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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
963
- 英文名:
T4 Polynucleotide Kinase
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京T4聚核苷酸激酶厂家价格,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京T4聚核苷酸激酶厂家价格
品牌:百奥莱博
编号:BTN120506
规格:250U
产地:国产|进口
T4聚核苷酸激酶能够催化ATP的γ-位磷酸基团转移到寡核苷酸链(双链或单链DNA或RNA)的5´-羟基末端以及3´-单磷酸核苷上。本产品还具有3´磷酸酶活性,将3´-磷酸基团从寡核苷酸的3´磷酸末端、脱氧3´-单磷酸核苷和脱氧3´-二磷酸核苷上水解掉。其反应示意图如下:

产品用途:
1.DNA或RNA的末端标记,用作寡核苷酸探针和进行DNA测序。
2.寡核苷酸5´末端的磷酸化,以便进行连接反应。
3.除去3´磷酸基团。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| T4聚核苷酸激酶,10U/μL | 25μl |
| 10×反应缓冲液 | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1 单位指在37℃条件下,30分钟内催化 1nmol 酸不溶性 [32P] 掺入所需要的酶量。
1×反应缓冲液:[70mM Tris-HCl(pH7.6@25℃),10mM MgCl2,5mM DTT],37℃温育。
热失活:65℃加热20分钟。
来源:重组E.coli菌株,克隆有T4多聚核苷酸激酶或修饰的T4多聚核苷酸激酶基因。
自备试剂:0.5M EDTA(pH8.0)、[γ-³²P或γ-³³P]-ATP或0.1mM ATP、DNA纯化试剂盒。
使用方法:
一、DNA 5´末端标记:
1.参考如下表格设置反应体系:
| 待磷酸化DNA | 1~50 pmol(5´末端) |
| 10×反应缓冲液 | 5μL |
| 自备的[γ-³²P或γ-³³P]-ATP(3000Ci/mmol) | 50pmol |
| 补充无核酸酶的去离子水 | 至48μL |
| T4聚核苷酸激酶,10U/μL | 2μL |
2.按上表设置好反应体系后,轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用Vortex在最低速度轻轻混匀),随后离心沉淀液体。
3.37℃孵育30分钟。
4.加入自备的1μL 0.5M EDTA(pH8.0)混匀,以终止反应。
5.后续可以使用酚*仿抽提、乙醇沉淀等方法纯化标记的DNA,也可以使用适当的DNA 纯化试剂盒进行纯化。DNA纯化试剂盒可以向我公司订购。
二、DNA 5´末端磷酸化:
1.参考如下表格设置反应体系:
| 待磷酸化DNA | 1~50 pmol(5´末端) |
| 10×反应缓冲液 | 5μL |
| 自备的0.1mM ATP | 3μL |
| 补充无核酸酶的去离子水 | 至48μL |
| T4聚核苷酸激酶,10U/μL | 2μL |
2.按上表设置好反应体系后,轻轻混匀(可以用移液器吹打混匀或用Vortex在最低速度轻轻混匀),随后离心沉淀液体。
3.37℃孵育30分钟。
4.加入自备的1μl 0.5M EDTA(pH8.0)混匀,以终止反应。
5.后续可以使用酚*仿抽提、乙醇沉淀等方法纯化标记的DNA,也可以使用适当的DNA 纯化试剂盒进行纯化。
欲了解更多北京T4聚核苷酸激酶厂家价格的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:
·一步式RT-PCR Mix
编号:BTN130609
英文名称:One-Step RT-PCR Mix
规格:1mL
本产品是基于Tth DNA聚合酶的单酶一管式RT-PCR试剂盒。Tth DNA聚合酶通过其逆转录酶活性合成cDNA,再通过其DNA聚合酶活性进行PCR扩增。它跟常规MMLV和AMV的最大区别是逆转录过程可以在高温进行,能有效打开RNA的二级结构,其示意图如下:
同时操作简单一步完成,其操作流程图如下:
产品特点:
1.中途添加试剂,省去反复打开和关闭反应管盖的麻烦,便于同时处理多个检测样品。
2.样品之间的交叉感染和纵向感染的危险性比较低,可以避免假阳性。
3. 改良了酶的品质,实现了优良的检测敏感度。
4. 即开即用,非常方便。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
·0.5%焦油紫染色液
编号:BTN160682
英文名称:Tar purple Staining Solution
规格:50mL
本产品以进口焦油紫作为核心染料,焦油紫具有感光作用,能够很好地显示尼氏体的变化。尼氏体的存在和消失是神经细胞是否受损的重要指标,当发生脑炎、脑缺血、轴突反应等情况,尼氏体会发生溶解,甚至消失。可以用于石蜡组织切片的尼氏物质、神经元等的染色。
