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379
- 英文名:
PCR Optimization Kit
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京PCR优化试剂盒说明书,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京PCR优化试剂盒说明书
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
英文名:PCR Optimization Kit
编号:JN0045
本试剂盒为您提供了8 种耐热聚合酶和相应的精心配制的缓冲液,其中缓冲液的pH值,盐离子浓度和助溶剂成分等各不相同,当扩增某些复杂的基因模板等出现问题时,应测试不同的聚合酶及反应缓冲体系。另外,本试剂盒还提供了PCR增强剂,能增加引物的特异性,提高DNA聚合酶的热稳定性,适应较宽范围的退火温度和Mg2+浓 度。可以在试剂盒提供的8种聚合酶及相应反应体系的基础上再添加PCR增强剂,以找到PCR最适反应体系从而达到最佳的PCR反应效果。
为什么选择本试剂盒?
影响PCR反应的因素很多,如聚合酶本身的性质,pH值,酶保护剂,助溶剂等,只有在这些因素都是最适的情况下才能获得较好的扩增产物。
试剂盒组成:
| 组份 | 规格 |
| Taq DNA 聚合酶(5U/μl) | 20μl |
| 5×Taq Buffer with Mg2+ | 1ml |
| UltraTaq DNA 聚合酶 (5U/μl) | 20μl |
| 5×UltraTaq Buffer with Mg2+ | 1ml |
| Taq Plus DNA 聚合酶 (5U/μl) | 20μl |
| 5×Taq Plus Buffer with Mg2+ | 1ml |
| UltraTaq Plus酶 (5U/μl) | 20μl |
| 5×UltraTaq Plus Buffer with Mg2+ | 1ml |
| Pfu DNA 聚合酶 (5U/μl) | 20μl |
| 10×Pfu Buffer with Mg2+ | 1ml |
| Fast Pfu DNA 聚合酶 (5U/μl) | 20μl |
| 5×Fast Pfu Buffer with Mg2+ | 1ml |
| 2×Hot Start Taq PCR MasterMix | 500μl |
| 2×Hot Start Taq Plus PCR MasterMix | 500μl |
| PCR 增强剂I | 200μl |
| PCR 增强剂II | 200μl |
各种PCR聚合酶的反应速度:
| PCR聚合酶 | 反应速度 |
| Taq DNA 聚合酶 | 1kb/60秒 |
| UltraTaq DNA 聚合酶 | 4kb/60秒 |
| Taq Plus DNA 聚合酶 | 1kb/60秒 |
| UltraTaq Plus酶 | 4kb/60秒 |
| Pfu DNA 聚合酶 | 0.5kb/60秒 |
| Fast Pfu DNA 聚合酶 | 2kb/60秒 |
| Hot Start Taq DNA 聚合酶 | 1kb/60秒 |
| Hot Start Taq Plus DNA 聚合酶 | 1kb/60秒 |
常用反应体系(50ul):
| 组分 | 体积 |
| 5×Buffer | 10μl |
| 上游引物 | 0.05uM(终浓度) |
| 下游引物 | 0.05uM(终浓度) |
| dNTP(各10mM) | 1.0μl |
| 模板 | 1-50ng(质粒) |
| 10ng-1ug(基因组) | |
| PCR聚合酶 | 0.25μl(1.25U) |
| ddH2O | 至50μl |
常用PCR循环:
| 当扩增片段<3K: | |
| 94℃ | 1分钟30秒 |
| 30次循环 | 94℃,20秒 57℃,20秒 72℃ 根据产物长度调整,各种聚合酶的扩增速度见上面表格 |
| 72℃ | 5分钟 |
| 4℃ | 保温 |
| 当扩增片段≥3K(推荐引物长度≥30bp): | |
| 94℃ | 1分钟30秒 |
| 30次循环 | 94℃,5秒 68℃根据产物长度调整,各种聚合酶的扩增速度见上面表格 |
| 72℃ | 5分钟 |
| 4℃ | 保温 |
| * Hot start Taq DNA聚合酶和Hot start Taq Plus DNA聚合酶预变性条件为94℃,10分钟 | |
北京PCR优化试剂盒说明书极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·重组小鼠FGF1(酸性成纤维细胞生长因子)
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英文名称:Recombinant Mouse Fibroblast Growth Factor Acidic
规格:10μg|50μg|500μg|1mg
本品由我们的大肠杆菌表达系统制备,表达蛋白包含序列(Phe16-Asp155)。
FGF-1质量控制:>95%(SEC-HPLC,还原性SDS-PAGE)
FGF-1制剂:冻干品
FGF-1保存:
关于FGF-1:
FGF acidic is a 17 kDa nonglycosylated member of the FGF family of mitogenic peptides. FGF acidic, which is produced by multiple cell types, stimulates the proliferation of all cells of mesodermal origin and many cells of neuroectodermal, ectodermal, and endodermal origin. It plays a number of roles in development, regeneration, and angiogenesis. FGF-acidic is a non-glycosylated heparin binding growth factor that is expressed in the brain, kidney, retina, smooth muscle cells, bone matrix, osteoblasts, astrocytes and endothelial cells. FGF-acidic has the ability to signal through all the FGF receptors.
北京PCR优化试剂盒说明书关键词:PCR Optimization Kit,JN0045,PCR优化试剂盒
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北京PCR优化试剂盒说明书关键词:PCR Optimization Kit,JN0045,PCR优化试剂盒
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北京百莱博科技有限公司是核酸扩增(PCR)产品的专业生产供应销*(代"售")商,恭候您的咨询选购北京PCR优化试剂盒说明书。
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文献和实验buffer,摸索镁离子浓度或适当加入 DMSO(小于 0.3%) · 提高退火温度,增加延伸时间(反应条件参照试剂盒说明书) 问题 2:假阳性 现象:空白对照出现条带 可能原因: · 引物设计不适,与目的序列具有同源性 · 试剂污染:水、移液枪等被核酸污染 · 样品间出现交叉污染 解决方法: · 实验仪器高压灭菌 · 实验试剂(酶除外)高压灭菌,离心管枪头一次性使用 · 规范实验操作 · 假阳性可通过巢式 PCR 解决,或者使用特异性较高的试剂盒扩增 问题 3:拖尾、弥散 现象:电泳出现拖尾、涂抹
或存放不当:质粒提取试剂盒成分复杂且保存条件不同,有的试剂还容易出现浑浊。在使用之前需要检查试剂是否保存得当,如果出现浑浊,可参考试剂盒说明书,进行 37℃ 温浴至溶液澄清,再冷却至室温使用。 ⑦洗脱液体积不合适:洗脱液使用体积过大会导致提取浓度偏低,过小会导致洗脱不充分,产量过低。建议参考试剂盒说明书来确定洗脱体积,如果洗脱浓度偏低,可以重复洗脱一次; ⑧洗脱液未添加到硅胶膜中心:可能会导致洗脱液覆盖不完全,导致洗脱效率降低。此外洗脱液可以使用碱性洗脱缓冲液或者无核酸酶的水,避免使用 PH<
的因素有很多,从样本的质量,引物探针的设计,再到 PCR 反应体系中各组分的比例优化等。当我们准备好了这些,在上机检测时又要根据实验目的正确完成程序设置,才能最终得到良好的实验结果。那么今天我们就从荧光定量 PCR 软件程序设置入手来介绍一下这其中需要注意的一些方面。 Part 1:规范正确的新建实验方式 当我们准备好样品开始进行上机测试时,第一步就是新建实验。此时我们可以通过点击 Advanced Setup(图 1A,图中红框)或 Create New Experiment(图 1B,图中
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