BTN90404型植物RNA柱式提取试剂盒2.0批发

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百奥莱博专业生产销*(代"售")BTN90404型植物RNA柱式提取试剂盒2.0批发，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：BTN90404型植物RNA柱式提取试剂盒2.0批发
产地：国产|进口
英文名：Plant RNA Column extraction kit 2.0
品牌：百奥莱博
编号：BTN90404
本试剂盒是柱式植物RNA提取试剂盒(BTN71203)与柱式DNA清除剂(BTN90318)整合后得到的升级产品，它解决了提取的植物总RNA中出现基因组DNA污染这一难题，提取的RNA通过PCR验证不含基因组DNA污染。

试剂盒特点：
1. 操作简单快速，处理一个样品只需要约十几分钟。
2. RNA纯度更高，平均 OD260/280一般都在2.0左右，能够有效去除大多数植物中的多糖污染。
3. 所提取RNA不含基因组DNA污染(电泳及PCR均检测不到)。
4. 得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA合成等实验。
5. 性价比高于进口的柱式植物RNA提取产品。
6. 本试剂盒方法提取不到总RNA中的miRNA。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	50ml
溶液B	15ml
溶液C	50ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	100ml
膜反应液	2.5ml
RNase-free DNase(1U/μL)	0.5ml
RNA洗脱液	10ml

储存条件：常温运输，4℃保存(DNase 需要-20℃保存)，有效期一年。

使用方法：
1. 估算组织细胞的用量。每次微量提取一般需要100-200mg植物叶片、或50-100mg植物种子、或200-500mg植物果实。
2. 先将新鲜植物组织剪切成小块(保存在RNAhold中的植物组织需用纸吸去RNAhold液体后再剪切成小块)，放入10-15mL塑料离心管中，加入1mL 65℃预热的溶液A(用前需要摇晃混匀)，然后用匀浆器匀浆5-20秒。匀浆时会产生泡沫，但不影响提取效果。也可以使用液氮研磨法破碎植物组织，研磨完后加入1mL溶液A，但效果比较差，因为研钵本质是二氧化硅，在溶液A存在时会吸附RNA。
3. 将匀浆物或研磨物转移至干净的1.5mL塑料离心管中(可以不必转移非液体的细胞碎片)。有的植物组织(比如果实)含有大量水份，匀浆液会多于1mL，转移时也只取1mL。
4.在离心管中加入0.3mL的溶液B和0.2mL自备*仿，在振荡器上振荡30秒混匀，此时溶液呈均匀的乳浊状。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
5.室温12000rpm离心3～5分钟，两相间将有约5毫米厚的细胞破碎物。
6. 将上清液(约0.6mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中，下层有机相和中间层含有DNA、蛋白质和其他杂质，避免触及或吸取。最好留下100μL上清液不取。
7. 加入跟上清液等体积的溶液C，充分颠倒混匀。如果有沉淀产生(对某些植物，属于正常现象)，千万不要去掉沉淀，一定要把所有的混合物上柱。
8. 将一半的混合液(含沉淀物，如果有的话)转移到离心吸附柱中，12000rpm室温离心半分钟，弃穿透液。
9. 将剩下的一半的混合液(含沉淀物，如果有的话)转移到同一离心吸附柱中，12000rpm室温离心半分钟，弃穿透液。
10. 加0.7mL通用洗柱液，12000rpm室温离心半分钟，弃穿透液。再加0.3mL通用洗柱液，12000rpm室温离心半分钟，弃穿透液。一般样品如此洗涤两次即可，但对于在第7步加入溶液C后有沉淀产生的样品，则需要洗三次，每次加入的通用洗涤液的量分别为0.4、0.3和0.3mL，其他操作不变。
11. 12000rpm室温离心10秒以便去除残留液体。此步很重要，否则残留的通用洗柱液会抑制后续反应中DNase的活性。
12. 将10μL(10 U)的RNase-free DNase加入到50μL 37℃预热的DNA膜反应液中，吹打混匀配制成DNase工作液。
13. 将DNase工作液在37℃预热1分钟，然后全部加入到离心吸附柱中，室温放置5分钟。注意：5分钟一般足够降解大多数情况下的DNA污染。如果DNA没有彻底降解(可能由于样品中残留的杂质抑制了DNase的活性)，此步的保温时间可以适当延长到10分钟或15分钟。
14. 直接在离心吸附柱中加0.7mL通用洗柱液，盖上盖后颠倒数次混匀。
15. 12000rpm室温离心半分钟，弃穿透液。
16. 再加0.3mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12000rpm室温离心半分钟，弃穿透液。
17. 12000rpm室温离心半分钟。此步十分重要，否则残留的乙醇(通用洗柱液中的成分)会影响RNA的使用。
18. 将离心吸附柱转移到RNase-free收集管中，加入30-50μL RNA洗脱液，室温放置1-2分钟。
19. 12000rpm室温离心半分钟，离心管中溶液即为RNA样品。本产品提供的离心吸附柱吸附力较强，一次洗脱不能全部将膜上RNA洗下，如有必要，可以再加入30-50μL RNA洗脱液一次。
20. 所得RNA溶液可以立即使用或存放于-80℃待用。如果要进行甲醛变性电泳检测。如果使用非变性胶电泳，则必须使用RNAload上样液。千万不能使用DNA上样液(因为它一般没经过去RNase处理)。