神经元细胞体包括一个具有皱褶核膜的大细胞核、稀疏的染色质和一个明显的核仁。在细胞体中细胞质是尼氏颗粒,即能够代表粗面内质网并在很多神经元中产生特异的斑点状嗜碱性颗粒。尼氏颗粒可以用很多染色来显示如中性红、亚甲基蓝、甲**(代"胺")蓝和甲基紫等。染色的变异、pH和分化的时间使一些染色既可以仅突出尼氏物质,也可以显示神经元的细胞核和神经胶质。尼氏体(Nissl body)或称尼氏小体是分布于神经细胞胞质内的三角形或椭圆形小块状物质,能被碱性染料如硫堇、亚甲蓝、甲**(代"胺")蓝和焦油紫等染料染成蓝紫色。各种神经细胞内斗含有尼氏体,但其形状、数量、分布位置常常不同。尼氏体会因生理状态的变化而变化,是神经元内合成蛋白质的重要部位,当神经元受到刺激后,包体内的尼氏体会明显减少。
储存条件:常温运输和保存,有效期半年。
使用方法:
1.新鲜组织固定于乙醇、Carnoy固定液或中性福尔马林溶液,常规脱水包埋。
2.切片厚5μm,常规脱蜡至水。
3.把切片加入本产品中,将染色缸置于56℃温箱浸染1小时,酒精灯上加温使切片冒气泡为止(大约10分钟)。
4.用蒸馏水冲洗。
5.加入70%乙醇分化1~3分钟,在显微镜下观察至背景接近于无色为止。
6.用无水乙醇迅速脱水。
7.二甲*透明,中性树胶封固。
8.染色结果:尼氏体为紫色,背景接近于无色。
注意事项:
1.0.5%的本产品浓度较高,用于较难染色的物质,常规染色一般多采用0.06-0.1%的浓度。
2.尼氏体离体后容易溶解,所以组织取出后应立即固定,否则难以着色。
3.组织固定起着非常重要的作用,固定可采用乙醇、Carnoy 固定液或中性福尔马林溶液。
4.本产品对石蜡组织切片的尼氏染色效果较好。
5.石蜡切片厚度7~10μm或25μm(皮质神经元密度的评估要用25μm厚的切片)。
6.染色后的标本务必避光保存,否则容易褪色。
7.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
北京T4聚核苷酸激酶厂家价格关键词:T4聚核苷酸激酶,T4 Polynucleotide Kinase,BTN120506
·PLPD固定液
编号:BTN131290
英文名称:PLPD Fixative Solution
规格:250mL
本产品由PLP固定液和重铬酸*混合而得,PLPD固定液又称过碘酸*-赖*酸-多聚甲醛-重铬酸*固定液,尤其适用于免疫电镜中保护抗原性和超微结构。4℃条件下固定时间36-54小时。
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期半年。
·长效期SDS-PAGE配胶液
编号:BTN100909
英文名称:Stable SDS-PAGE Gel Buffer
规格:200mL
本产品专门用于配制长效SDS-PAGE胶,本配胶液pH值偏酸性,使PAGE胶比常规SDS-PAGE更加稳定,便于配预制胶,增加实验的可重复性。
储存条件:常温运输、4℃保存,有效期一年。
·水蛭素溶液(2万ATU/mL)
编号:BTN130542
英文名称:Hirudin Solution
规格:0.1mL
本产品为水蛭素水溶液,浓度为20000ATU/mL,工作浓度为150-200ATU/mL。水蛭素是从水蛭及其唾液腺中提取的含65个*基酸残基的小分子蛋白,水蛭素对凝血酶有极强的抑制作用,是迄今为止所发现最强的凝血酶天然特异抑制剂。基因重组水蛭素是一种单链环肽化合物,相对分子量约为7000 道尔顿,是目前发现的最强的凝血酶特效抑制剂,其作用不依赖于抗凝血酶Ⅲ。
产品特点:
1.其优点是抗原性弱,少有过敏反应。
2. 不与血小板结合,极少导致血小板减少。
3. 稳定性好,毒性低。
储存条件:低温运输,-20℃保存。
活力单位定义:一个抑制单位ATU(anti-thrombin unit)指,37℃下,灭活一个NIH 单位凝血酶的量
使用方法:根据具体实验要求不同,加入所需要量的本产品。一般建议工作浓度为150-200ATU/mL。用户可以按照要求稀释本产品。后续按照常规操作即可。
北京T4聚核苷酸激酶厂家价格关键词:T4聚核苷酸激酶,T4 Polynucleotide Kinase,BTN120506
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【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答
液: 1X T4 DNA Ligase Buffer: [50 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 10 mM DTT, 1 mM ATP, 25 µg/ml BSA, (pH 7.5 @ 25°C)]。推荐DNA浓度(0.1 - 1 µM 的5′末端)。 使用注意:ATP是反应必须的辅因子。这一点与要求NAD作辅因子的大肠杆菌DNA连接酶不同。 如在反应体系中补加1 mM的ATP,连接反应还可以在NEB提供的四种限制性内切酶缓冲液(NEBuffers)或在T4 DNA多聚核苷酸激酶
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