大肠杆菌HB101化学感受态细胞 克隆与表达

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北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应大肠杆菌HB101化学感受态细胞 克隆与表达，产品信息：

类别：克隆与表达

英文名：E.coli HB101 Chemical Competent Cell

产品名	产品编号	包装规格
大肠杆菌HB101化学感受态细胞	BTN81221	0.1mL*10

英文名：E.coli HB101 Chemical Competent Cell

编号：BTN81221

品牌：百奥莱博

产地：国产|进口

规格：0.1mL*10

 HB101菌株是E.coli K12菌株与E.coli B菌株的杂合产物(同时也是Stbl3的原始菌株)。recA13突变可有效抑制长片段末端重复区的重组，降低错误重组的概率；但不含核酸酶endA1突变，体内核酸酶含量较高，提取质粒时务必使用质粒提取试剂盒中去蛋白液。hsdS20 背景使HB101缺失内切酶系统，增强了外源DNA的稳定性和提取质量。本产品是采用大肠杆菌HB101特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。

 

产品特点：

1. 具有链霉素抗性。

2.基因型：F- mcrB mrr hsdS20(rB- mB-)recA13 leuB6 ara-14 proA2 lacY1galK2 xyl-5 mtl-1rpsL20((strR)glnV44λ-。

3. 不存在 lacIqZΔM15，不可用于蓝、白斑筛选。

4. 该菌株遗传性能稳定，使用方便，适用于各种基因重组实验。

 

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

 

自备试剂：目的DNA、SOC或LB培养基等。

 

使用方法：

1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL，可以根据实际情况分装使用。

以下实验以50μL感受态细胞为例。

2. 待感受态细胞处于冰水混合状态时，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μL感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴25分钟。

3. 42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟，晃动会降低转化效率。

4. 每个离心管中加入450μL 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，200rpm 振荡培养60分钟使菌体复苏。

5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含有相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃倒置培养12-16小时。

 

注意事项：

1. 混入质粒或连接产物时应轻柔操作。

2. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA 总量较少，可取200-300μL转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(5000rpm，1分钟)收菌后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。

3. 新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。

4. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

大肠杆菌HB101化学感受态细胞 克隆与表达专业优质供应商：北京百奥莱博科技有限公司

关键词：大肠杆菌HB101化学感受态细胞,E.coli HB101 Chemical Competent Cell,BTN81221

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编号	类别	名称
BTN100878	蛋白质研究	Western印迹膜封膜液(尼龙膜)
BTN130672	工具酶	核糖核酸酶RNase If
BTN61203	核酸扩增(PCR)	PCR级高GC的DNA清除剂
BTN80906	RNA纯化	一站式miRNA柱式大提试剂盒
BTN100924	蛋白质研究	丽春红S染膜液
BTN140402	RNA纯化	植物RNA提取专用高盐溶液
BTN81212A	蛋白质研究	一站式蛋白质非变性PAGE电泳套装(高pH)
BTN100874	核酸电泳和回收	DNA尿素-PAGE上样液
BTN120682	克隆与表达	杆菌肽溶液
BTN70901	DNA纯化	柱式真菌DNA提取试剂盒
BTN140391	克隆与表达	大肠杆菌T1化学感受态细胞
BTN130992	DNA纯化	柱式酵母DNA提取试剂盒(玻璃珠法)
BTN131199	DNA纯化	一步法96孔板单菌落质粒DNA提取试剂盒(真空法)
BTN130874	蛋白质研究	人玻连蛋白
BTN100909	蛋白质研究	长效期SDS-PAGE配胶液
BTN131119	蛋白质研究	HRP稳定剂/稀释剂
BTN90205	工具酶	RNase A干粉
BTN131071	蛋白质研究	牛血清γ球蛋白标准品(2mg/mL)
BTN60306	DNA纯化	柱式血液DNA提取试剂盒
BTN131236	蛋白质研究	牛血清白蛋白封堵液
BTN131079	蛋白质研究	重组蛋白A
BTN130901	其他培养基	酵母生产及产孢培养基
BTN71206	DNA纯化	柱式动物DNA提取试剂盒
BTN60402	核酸电泳和回收	超快非醇核酸沉淀剂

 

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