一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(绿色荧光)促销

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北京百奥莱博专业生产销*(代"售")一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(绿色荧光)促销，我公司供应的细胞生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(绿色荧光)促销
规格：20次|50次
编号：YT135
英文名：One Step TUNEL Apoptosis Assay Kit
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
本试剂盒提供了一种高灵敏度又快速简便的细胞凋亡检测方法。对于经过固定和洗涤的细胞或组织，只要经过一步染色反应，洗涤后就可以通过荧光显微镜或流式细胞仪检测到呈现绿色荧光的凋亡细胞。本试剂盒足够检测20个样品。

试剂盒组份：
TdT酶——————————40μl
荧光标记液————————960μl
TdT酶稀释液(选用)————500μl

细胞在发生凋亡时，会激活一些DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测，可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时，暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT)的催化下加上绿色荧光探针荧光素(FITC)标记的dUTP(fluorescein-dUTP)，从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测，这就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法检测细胞凋亡的原理。注：FITC是fluorescein isothiocyanate的缩写，实际上大多数情况下所谓的FITC即为fluorescein。

本试剂盒有如下优点。
(1)高灵敏度：背景染色极低，阳性染色明亮，可以在单细胞水平检测到细胞凋亡，同时由于凋亡早期就有DNA断裂，可以检测到早期的细胞凋亡。
(2)特异性：TUNEL检测时通常更容易标记凋亡细胞，而不容易标记坏死细胞。
(3)快速：仅需约1-2个小时即可完成。
(4)方便：只需一步染色反应，洗涤后即可观察，不必使用二抗等进行多步操作。
(5)应用范围广：可以用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况，也可以检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。

TUNEL法特异性检测细胞凋亡时产生的DNA断裂，但不会检测出射线等诱导的DNA断裂(和细胞凋亡时的断裂方式不同)。这样一方面可以把凋亡和坏死区分开，另一方面也不会把射线等诱导发生DNA断裂的非凋亡细胞判断为凋亡细胞。

极少数细胞凋亡时没有DNA断裂，此时不适用TUNEL法检测。在个别类型的坏死细胞中也发现TUNEL检测呈阳性。在需要严格判断细胞凋亡的情况下，最好同时检测多个凋亡指标。

注意事项：
1. 需自备用于洗涤细胞的PBS或HBSS，用于封片的抗荧光淬灭封片液(YT097)，用于固定的4%多聚甲醛或向百奥莱博订购免疫染色固定液(YT086)，同时需自备含0.1% Triton X-100的PBS或向百奥莱博订购免疫染色洗涤液(YT089)。
2. 如果用于石蜡切片的检测，需自备蛋白酶K，二甲*。

储存条件：-20℃。

我公司的一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(绿色荧光)促销，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：
J0306                  兔抗山羊IgG(H+L)抗血清                        
白细胞稀释液(计数用)   100ml
CYB168014 人血清(混合型) 100ml/瓶
ARB12303 大鼠抗核膜糖蛋白210抗体(gp210)酶标法分析 Rat anti-glucoprotein 210,gp210 ELISA KIT
对**甘*酸 LVFX 6212-33-5
F030502 FITC标记小鼠抗乙肝e抗原抗体 Monoclonal Mouse Anti-HBeAg*FITC
PY02-198B  甘露醇*化*琼脂  250克  
SJ0279 Freund "s Adjuvant Incomplete 弗氏不完全佐剂
L-来苏糖 CHAPS 1949-78-6
5-硝基愈创木酚* N-Acetyl-L-Proline 67233-85-6
Tween20/TBS溶液(10×TBST,pH7.5)   500ml
B0701 绵羊血清(辐照灭菌)
人血清白蛋白(组份五) NTA 70024-90-7
ARB12300 大鼠抗红细胞抗体(RBC)检测服务 Rat anti-red cell antibody ELISA KIT
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·T3 RNA聚合酶
编号：YT408
英文名称：T3 RNA Polymerase
规格：500U
本酶来源于由大肠杆菌表达，表达基因为嗜菌体T3 RNA Polymerase基因，是一种高度特异识别T3启动子序列的DNA依赖的5"→3"RNA聚合酶。T3 RNA Polymerase可以催化单链或双链DNA T3启动子下游NTP的掺入，合成与T3启动子下游的模板DNA互补的RNA。

特点：T3 RNA Polymerase可以识别修饰的NTP，例如生物素标记、地高*(代"辛")标记、荧光素标记的NTP，可以用于各种标记RNA的合成。同时对于T3启动子有高度的特异性。

用途：用于RNA合成，合成的RNA可以用于或用作：杂交探针，基因组DNA序列分析，核糖核酸酶保护测定(RNase protection assay)，反义RNA合成，作为体外翻译的RNA模板，RNA剪接研究的底物，RNA二级结构和RNA-蛋白质相互作用，核酸扩增分析，siRNA、miRNA等小RNA。

活性定义： 37℃60分钟内，催化1nmol AMP掺入到多聚核苷酸中所需的酶量定义为1个活性单位。
活性检测条件：40mM Tris-HCl(pH8.0)，6mM MgCl2，10mM DTT，2mM spermidine，0.5mM NTP，0.6MBq/ml[3H]-ATP，20μg/ml plasmid DNA containing the specific T3 RNA Polymerase promoter sequence。
纯度：不含DNA内切酶和外切酶，不含RNA酶。
酶储存溶液：50mM Tris-HCl(pH8.0)，150mM NaCl，5mM DTT，0.1mg/ml BSA，0.5mM Elugent，50% glycerol。
Transcription Buffer(5X)：200mM Tris-HCl(pH7.9 at 25℃)，30mM MgCl2，50mM DTT，50mM NaCl，10mM spermidine。
失活或抑制：70℃加热10分钟可使T3 RNA Polymerase失活。加入适量EDTA也可以使T3 RNA Polymerase失活。螯合剂、浓度大于150mM的*、*或铵盐可以显著抑制T3 RNA Polymerase的活性。

储存条件：-20℃


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·HIF-1α凝胶迁移突变探针(10μM)
编号：YT227
英文名称：HIF-1α Mutation Probe For EMSA(10μM)
规格：30μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的HIF-1α consensus oligonucleotide的突变体。可以作为EMSA探针－HIF-1α的阴性对照，用于EMSA结合反应中突变探针的冷竞争反应等。一个包装的突变探针，如果用于同位素标记EMSA探针的突变探针冷竞争反应，可以进行90-180个突变探针的冷竞争反应。如果用于生物素标记探针的冷竞争时，可以进行约30个冷竞争反应。

HIF-1 α consensus oligo的序列如下：
5"-TCT GTA CGT GAC CAC ACT CAC CTC-3"
3"-AGA CAT GCA CTG GTG TGA GTG GAG-5"

EMSA突变探针－HIF-1α中HIF-1α的公认的结合位点发生了突变，从而使HIF-1α无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中，正常的标记探针和HIF-1α的结合的条带会被抑制；而在突变探针冷竞争反应中，正常的标记探针和HIF-1α的结合的条带不会被抑制。参考下图。


一个典型的EMSA/Gel- Shift分析图
1,阴性对照反应(标记探针)；
2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针)；
3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记探针)；
4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记突变探针)；
5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋目的转录因子的特异抗体)。

注意事项：
1. 避免加热到40℃以上，温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。

储存条件：-20℃，有效期一年。

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