细胞凋亡DNA Ladder提取试剂盒(柱式吸附) 细胞凋亡

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北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括细胞凋亡DNA Ladder提取试剂盒(柱式吸附) 细胞凋亡与增殖在内的一系列细胞生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：细胞凋亡DNA Ladder提取试剂盒(柱式吸附) 细胞凋亡与增殖
品牌：百奥莱博
英文名：DNA Ladder Extraction Kit with Spin Column
产地：国产|进口
规格：50次
本试剂盒是目前最先进的DNA Ladder抽提试剂盒之一。本试剂盒是针对细胞凋亡过程中产生的核小体间DNA链断裂而设计的。可以非常有效地抽提最小片段为180-200bp的DNA ladder，同时又可以抽提到最大50kb左右的基因组DNA。本试剂盒可以抽提50个样品。

DNA ladder也称DNA fragmentation，是细胞凋亡的一个重要指标。通常观察到DNA ladder，就可以判定细胞发生了凋亡。

样品首先被蛋白酶K消化，随后加入适合DNA结合到纯化柱上的缓冲液，然后加入到纯化柱内。通过高速离心，使DNA在穿过纯化柱的瞬间，结合到纯化柱上，随后通过两次洗涤去除各种杂质，最后通过洗脱液把DNA洗脱下来。整个过程无需酚氯*(代"仿")抽提，无需酒精沉淀，样品裂解后仅需约15分钟即可完成。

通过DNA纯化柱方式抽提DNA ladder比用传统的酚氯*(代"仿")抽提酒精沉淀方法更加便捷，小片段DNA不容易损失。试剂盒提供了RNase A，可以获得不含RNA的高纯度总DNA，排除了RNA对DNA ladder观察造成的干扰。

本试剂盒每次最多可以抽提20mg组织或200-350万个培养细胞。样品用量过多，反而会影响抽提效果。纯化柱对于DNA的最大容量约为30微克。通常每200万Hela细胞或500万淋巴细胞可以抽提得到15-25微克总DNA，每25mg肝、脑、肾组织可以抽提得到10-30微克总DNA，每25毫克心、肺组织可以抽提得到5-10微克总DNA，每10mg脾组织可以抽提得到5-30微克总DNA。样品的用量请勿超过纯化柱的容量，样品用量最好能保持在纯化柱容量的70%或以下。当然过少的样品也不利于检测到DNA ladder。

对于培养细胞的凋亡检测，通常6孔板一个孔的细胞就足够用于DNA ladder的抽提和检测。

试剂盒组份：
样品裂解液A——————10ml
样品裂解液B——————11ml
洗涤液I——————21ml(第一次使用前加入7ml无水乙醇)
洗涤液II——————16ml (第一次使用前加入24ml无水乙醇)
洗脱液——————22ml
蛋白酶K——————1.1ml
RNase A——————220μl
DNA纯化柱及废液收集管——————50套

注意事项：
1. 温度较低时样品裂解液A或样品裂解液B中可能会有沉淀产生，属正常现象。使用前必须检查一遍。如有沉淀，55℃水浴孵育使沉淀溶解，混匀后使用。
2. 第一次使用前洗涤液I需添加7ml无水乙醇，洗涤液II需添加24ml无水乙醇，混匀，并在瓶上做好标记。
3. 本试剂盒需使用55℃或70℃水浴，请提前作好准备。
4. 除特别说明外，每次Vortex应控制在5-10秒左右。
5. 本试剂盒所有操作均在室温进行，操作时无需冰浴。所有离心也均在室温进行。
6. 废液收集管在一次抽提中需多次使用，切勿中途丢弃。

储存条件：室温，有效期一年。( 蛋白酶K需-20℃保存)

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6-溴乙酸 Fast Black B Salt 4224-70-8
4-羟基苯甲酸钠 5′-UDP 114-63-6
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·10% SDS水溶液
编号：YT414
英文名称：10% SDS
规格：100ml
本品为常用生化试剂，用途广泛，进口试剂配制，可以用于SDS-PAGE、细菌碱裂解等。10% SDS为100毫升溶液中含有10克SDS，该溶液用水配制。

别名：十二烷基磺酸钠；十二烷基硫酸钠

储存条件：室温。

·总抗氧化能力快速检测试剂盒(ABTS法)
编号：YT314
英文名称：Total Antioxidant Capacity Assay Kit with a Rapid ABTS method
规格：100次
本试剂盒是一种采用ABTS作为显色剂，可以对血浆、血清、唾液、尿液等各种体液，细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液、或各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力进行快速检测的试剂盒。本试剂盒方便快捷，加入待测样品后6分钟即可进行吸光度测定，通常10-20个样品可以在十多分钟内检测完毕。本试剂盒可以检测100个样品。

试剂盒组分：
检测缓冲液—————————20ml
ABTS溶液——————————1ml
过氧化氢溶液————————0.5ml
过氧化物酶—————————0.2ml
Trolox溶液(10mM)——————0.1ml

活性氧主要包括羟基自由基、超氧自由基和过氧化氢。在细胞或组织的正常生理代谢过程中会产生活性氧，同时一些环境因子例如紫外照射、γ射线照射、吸烟、环境污染等也可以诱导活性氧的产生。活性氧产生后，可以导致细胞内脂、蛋白和DNA等的氧化损伤，诱发氧化应激(Oxidative stress)，继而导致各种肿瘤、动脉粥样硬化、风湿性关节炎、糖尿病、肝损伤、以及中枢神经系统疾病等。

机体中存在多种抗氧化物，包括抗氧化大分子、抗氧化小分子和酶等，可以清除体内产生的各种活性氧，以阻止活性氧诱导的氧化应激(oxidative stress)的产生。一个体系内的各种抗氧化大分子、抗氧化小分子和酶的总的水平即体现了该体系内的总抗氧化能力。因此测定血浆、血清、尿液、唾液等各种体液，细胞或组织等裂解液中的总抗氧化能力具有非常重要的生物学意义。

植物或中草药抽提液、或各种抗氧化物溶液的总抗氧化能力的检测可以用于检测各种溶液的抗氧化能力的强弱，可以用于筛选强抗氧化能力的药物。

ABTS法测定总抗氧化能力的原理是，ABTS在适当的氧化剂作用下氧化成绿色的ABTS+，在抗氧化物存在时ABTS+的产生会被抑制，在414nm或734nm测定ABTS+的吸光度即可测定并计算出样品的总抗氧化能力。Trolox是一种维生素E的类似物，具有和维生素E相近的抗氧化能力，用作其它抗氧化物总抗氧化能力的参考。例如，Trolox的总抗氧化能力为1，相同浓度情况下，其它物质的抗氧化能力用其抗氧化能力和Trolox相比的倍数来表示。



注意事项：
1. 样品中不能添加DTT、巯基乙醇等影响氧化还原反应的物质，也不宜添加Tween、Triton和NP-40等去垢剂。
2. 测定时需可以测定A414的酶标仪一台(测405-425nm也可以)或可以测定微量样品的分光光度计一台。
3. ABTS对人体有刺激性，请注意适当防护。

储存条件：-20℃，有效期12个月。


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