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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
One Step TUNEL Apoptosis Assay Kit
- 库存:
682
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(绿色荧光)大量库存促销在内的一系列细胞生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(绿色荧光)大量库存促销
英文名:One Step TUNEL Apoptosis Assay Kit
产地:国产|进口
规格:20次|50次
编号:YT135
本试剂盒提供了一种高灵敏度又快速简便的细胞凋亡检测方法。对于经过固定和洗涤的细胞或组织,只要经过一步染色反应,洗涤后就可以通过荧光显微镜或流式细胞仪检测到呈现绿色荧光的凋亡细胞。本试剂盒足够检测20个样品。
试剂盒组份:
TdT酶——————————40μl
荧光标记液————————960μl
TdT酶稀释液(选用)————500μl
细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测,可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时,暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT)的催化下加上绿色荧光探针荧光素(FITC)标记的dUTP(fluorescein-dUTP),从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测,这就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法检测细胞凋亡的原理。注:FITC是fluorescein isothiocyanate的缩写,实际上大多数情况下所谓的FITC即为fluorescein。
本试剂盒有如下优点。
(1)高灵敏度:背景染色极低,阳性染色明亮,可以在单细胞水平检测到细胞凋亡,同时由于凋亡早期就有DNA断裂,可以检测到早期的细胞凋亡。
(2)特异性:TUNEL检测时通常更容易标记凋亡细胞,而不容易标记坏死细胞。
(3)快速:仅需约1-2个小时即可完成。
(4)方便:只需一步染色反应,洗涤后即可观察,不必使用二抗等进行多步操作。
(5)应用范围广:可以用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况,也可以检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。
TUNEL法特异性检测细胞凋亡时产生的DNA断裂,但不会检测出射线等诱导的DNA断裂(和细胞凋亡时的断裂方式不同)。这样一方面可以把凋亡和坏死区分开,另一方面也不会把射线等诱导发生DNA断裂的非凋亡细胞判断为凋亡细胞。
极少数细胞凋亡时没有DNA断裂,此时不适用TUNEL法检测。在个别类型的坏死细胞中也发现TUNEL检测呈阳性。在需要严格判断细胞凋亡的情况下,最好同时检测多个凋亡指标。
注意事项:
1. 需自备用于洗涤细胞的PBS或HBSS,用于封片的抗荧光淬灭封片液(YT097),用于固定的4%多聚甲醛或向百奥莱博订购免疫染色固定液(YT086),同时需自备含0.1% Triton X-100的PBS或向百奥莱博订购免疫染色洗涤液(YT089)。
2. 如果用于石蜡切片的检测,需自备蛋白酶K,二甲*。
储存条件:-20℃。
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·兔抗N-Cadherin抗体
编号:YT745
英文名称:N-Cadherin Rabbit Polyclonal Antibody
规格:50μl
本品为来源于兔的抗N-Cadherin的多克隆抗体。
宿主:兔
克隆性:多克隆抗体
用途:WB,FC, IHC,ICC, IF
交叉反应性:人,小鼠
分子量:140KDa
推荐稀释比例:WB(1:500-1:1000),IF(1:200),IHC(1:200),ICC(1:200),FC(1:50)
| About this Antibody | |
| Name | N-Cadherin Rabbit Polyclonal Antibody |
| Category | Polyclonal antibody(pAb); Primary antibody |
| Isotype | IgG |
| Purification | Peptide affinity purified |
| About the Immunogen | |
| Immunogen | This antibody is produced by immunizing rabbits with a synthetic peptide (KLH-coupled) corresponding to a region of N-cadherin. |
| Gene ID | 1000 |
| SwissProt | P19022 |
| Synonyms | CDH2; CDCN; NCAD |
| Category | Adhesion/ECM |
| Background | The cadherins are a large family of cell adhesion molecules involved in calcium-dependent recognition and adhesion events. The cadherin subfamily includes N-, P-, B-, and E- cadherins, and other members. Recent studies indicate that cancer cells have up-regulated N-cadherin in addition to loss of E-cadherin. N-cadherin cooperates with the FGF receptor, leading to overexpression of MMP-9 and cellular invasion. N-Cadherin is commonly found in cancer cells and provides a mechanism for transendothelial migration. When a cancer cell adheres to the endothelial cells of a blood vessel it up-regulates the src kinase pathway, which phosphorylates beta-catenins attached to both N-cadherin (this protein) and E-cadherins. |
注意事项:
1. 如果本抗体用于Western blot (WB)、免疫荧光(IF)、免疫细胞化学(ICC)等实验,请注意回收使用过的稀释抗体。回收的抗体通常至少可以重复使用5-10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,请4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10,000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
3. 提供的Western一抗稀释液也可以用于免疫荧光(IF)、免疫组化(IHC)、免疫细胞化学(ICC)等适当用途。如果希望获得最佳的检测效果,请考虑使用上述检测专用的一抗稀释液。
储存条件:-20℃,有效期一年。
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(绿色荧光)大量库存促销。
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文献和实验的细胞几乎没有DNA的断裂,因而没有3'-OH形成,很少能够被染色。由此,TUNEL成为了检测DNA片段化(细胞凋亡)的最常用方法。(以TUNEL法细胞凋亡检测试剂盒(增强型,绿色荧光)为例) TUNEL检测:使用20 U/ml Dnase处理Hela细胞10分钟。 二、TUNEL实验中关键步骤 1. 充分脱蜡和水化。脱蜡前可先将切片在 60ºC烤片 20 min,再使用二甲苯脱蜡2次,每次 5-10 min;而水化一般建议用梯度乙醇从高浓度到低浓度浸洗,便于后期试剂能充分、均匀的结合反应
材料与试剂 1. TUNEL试剂盒: ①从瓶2中取出标记液100μl分别作为两个阴性对照。 ②将瓶1的全部溶液50μl加入瓶2剩余的450μl标记液中,使其成为500μl的TUNEL混合物。 2. POD转换液(一旦溶解,储存于4℃,不得再冻存) 3. 漂洗液:PBS 4. 固定液:4%多聚甲醛(用pH7.4的PBS配)。 5. 封闭液:0.3%H2O2 (用甲醛配)。 6. DBA:金属增强底物剂。 7. 细胞透化液:0.1%Trition X
产品名称:Annexin V-FITC & PI凋亡检测试剂盒英文名称:Annexin V-FITC & PI Apoptosis Detection Kit产品分类:细胞凋亡检测试剂盒[Apoptosis Assay Kit]产品编号:A0001c检验方法:Apoptosis包 装:20T产品说明:Annexin V-FITC & PI凋亡检测试剂盒 概述产品说明在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸只分布在细胞膜脂质双层的内侧,细胞发生凋亡早期,膜磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V
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