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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 细胞类型:
原代细胞
- 品系:
原代细胞
- 组织来源:
人,鸡,大小鼠
- 物种来源:
人,鸡,大小鼠
- 免疫类型:
见说明书
- 细胞形态:
见说明书
- 运输方式:
低温运输
- 年限:
5-10年
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
5×105cells/T25培养瓶
大鼠肠动脉内皮细胞培养基信息:
Neurobasal-A、B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
我们推荐使用
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
三、使用方法
客户收到大鼠肠动脉内皮细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 细胞消化
1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
3) 用吸管轻轻吹打混匀、分散细胞,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4) 待细胞完全贴壁后,培养观察;之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。
四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
5. 该细胞只可用于科研。
备注:由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同,以上方法仅供各实验室参考大鼠肠动脉内皮细胞
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文献和实验体外培养模型已被广泛应用于血脑屏障的研究、脑血管疾病的病理生理及分子生物学研究、新药筛选、脑微血管内皮细胞生理生化及药理学研究等领域。而大多数体内实验采用大鼠为动物模型,而且大鼠具有较多的细胞生物学研究所需的抗体可用,因此进行大鼠脑微血管内皮细胞的培养具有重要的意义。自从Panula等[2]首次成功培养大鼠脑微血管内皮细胞以来,国内外有关大鼠脑微血管内皮细胞的分离和培养方法已有较多的报道,我们发现国内的方法多以组织匀浆、两次尼龙网过滤分离脑微血管段为主[3,4],也有采用酶消化、梯度离心及尼龙网过滤
本人总结了下大鼠内皮细胞的培养方案 一,消化法。优点:获得的细胞比其他方法纯。缺点:获得细胞比较少。 常见问题及解决方法:1.消化的时间不好控制时,建议大家分两段时间消化,消化30分钟时收取消化液放入一个离心管,30分到45分钟段收集的放入另一离心管,离心后看看第二管是否有杂细胞,若没有就把两管混合用,若有就只用第一管的。2.消化液,我的经验是5份0.2%胶原酶和1份0.125%胰酶。3.若很难消化时,可以磁力搅拌消化。注意消化法时结扎一定要紧! 二,植快法。优点:获得细胞
材料与方法: 材料 : 培养皿、培养瓶、烧瓶、试管,玻璃针等。 眼科剪、眼科镊、手术刀片。 5%CO2孵箱、PH计。 恒温水浴箱。 PMi1640培养基,D-Hank’s缓冲液 、胎牛血清,内皮生长因子(ECGF),青霉素,链霉素,戊巴比妥钠等。 方法: 1、取材:4~6wWistar大鼠, 大剂量2%戊巴比妥钠麻醉处死,将处死后的大鼠浸入75%酒精中,放入超净台。在无菌状态下剪开胸腹腔,分离胸主动脉,用2ml注射器从主动脉弓处向胸主动脉注入D-Hank’s液,驱除残血,取
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