90605A,TdT加尾法DNA探针标记试剂盒,TdT-Tailing DNA Labeling Kit


·热启动Taq DNA聚合酶
编号：BTN120401
英文名称：HotStart Taq DNA Polymerase
规格：100U
热启动Taq DNA聚合酶设计用于增强DNA扩增的特异性、敏感性和产量。使用该酶可在室温配制反应体系，使用非常方便。热启动Taq DNA聚合酶是一种重组Taq DNA聚合酶，蛋白分子*基酸残基上增加了热不稳定的封闭基团。该酶在室温下没有活性，避免形成引物二聚体和非特异性延伸。从而增加DNA扩增的特异性。95℃加热4分钟可恢复酶活性。活化的酶具有与热启动Taq DNA聚合酶相同的功能：催化5´→3´方向合成DNA、无可检测的3´→5´校正外切酶活性、具有较低的5´→3´外切酶活性。该酶还具有脱氧核糖核酸酶转移活性，在PCR产物的3´-端多加1个腺嘌呤。活化前检测不到这些活性。

产品特点：
1．高产量扩增复杂模板。
2．不需要95℃加热4分钟即可激活酶活性。
3．PCR特异性高-降低错配效应和减少引物二聚体的生成。
4．增强的PCR敏感性。
5．使用方便，室温配制PCR反应体系。
6．扩增产物具有3´-dA突出末端。

产品组成：

成分	规格
热启动Taq DNA聚合酶(5U/μL)	20μl
10×反应 Buffer	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
以下举例为常规PCR反应系统，仅供参考。实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异，需根据模板、目的片段的大小、碱基序列和引物长短等具体情况，设定最佳反应条件。10×HotMaster Taq Buffer中含有Mg2+，配有浓度为15mM MgCl2 。实际PCR反应可因模板等的不同酌情向反应体系中添加适量的Mg2+，设置最佳的反应体系。该酶最适延伸温度为65℃，可在60℃-70℃之间调整。

以人基因组DNA为模板，护增1kb的片段
1．反应体系的建立：50μL反应体系如下(可根据比例放大或缩小反应体系)：

2．PCR反应循环的设置：

3．结果检测：反应结束后取5μl反应产物，琼脂糖凝胶电泳检测。

我公司强烈推荐探针标记及检测系列产品，热情期待您的咨询选购TdT加尾法DNA探针标记试剂盒现货供应。