关于BTN90404型植物RNA柱式提取试剂盒2.0批发的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

·T4 RNA连接酶
编号：BTN120421
英文名称：T4 RNA Ligase
规格：1000U
本酶催化ATP降解为AMP和焦磷酸的反应，释放的能量能使寡核苷酸的5´-P末端和3´-OH末端结合，也能催化分子内连接的环化反应以及分子间的连接反应。最小底物为NpNpNOH(3´-OH Oligomer、受体)、pNp(5´、3´-DP monomer、供体)。连接效率受供体和受体各自的碱基影响很大。与RNA相比DNA连接的效率较低。

产品用途：
1．单链RNA及单链DNA的3´-OH末端的标记。
2．单链Oligo RNA及单链Oligo DNA的合成。
3．合成全长cDNA。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：以Oligo(A)n为底物，在5℃、10分钟内使1pmol［5´–³²P］pCp 掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位。

·杆菌肽溶液
编号：BTN120682
英文名称：Bacitracin Solution
规格：1mL
本产品是浓度为100mg/mL的杆菌肽溶液。杆菌肽(枯草菌肽； 雀西杆菌素；Ayfivin；Baciguent；Bacitin)，分子式C66H103N17O16S ，分子量是1422.69，CAS号是1405-87-4，易溶于水，能溶于乙醇、甲醇和冰乙酸。杆菌肽是由地衣型芽孢杆菌产生的多肽类抗生素，对大多数革兰氏阳性菌特别是耐药葡萄球菌具有较强的抗菌作用。

抗性机制：本品溶液能被多种重金属盐类沉淀，抗菌谱与青霉素相似，对革兰阳性细菌和阴性球菌、肺炎双球菌、葡萄球菌、淋球菌、脑膜炎双球菌及螺旋体等均有杀菌作用。其作用机制不仅作用于细胞壁，也影响原生质体，对胞浆膜也有损坏作用，影响其渗透性。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期6个月。


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·微球菌核酸酶
编号：BTN120412
英文名称：Micrococcal Nuclease
规格：5000U
微球菌核酸酶是一种内切核酸酶，作用于单链及双链核酸，生成3´磷酸末端。对单链核酸的作用较好，能较好地分解DNA或RNA的富含AT或AU区域。本酶不需要Mg2+，其催化作用需要Ca2+的存在。

产品用途：
➤细胞粗抽提液中核酸的水解。
➤ 为制备核小体时消化分解染色质。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

储存Buffer：Tris-HCl(pH8.0)50mM，NaCl 50mM，DTT 1mM，Glycerol 50%。
反应Buffer(10×)：Tris-HCl(pH8.0)200mM，NaCl 50mM，CaCl₂ 25mM。

活性定义：以热变性小牛胸腺DNA作底物，在37℃、pH8.0的条件下，30分钟生成1 OD260的酸可溶性物质所需要的酶量定义为一个活性单位(U)。

纯度：
1．50U的本酶和1μg的λDNA在Mg 存在下，37℃反应10分钟，DNA的电泳谱带不发生变化。
2．SDS-PAGE：＞95%。

·20%CTAB溶液(DNA级)
编号：BTN101107
英文名称：Micrococcal Nuclease
规格：250mL
微球菌核酸酶是一种内切核酸酶，作用于单链及双链核酸，生成3´磷酸末端。对单链核酸的作用较好，能较好地分解DNA或RNA的富含AT或AU区域。本酶不需要Mg2+，其催化作用需要Ca2+的存在。

