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642
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XL10-Gold Chemically Competent Cell
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长期
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北京百奥莱博科技有限公司
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-80℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博供应的北京现货XL10-Gold化学感受态细胞供应用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多XL10-Gold化学感受态细胞等克隆与表达产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:北京现货XL10-Gold化学感受态细胞供应
规格:100μl×10管
编号:SY0018
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
英文名:XL10-Gold Chemically Competent Cell
XL10-Gold化学感受态细胞是经特殊工艺处理得到的感受态细胞,特别适合于大分子量DNA的高效转化。具有四环素和*霉素抗性,使用Puc19质粒测得其转化效率达108cfu/μg,
本品基因型:TetrΔ(mcrA)183Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lac Hte [F´proAB lacIqZΔM15 Tn10 (Tetr) Amy Camr]。
主要具有如下特点:
① Hte表型可增强较大分子量质粒和连接产物的高效转化;
② 具有限制性内切酶缺陷性,更利于克隆 DNA 的稳定和高纯度质粒 DNA 的提取;
③ 更适于质粒文库的构建;
④ 具有lacIqZΔM15,可用于蓝、白斑筛选。
注意事项
1)感受态细胞应保存在-80℃,不可反复冻融和放置时间过长,以免降低感受态细胞的转化效率。
2)整个转化操作,严格根据相应温度及无菌条件要求进行。
3)为确保最高转化效率,整个操作过程应尽量轻柔,并保持低温,且每次转化感受态使用量,不低于100μl。
4)为防止转化不成功,可以保留部分连接反应液,以重新转化,最低化实验可能遇到的风险。
使用方法
1)取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。
2)向100μl感受态细胞悬液中加入0.1-50ng(<10μl /100μl感受态)目的DNA或2μl连接产物,轻轻旋转离心管以混匀内容物,在冰浴中静置30min。
3)置于42℃水浴中热激30s,然后快速将管转移到冰浴中,冷却2-3min,该过程不要摇动离心管,否则会降低转化效率。
4)向离心管中加入900μl 42℃预热的无菌NZY+培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床振荡培养1h(225-250rpm),目的是促使菌体复苏。
【注】:此步也可用LB培养基(不含抗生素)进行菌体复苏。
5)取上述≤200μl转化产物涂至含有相应抗生素的LB固体平板上,将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
【注】:如需做蓝白斑筛选,需至少孵育17h,以充分显色。
储存条件:-80℃
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北京现货XL10-Gold化学感受态细胞供应关键词:XL10-Gold Chemically Competent Cell,XL10-Gold化学感受态细胞,SY0018
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北京现货XL10-Gold化学感受态细胞供应关键词:XL10-Gold Chemically Competent Cell,XL10-Gold化学感受态细胞,SY0018
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文献和实验的宿主菌基因型,并使细胞生长加快(当天获得菌落),已经成功应用于25kb超螺旋DNA和8kb连接DNA的克隆。XL10-Gold®,BL21-Gold,BL21-CodonPlus®,SoloPack® Gold 和96Pack® Gold等系列细胞都带有这个新的性状。超级感受态细胞 Stratagene提供多种>5 x 109 转化子/μg 超螺旋DNA转化效率的化学法超级感受态细胞正是克隆获得大质粒、连接DNA克隆和建库时最值得推荐的。电转化感受态细胞 Stratagene
的核酸凝胶染色试剂,能够在多数应用中提供可以接受的灵敏度,但它是一种高诱变性的化学物质。而且EB染色后具有较高的背景荧光信号。 SYBR Green I 和 SYBR Gold 也被厂家宣传为最灵敏的凝胶染色试剂。但 SYBR Green I 尤其是 SYBR Gold 在常用的微碱性电泳缓冲溶液或预制凝胶中会快速降解,稳定性差导致染色效果极不可靠。SYBR safe 被认为是市场上较为安全的核酸染料,但它的染色效果还远不及 SYBR Green I 。 Goldview从相似性对比试验结果来看
开始做酵母双杂交了,计划用一个膜蛋白去筛库,已经做好了工作量大,而预期结果要靠点小运气的心理准备,面前真是一条很长的路要走! 在丁香园学习了很久,希望能将我这次试验过程中遇到的困难和思索记录下来,跟大家一同讨论,共同学习。 今天先说说实验之前的试剂准备,为了保证实验能顺利进行,我选择了clontech的matchmaker gold系统,订购了人脑cDNA文库(标准化的),还有培养基也是订的商品化的,再有一个提酵母质粒的KIT 1,GOLD系统式对系统3的升级版,替换了一个报告
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