TEV蛋白酶

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  • MEP-001
  • 2025年07月15日
    • 详细信息
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    • 技术资料
    • 英文名

      TEV protease

    • 库存

      大量

    • 保质期

      1年

    • 保存条件

      -20℃

    • 规格

      100U

    产品简介:
    TEV蛋白酶(重组型)是经过基因工程改造后的重组蛋白酶,该酶特异性识别Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe- Gln-Gly七氨基酸序列。TEV蛋白酶与肠激酶 (EK)、Thrombin、Factor Xa、SUMO等蛋白酶相比,具有高活性、高特异性的双重特点,TEV蛋白酶因具有高剪切活性和特异性,已成为融合蛋白表达后去除融合tag的首选蛋白酶。该酶经6×His标签纯化而得(含组氨酸标签),纯度达99%,剪切反应完毕后可通过Ni-NTA Resin去除。该酶在4℃-30℃温度、pH范围(6.0-8.5)反应条件下均具有活性(见下表)。
    不同温度下剪切活性(%)
    4℃ 16℃ 21℃ 30℃
    0.5 h 34 58 56 70
    1 h 58 80 78 90
    2 h 71 99 99 99

    产品组成:
    组分 MEP-001
    100U
    保存
    TEV蛋白酶(5U/ul) 20ul -70℃
    20 × TEV Buffer 100ul -20℃
    0.1M DTT 10ul -20℃

    保存条件:
    长期保存置于-70℃,可保存1年,置于-20℃,可储存6个月。

    用途:
    融合蛋白标签剪切去除。

    单位定义:
    在1 × TEV Buffer(50mM Tris-HCl,pH8.0, 0.5mM EDTA, 1mM DTT),30℃反应1h,剪切85%以上的3ug底物所需要的酶量定义为一个活性单位。

    使用方法:
    1. 混合以下组分:
    20 × TEV Buffer
    0.1M DTT
    1. 蛋白酶
    1. ul
    up to 150ul
    2.30℃孵育,在1、2、4、6小时分别吸出30ul上述反应液,置于单独的EP管中。
    3.向上述EP管中加入30ul 2 × SDS Loading Buffer,置于-20℃。
    4.样品全部反应完毕后,样品煮沸5 min,取40ul进行SDS-PAGE分析。
    5.如融合蛋白要求低温处理,可将反应液置于4℃,请延长反应时间,并增加TEV酶用量。

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