产品用途：
➤细胞粗抽提液中核酸的水解。
➤ 为制备核小体时消化分解染色质。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

储存Buffer：Tris-HCl(pH8.0)50mM，NaCl 50mM，DTT 1mM，Glycerol 50%。
反应Buffer(10×)：Tris-HCl(pH8.0)200mM，NaCl 50mM，CaCl₂ 25mM。

活性定义：以热变性小牛胸腺DNA作底物，在37℃、pH8.0的条件下，30分钟生成1 OD260的酸可溶性物质所需要的酶量定义为一个活性单位(U)。

纯度：
1．50U的本酶和1μg的λDNA在Mg 存在下，37℃反应10分钟，DNA的电泳谱带不发生变化。
2．SDS-PAGE：＞95%。


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·20%PVP K30溶液(不含RNase)
编号：BTN60605
英文名称：RNase-free PVP K30
规格：250mL

·预染蛋白Marker(14.4～97.4kD)
编号：BTN70704A
英文名称：Prestained Protein Marker(14.4-97.4kD)
规格：10次
本产品为蛋白质电泳标准系列，是预染成蓝色的数个标准蛋白质的混合物，在SDS-PAGE时和转膜后可以作为分子量标准，粗略估计其他蛋白质的分子量大小。

产品特点：
1．提供干粉型或溶液型，即开即用，非常方便。
2．预染色，在电泳过程中可以观察蛋白质的泳动，也可以监测转膜效果。
3．可用于SDS-PAGE和Western Blot等实验。
4．本系列两种产品涵盖从14.4kD-200kD的分子量范围，单次上样，每个条带的浓度约为0.2μg/μL。

产品组成：

成分	A型	B型
预染蛋白标准(低分子量)	20T	-
预染蛋白标准(高分子量)	-	10T
1×SDS-PAGE上样液	0.5ml	0.5ml
说明书	1份	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一、干粉型的使用
1．开封后将1×SDS-PAGE上样液加入到样品管中溶解蛋白质粉末，各分子量标准所需的1×SDS-PAGE上样液的体积如下:
低分子量标准(BTN70704A)需要200μL。
中分子量标准(BTN70704B)需要100μL。
2．低分子量标准(BTN70704A)沸水浴中加热5分钟，短暂离心后将溶液按每管10μL的体积分装到多个塑料离心管中，置-20℃长期保存。
中分子量标准(BTN70704B)待完全溶解后，直接按每管10μL的体积分装到多个塑料离心管中，置-20℃长期保存。
3．使用时每次取一管，低分子量标准(BTN70704A)室温放置直到液体融化后即可上样进行SDS-PAGE电泳。中分子量标准(BTN70704B)需要在使用前65℃保温5分钟，然后上样进行SDS-PAGE电泳。BTN70704A型推荐使用12%的分离胶、BTN70704B推荐使用8%的分离胶。
4．电泳后进行考马斯亮蓝G-250染色，染色后出现的带型见上表。

二、溶液型的使用
1．将溶液按每管一次电泳的用量分装到塑料离心管中冻存，每次只用一管，这样避免反复冻融。
2．使用时取一管室温放置直到液体融化。
3．沸水浴中加热3～5分钟后趁热上样并进行SDS-PAGE电泳。BTN70704A型推荐使用12%的分离胶、BTN70704B推荐使用8%的分离胶。
 电泳后进行考马斯亮蓝G-250染色，染色后SDS-PAGE胶上将可见6条蛋白带(对BTN70704A)或6条蛋白带(对BTN70704B)，但由于共价结合了染料分子，各预染蛋白的分子量均稍大于染色前的蛋白，所以如果不需要精确估算未知蛋白的分子量，一般以染色前的各蛋白质的分子量作为参考。如果需要精确估算未知蛋白的分子量，则必须使用非预染蛋白电泳标准系列产品(BTN70102)，以避免误差。

本系列产品所含成分及分子量分布

分子量范围		低分子量	高分子量
肌球蛋白重链	200kD		有
*调素结合蛋白	130kD		有
兔磷酸化酶B	97.4kD	有	有
牛血清白蛋白	66.2kD	有	有
兔肌动蛋白	43kD	有	有
牛碳酸酐酶	31kD	有
人生长激素	22kD	有
大豆胰蛋白酶抑制剂A	20.1kD
鸡蛋清溶菌酶	14.4kD	有

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