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317
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长期
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北京百奥莱博科技有限公司
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阴凉干燥
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博供应的鸡白痢沙门氏菌荧光PCR检测试剂盒(SPP.P)现货供应用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多鸡白痢沙门氏菌荧光PCR检测试剂盒(SPP.P)等动物疫病PCR检测试剂盒产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:鸡白痢沙门氏菌荧光PCR检测试剂盒(SPP.P)现货供应
等级:科研试剂
规格:48次/盒
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
编号:SYA387
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想要了解更多关于鸡白痢沙门氏菌荧光PCR检测试剂盒(SPP.P)现货供应的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联*(代"系")。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
·猪链球菌病(PSS)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA443
等级:科研实验专用
规格:48次/盒|96次/盒
·大豆特异性基因Lectin单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA274
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
本试剂盒适用于检测植物中特异性基因Lectin,用于筛查待检测植物中是否含有Lectin基因片段DNA成分。其检测结果仅供参考。
本试剂盒用一对大豆特异性基因Lectin特异性引物,结合一条特异性荧光探针,用荧光PCR技术进行大豆特异性基因Lectin的检测。
试剂盒组成:
| 组份 | 数量 | 规格 |
| Lectin反应液(Lectin-qPCR MIX) | 1管 | 672μL/管 |
| 酶混合物(Enzymes MIX) | 1管 | 48μL/管 |
| 阴性对照(NTC) | 1管 | 50μL/管 |
| Lectin阳性对照(Lectin-PTC) | 1管 | 50μL/管 |
储存条件:-20℃,应避免反复冻融,有效期12个月。
使用方法:
一、样品采集及处理:
➤适用标本类型:植物组织及其加工制品。
➤样本采集:称取200g样品。
二、DNA提取:
样品需用粉碎机或冷冻研磨仪研磨至细粉末状。
用户可采用SN/T2584-2010中推荐的方法提取DNA,也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的植物基因组DNA提取试剂盒(过柱法)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
三、检测步骤:
1.PCR扩增
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(Lectin-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),室温融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
| 试剂 | 每个反应加入的量 | N个反应加入的量 |
| 荧光PCR反应液 | 14µL | N×14µL |
| 酶混合物 | 1 µL | N×1µL |
| 总量 | 15µL | N×15µL |
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(Lectin -PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
2.qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件:
| 1循环 | 50℃ for 2 min | |
| 预变性 | 1循环 | 95℃ for 10 min |
| PCR扩增 | 40循环 | 95℃ for 15 sec 60℃ for 60 sec |
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM,淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
四、结果分析:
1.结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
2.试验成立判定
➤阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
➤阳性对照(Lectin -PTC):均产生扩增曲线。
➤以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
3.结果判定
➤在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明Lectin核酸阳性。
➤Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明Lectin核酸阴性。
➤如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
➤对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行Lectin qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明Lectin核酸阳性;否则判为样本阴性。
五、注意事项:
➤初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
➤所有使用的离心管应高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
➤PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
➤样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
➤试剂盒里所有物品应视为污染物对待,按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
鸡白痢沙门氏菌荧光PCR检测试剂盒(SPP.P)现货供应关键词:鸡白痢沙门氏菌荧光PCR检测试剂盒(SPP.P),百奥莱博,SYA387
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·麻疹病毒/风疹病毒双重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA250
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·口蹄疫O型(FMDV-O)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA480
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·猪出血性魏氏梭菌(CW)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA435
等级:科研实验专用
规格:48次/盒|96次/盒
·肠出血性大肠杆菌(O157:H7)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA081
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
