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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
281
- 英文名:
NP-40 Lysis Buffer
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输,-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货NP-40裂解液特价优惠,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京现货NP-40裂解液特价优惠
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
规格:100mL
编号:BTN131009
NP-40裂解液是一种比较温和的细胞组织裂解液。NP-40裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP和co-IP等。
产品特点:
1. 本产品裂解能力强度温和,对膜蛋白的处理能力一般;对核蛋白的提取能力较好;对胞浆蛋白、胞浆磷酸化蛋白和各种转录因子处理效果很好。
2. 本产品含有各种蛋白酶和磷酸蛋白酶抑制剂,能有效防止各种蛋白酶对目的蛋白的降解。
3. 本产品的主要成分为50mM Tris(pH7.4),150mM NaCl,1% NP-40以及sodiu*(代"m") pyrophosphate,β-glycerophosphate,sodiu*(代"m") orthovanadate,sodiu*(代"m") fluoride,EDTA,leupeptin等多种抑制剂,可以有效抑制蛋白降解。
4. 用NP-40裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用BCA法蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
对于培养细胞样品:
1. 融解NP-40 裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
2. 对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g离心3~5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
裂解液用量说明 :通常6孔板每孔细胞加入150 微升裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200 微升或250 微升。
对于组织样品:
1. 把组织剪切成细小的碎片。
2. 融解NP-40 裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
3. 按照每20 毫克组织加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)
4. 用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g离心3~5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6. 如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
备注:
1. 为取得最佳的使用效果,尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。
2. 裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
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·DNA marker(300-10000bp)
编号:BTN70503Z
英文名称:DNA ladder(300-10000bp)
规格:50次
本系列产品用作凝胶电泳中双链线状DNA的分子量大小参照。它们是由一系列大小不同的单一DNA片段混合组成。成分中已经含有上样缓冲液,所以可以直接上样电泳。得到的电泳条带长度准确,明亮清晰,背景较低,稳定性很好。每次加样量为5μL,可用于相对定量。本系列产品与各种琼脂糖和各种电泳缓冲液兼容。
储存条件:低温运输、-20℃保存,有效期一年。
使用方法:直接上样电泳,每次加样量为5μL。
使用效果:

注:2000bp条带为20ng/uL,其余每条带为10ng/uL
疑难解答:
a)如对带型要求较高,建议使用0.8-1.5%琼脂糖凝胶(对SuperBuffer-2缓冲液,电压为250-400V)或1.5-2.0%琼脂糖凝胶(对TAE或TBE缓冲液,电压为80V),同时适当延长电泳时间。
b)电泳图象的质量与琼脂糖、电泳缓冲液有关。请采用高质量的琼脂糖,同时要经常更换电泳缓冲液。
c)本产品条带均匀,亮度相当,但在EB胶中长时间电泳有可能会出现250bp以下的条带变淡。可以通过先电泳再染色,加大EB浓度等方法解决。
·一站式平末端克隆试剂盒
编号:BTN131126
英文名称:One-Stop Blunt-ended Cloning Kit
规格:20次
基因片段用Pfu等DNA聚合酶扩增得到的产物为平末端,直接克隆比较困难。做T/A克隆时,需要在其末端添加单个碱基A。本试剂盒提供了在平端添加单个A所需的所有试剂,大大方便后续的T/A克隆及序列分析。
产品特点:
1.适用范围包括:由高保真 DNA聚合酶如 Pfu、Pwo 、DeepVent等扩增而来的PCR产物;一些限制性内切酶如 EcoRV 、SmaI等酶切产生的DNA片段;粘端DNA用DNA聚合酶补平后的片段。
2.可以在任何平末端DNA片段两端分别补上单个脱氧腺嘌呤 A,间接将PCR产物克隆到T载体上。
3. 操作快速,5分钟就可以完成 。
| 成份 | 规格 |
| ddH2O | 1mL |
| 平末端载体 | 20μl |
| 10×克隆Buffer | 0.5mL |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1.在离心管中加入下列溶液:
| 成份 | 用量 |
| DNA Fragment | 10ng |
| 10× Cloning Buffer | 5μL |
| 平末端载体 | 1μL |
| ddH2O | up to 50μL |
2. 72℃保温,5分钟。
3.产物回收或者 -20℃保存备用。
北京现货NP-40裂解液特价优惠关键词:NP-40 Lysis Buffer,NP-40裂解液,BTN131009
BL0826 HRP标记兔抗HRP抗体
新生霉素 BEPyBr 1476-53-5
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北京现货NP-40裂解液特价优惠关键词:NP-40 Lysis Buffer,NP-40裂解液,BTN131009
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