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长期
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北京百奥莱博科技有限公司
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冷藏
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北京百奥莱博生产销*(代"售")的SYA490型牛病毒性腹泻荧光PCR检测试剂盒(BVDV)(国产,进口),是高品质的动物疫病PCR检测试剂盒产品,欢迎的您垂询订购。
名称:SYA490型牛病毒性腹泻荧光PCR检测试剂盒(BVDV)(国产,进口)
编号:SYA490
产地:国产|进口
等级:科研试剂
规格:48次/盒|96次/盒
关于SYA490型牛病毒性腹泻荧光PCR检测试剂盒(BVDV)(国产,进口)的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
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SYA490型牛病毒性腹泻荧光PCR检测试剂盒(BVDV)(国产,进口)关键词:SYA490,百奥莱博,牛病毒性腹泻荧光PCR检测试剂盒,BVDV,牛病毒性腹泻荧光PCR检测试剂盒(BVDV)
·牛结核杆菌抗体ELISA检测试剂盒(筛选)
编号:SYA653
等级:科研实验专用
规格:192次/盒
·类鼻疽伯克霍尔德菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA771
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
一、简介
本试剂盒用一对类鼻疽伯克霍尔德菌特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对类鼻疽伯克霍尔德菌进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
二、用途
该试剂盒适用于检测血液、痰、脑脊液、尿、浓性渗出物等样品中的类鼻疽伯克霍尔德菌(BM),用于类鼻疽伯克霍尔德菌(BM)的辅助诊断,其检测结果仅供临床参考。
三、试剂盒组成(48T)
组份 数量 规格
BM反应液(BM-qPCR MIX) 1管 672μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
BM阳性对照(BM-PTC) 1管 50μL/管
四、荧光PCR仪器适用范围
ABI系列、MJ系列、Roche系列,博日系列及其他荧光定量PCR检测仪。
五、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为6个月。
六、样品前处理与DNA提取
6.1 样本前处理:
取抗血液、痰、脑脊液、尿、浓性渗出物。
6.2 DNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液,按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
对上述处理好的样本加入50uL核酸提取液,100℃恒温处理10min,13000rpm离心5min,取上清液转移至新的1.5mL EP管,-20℃保存;
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BM-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶液 1µL N×1µL
总量 15µL N×15µL
向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(BM-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃ 延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX 参比荧光。
八、结果分析
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2) 阳性对照(BM-PTC):均产生扩增曲线。
(3) 以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1) 在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明类鼻疽伯克霍尔德菌核酸阳性。
(2) Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明类鼻疽伯克霍尔德菌核酸阴性。
(3) 如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4) 对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行类鼻疽伯克霍尔德菌qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明类鼻疽伯克霍尔德菌核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管应高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
(3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
SYA490型牛病毒性腹泻荧光PCR检测试剂盒(BVDV)(国产,进口)关键词:SYA490,百奥莱博,牛病毒性腹泻荧光PCR检测试剂盒,BVDV,牛病毒性腹泻荧光PCR检测试剂盒(BVDV)
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北京百莱博科技有限公司专业生产动物疫病PCR检测试剂盒产品,欢迎来电咨询选购SYA490型牛病毒性腹泻荧光PCR检测试剂盒(BVDV)(国产,进口)。
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文献和实验部、国家质检总局发布的《中华人民共和国进境动物检疫疫病名录》中的二类动物传染病,是由牛病毒性腹泻病毒 (BVDV) 引起的以牛的黏膜发炎、糜烂、坏死和腹泻为特征的接触性传染性疾病。本病大多呈隐性感染,牛群中有很高的感染率。带毒牛的分泌物或排泄物,尤其是急性发热期病牛的血液中含有大量病毒,鹿、羊、猪等也可携带和传播本病。为控制本病的流行并加以消灭,必须采取检疫、隔离、净化、预防等兽医防制措施。北京国检局有关负责人介绍,本案涉案人员已涉嫌触犯我国刑法中的「妨害动植物防疫、检疫罪」,这是刑法修正案 (七
%控制,支原体经过0.1um过滤,大多也能清除。大肠杆菌噬菌体的污染还是比较严重的,主要是生产环境过程中带入,又无法过滤,很难彻底清除,但对血清质量影响不大。病原性病毒,特别是BVDV,在国产血清中几乎90%以上都存在,这类微生物是影响国产血清质量的重要因素之一,而进口胎牛血清中基本都控制的很好。 6、免疫球蛋白 国产血清的只是定性检测,结果也很不准确,进口胎牛血清大多定量检测。免疫球蛋白的数值能完全体现出采血的时的牛龄情况,国产血清,基本都是新生牛的,血清中容易产生IgM,IgG的含量
的,但随着时间的推移,血清中的大量纤维蛋白会析出形成沉淀。当然,进口的新生牛血清,一般牛龄都在2周左右,血清中的各种蛋白含量明显偏高,生产后血清可能会浑浊,甚至有大量沉淀。 当然,购买回来的血清都是冰冻状态,使用时需要融化,融化过程在温度较低的状态下慢慢进行,否则沉淀相对较多,虽然沉淀并不直接影响血清的质量,但对细胞的显微观察有一定的阻碍。 3、澄清度 进口胎牛血清由于蛋白和脂类等物质含量低,表现为稀薄、清淡,而国产血清,因为绝大多数是新生牛血清,相对而言更加粘稠,颜色略深
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