本试剂盒适用于增菌培养物、疑似病料及食品中大肠杆菌O157(H7)的检测,其检测结果仅供参考。
出血性大肠杆菌EHEC O157(H7)可引起人的出血性腹泻和肠炎的大肠埃希氏菌,引发人类、家畜以及野生禽兽不同形式的疾病。本方法为荧光PCR检测方法,反应在同一管内连续进行,操作简单,并有效防止了污染,能对样品中或预培养液中的大肠杆菌 O157(H7)进行快速检测,具有特异性高、敏感性强和操作简便的特点。O157(H7)的探针报告基团为FAM,淬灭基团为None。
试剂盒组成:
| 组份 | 数量 | 规格 |
| 大肠杆菌 O157(H7)荧光qPCR反应液( O157(H7)-qPCR MIX) | 1管 | 720μL/管 |
| DNA抽提液(DNA Extraction) | 2管 | 1.5mL/管 |
| 阴性对照(NTC) | 1管 | 50μL/管 |
| 阳性对照(O157(H7-PTC) | 1管 | 50μL/管 |
储存条件:-20℃以下,有效期6个月。
使用方法:
一、样品采集:
➤食品样品:样品的采集与预培养按照《食品卫生微生物学检验大肠埃希氏菌 O157:H7/NM检验 (GB/T 4789.36-2008) 要求进行。
➤粪便样品:取粪便置于灭菌的收集管中送检。
➤病灶部位样品:取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
注:上述样品建议经过增菌后,收集培养物用于检测。
二、DNA提取:
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液,按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
➤液体培养物:取液体培养物100μL加到1.5mL无菌离心管中,8000rpm离心3min,尽量吸弃上清,加入50μL DNA抽提液充分混匀,100℃恒温10min,13000rpm离心3min,取上清5μL进行PCR反应。
➤固体培养物:挑取单克隆菌落与50μL DNA抽提液充分混匀,100℃恒温10min,13000rpm离心3min,取上清5μL进行PCR反应。
➤粪便样品:挑取米粒大小粪便于灭菌离心管中,加入0.5mL生理盐水,振荡混匀,13000rpm离心3分钟,弃上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀,100℃恒温10min,13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
➤其他液体标本:取标本2-3mL,13000rpm离心3min,弃上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀,100℃恒温10min,13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
注:建议采用相关标准方法进行前增菌,并按照液体培养物方法进行提取。阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
三、检测步骤:
1.试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qPCR反应液( O157(H7)-qPCR MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
| 试剂 | 每个反应加入的量 | N个反应加入的量 |
| 荧光PCR反应液 | 15µL | N×15µL |
向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照( O157(H7)-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
2.qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件:
| 1循环 | 50℃ for 2 min | |
| 预变性 | 1循环 | 95℃ for 10 min |
| PCR扩增 | 40循环 | 95℃ for 15 sec 60℃ for 60 sec |
在60℃ 延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM,淬灭基团:NONE,请勿选择ROX 参比荧光。
四、结果分析:
1.结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
2.试验成立判定
➤阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
➤阳性对照(O157(H7)-PTC):均产生扩增曲线。
➤以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
3.结果判定
➤在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明 O157(H7)核酸阳性。
➤Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明 O157(H7)核酸阴性。
➤如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
➤对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行 O157(H7) qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明 O157(H7)核酸阳性;否则判为样本阴性。
五、注意事项:
➤初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
➤所有使用的离心管最好高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
➤PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
➤样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
➤试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
鸡白痢沙门氏菌荧光PCR检测试剂盒(SPP.P)现货供应关键词:鸡白痢沙门氏菌荧光PCR检测试剂盒(SPP.P),百奥莱博,SYA387
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·口蹄疫A型(FMDV-A)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA477
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·登革热病毒Ⅰ型单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA225
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·牛布氏杆菌病cELISA检测试剂盒(竞争法)(注:竞争法确证区分野毒和疫苗抗体)
编号:SYA651
等级:科研实验专用
规格:192次/盒
·脑膜炎奈瑟菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA111
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·玉米特异性基因Invertase单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA275
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·腮腺炎/乙脑/肠道病毒三重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA223
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·水稻转基因Cry1Ac单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA273
