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- 百奥莱博
- YT237-LNO
- 北京
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
527
- 英文名：
OCT-1 Mutation Probe For EMSA(10μM)
- 保质期：
一年
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
OCT-1 consensus oligo的序列如下：
5"-TGT CGA ATG CAA ATC ACT AGA A-3"
3"-ACA GCT TAC GTT TAG TGA TCT T-5"
EMSA突变探针－OCT-1中OCT-1的公认的结合位点发生了突变，从而使OCT-1无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中，正常的标记探针和OCT-1的结合的条带会被抑制；而在突变探针冷竞争反应(cold competition)中，正常的标记探针和OCT-1的结合的条带不会被抑制。参考下图。
一个典型的EMSA/Gel- Shift分析图
1,阴性对照反应(标记探针)；
2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针)；
3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记探针)；
4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记突变探针)；
5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋目的转录因子的特异抗体)。
注意事项：
1. 避免加热到40℃以上，温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。
储存条件：-20℃，有效期一年。
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文献和实验有利于RNA的完整性的保持。 doi: 10.1371/journal.pone.0001261. 二、石蜡切片 收到样本以后公司会进行石蜡切片，为了能更好的把切片贴到Visium Spatial玻片的捕获区域，需要先切一些切片来摸索样本在水浴中的展片时间，用Milli-Q水注满水浴，确保温度设定在42°C，并且没有气泡和颗粒物；将切片机设置为5μm（区别于OCT样本切片的10-15μm），开始切片。对于有暴露组织的组织块，丢弃前几个切片，开始收集后续的切片，让切片漂浮在水浴表面
切片面积的大小：因为芯片捕获区域的面积为6.5mm X 6.5mm，所以我们要控制切割区域在这个面积以内； 2，冰冻切片的厚度：冰冻切片的厚度一般设置在10μm，但是根据不同的组织类型，切片厚度也会有所调整。例如脂肪含量较高的乳腺组织可能需要更厚的切片； 3，冰冻切片质量：由于不同的组织样本中脂质、蛋白质含量有所差异，冷冻组织的硬度和延展性并不相同，因此切片的环境温度也有所要求。温度过低，会导致组织块过硬，切片出现碎裂、薄厚不均或孔洞；而温度过高，导致组织变软，硬度不够，切片无法成形或者出现褶皱。 冰冻
Shift Assay ) 凝胶迁移实验是一种研究DNA与蛋白质或RNA与蛋白质相互作用的常用技术。这项技术是基于DNA/蛋白质或RNA/蛋白质复合体在聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）中有不同迁移率的原理。当核转录因子与一条人工合成的特异的DNA或RNA结合后，其在PAGE中的迁移率将小于未结合核蛋白转录因子的DNA，从而检测到活化的与DNA或RNA结合的蛋白转录或调节因子。 发展: 从发展史来看,这项实验技术起初是用32P同位素标记人工合成的寡核苷酸形成探针,但是由于同位素的放射
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