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·大肠杆菌致贺毒素(Stx1)/(Stx2)双重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA107
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·基孔肯雅病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA231
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·猪细小病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA778
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
一、简介
本试剂盒用一对猪细小病毒特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对猪细小病毒核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
二、原理
该试剂盒适用于检测带毒猪血液、分泌物、排泄物以及肾、肺、肝、脑、睾丸、淋巴结和胎盘等组织标本中猪细小病毒(PPV)DNA,用于猪细小病毒(PPV)感染的辅助诊断,其检测结果仅供临床参考。
三、试剂盒组成(48T)
组份 数量 规格
荧光PCR反应液 1管 672μL/管
阴性对照 1管 50μL/管
阳性对照 1管 50μL/管
FD1试剂 1瓶 15mL/瓶
FD2试剂 1管 500μL/管
FD3试剂 1瓶 15mL/瓶
FD4试剂 1瓶 30mL/瓶
FD5试剂 2管 2mL/管
吸附柱及收集管 1包 48套/包
四、储存条件及有效期
荧光定量PCR试剂盒于-20℃以下保存,有效期为12个月;DNA提取试剂盒于常温保存,有效期为12个月。1.5mL离心管、移液器、吸头等请自备。
五、荧光PCR仪器适用范围:
ABI系列,Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。
六、样品采集、前处理与DNA提取
6.1 样品的采集
按照相关标准采集。标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-80℃,但不能超过6个月,标本运送应采用0℃冰壶。
6.1.1 血清:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入无菌的干燥玻璃管,室温(22-25℃)放置30-60min,血标本可自发完成凝集析出血清,或直接使用水平离心机,3000rpm离心5min,吸取上层血清,转移至1.5mL灭菌离心管中备用。
6.1.2 血浆:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入含EDTA2Na(乙二*(代"胺")四乙酸二*)或柠檬酸*抗凝剂的玻璃管,立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次,使抗凝剂与静脉血充分混匀,5-10min后即可分离出血浆,转移至1.5mL灭菌离心管中备用。
6.1.3 拭子、分泌物等样品:在装有拭子或分泌物的离心管中加入500µL PBS或生理盐水,剧烈振荡30s。棉拭子尽量挤出液体转移到无DNA酶污染的离心管中备用。
6.1.4 病灶组织样品:称取组织约0.1g于研磨器或组织匀浆器中研磨(最好置于冰上或加入液氮),再加1mL生理盐水研磨至无块状物,然后将样品转至1.5mL灭菌离心管中备用。
6.2 DNA提取
6.2.1 在上述样本中加入300μL FD1试剂和10μL FD2试剂,震荡混匀;
6.2.2 58℃孵育至完全裂解(样品不同而异,细菌、液体样本建议孵育15min,动物细胞、组织和粪便样本建议孵育15min-1h,样本裂解越完全,核酸提取效果越好);
6.2.3 12000 rpm离心5min,转移上清于一无菌离心管中;
6.2.4 在2.3的离心管中加入300ul FD3试剂,震荡混匀;
6.2.5 将全部溶液加入带膜吸附柱(收集管)中,12000 rpm离心1min,弃去流出液;
6.2.6 加入600ul的FD4试剂,12000 rpm离心1min,弃去流出液;
6.2.7 12000 rpm离心2min,去除残留液体;
6.2.8 将吸附柱放置于新的无核酸酶的1.5 mL离心管中,在膜中央加入20-50µL FD5试剂,室温静置1min,12000rpm离心1min,收集核酸溶液,-20℃保存,若长期保存需放置-80℃冰箱。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(PPV-qPCR MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品/阴性质控品(NTC)/阳性质控品(PPV-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
八、结果分析:
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2) 阳性对照(PPV-PTC):均产生扩增曲线。
(3) 以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1) 在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明猪细小病毒核酸阳性。
(2) Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明猪细小病毒核酸阴性。
(3) 如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4) 对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行猪细小病毒qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明猪细小病毒核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管应高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
(3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购鸡白痢沙门氏菌荧光PCR检测试剂盒(SPP.P)现货供应。
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文献和实验余种。值得注意的是:该公司2009年6月先后通过甲型H1N1流感病毒RNA检测试剂盒(荧光PCR法)的质量管理体系考核、取得甲型H1N1流感病毒RNA检测试剂盒(荧光PCR法)的注册受理通知书。2009年6月17日国家食品药品监督管理局医疗器械监管司王宝亭司长、王兰明专员光临我公司并对甲型H1N1流感病毒检测试剂盒文号申报工作进行指导。2009年6月首批428套甲型H1N1流感病毒检测试剂盒配发至全国213个流感检测网络实验室PS:今年甲型流感这一试剂的开发和应用,让金豪公司赚得盆满钵满
2.4 灵敏度高 微球表面积大,每个微球上可包被100 000个捕获抗体,如此高密度的捕获抗体保证了能够最大程度地与样本中的抗原分子结合,提高检测灵敏度。最低检测浓度可达到0.1 pg/ml. 2.5 检测范围广 可达3~5个数量级(如Bio Rad公司细胞因子检测试剂盒的检测范围达到0.2~32 000 pg/ml,样品无需浓缩或稀释。 [$page$] 2.6 特异性强 无需洗涤就能够自行将和微球结合的与未结合的分子区分开来,只读
基于膜的检测试剂研发人员应该严格考虑影响蛋白质在硝酸纤维素膜上结合众多因素,其中包括原材料的固有属性和处理过程等。随着胶体金标记技术的发展、研发人员对胶体金快速检测技术深入研究,市场上基于膜的快速免疫层析检测产品的种类迅速增多。虽然免疫层析产品的包装设计种类繁多,实际上目前主流的商品化检测试剂盒主要下面两种形式。最常用的检测形式为侧向层析或者层析定量,这种检测形式通常应用于诊所或者由直销客户检测。另一种检测形式为竖向斑点渗滤,该检测形式需要较强的操作技巧,仅限于研究使用。不管试剂采用那种检测
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