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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
296
- 保质期:
6个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博致力于最快速、最有效的检测产品,包括贝氏柯克斯体荧光PCR检测试剂盒现货在内的细菌PCR检测试剂盒产品是我公司倾力打造的优势产品,欢迎选购。
名称:贝氏柯克斯体荧光PCR检测试剂盒现货
产地:国产|进口
等级:科研试剂
规格:48次/盒
品牌:百奥莱博
本试剂盒适合于检测全血等样本中的贝氏柯克斯体通用,用于贝氏柯克斯体通用感染的辅助诊断,其检测结果仅供参考。
本试剂盒用一对贝氏柯克斯体通用特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对贝氏柯克斯体通用的核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
试剂盒组成:
| 组分 | 数量 | 规格 |
| 贝氏柯克斯体反应液(qPCR MIX) | 1管 | 672μL/管 |
| DNA抽提液(DNA Extraction) | 2管 | 1.5mL/管 |
| 酶混合物(Enzymes MIX) | 1管 | 48μL/管 |
| 阴性对照(NTC) | 1管 | 50μL/管 |
| 贝氏柯克斯体阳性对照(PTC) | 1管 | 50μL/管 |
储存条件:-20℃以下,有效期6个月。
使用方法:
一、样品采集:
用注射器取血5mL至EDTA-2Na抗凝管,取抗凝血下层血细胞50μL,加入100μL双蒸水吹匀。
二、DNA提取:
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液,按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
对上述处理好的样本加入等体积核酸提取液(固体标本加入50μL核酸提取液),100℃恒温处理10min,13000rpm离心5min,取上清液转移至新的1.5mL EP管,-20℃保存;
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
三、检测步骤:
1.试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
| 试剂 | 每个反应加入的量 | N个反应加入的量 |
| 荧光PCR反应液 | 14µL | N×14µL |
| 酶混合物 | 1 µL | N×1µL |
| 总量 | 15 µL | N×15µL |
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
2.qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件:
| 1循环 | 50℃ for 2 min预变性 | 1循环 | 95℃ for 10 minPCR扩增 | 40循环 | 95℃ for 15 sec 60℃ for 60 sec |
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
四、结果分析:
1.结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
2.试验成立判定
➤阴性对照:不应产生任何的扩增曲线。
➤阳性对照:均产生扩增曲线。
➤以上条件应同时满足 ,否则,此次试验视为无效。
3.结果判定
➤在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明贝氏柯克斯体核酸阳性。
➤Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明贝氏柯克斯体核酸阴性。
➤如果Ct值>35,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
➤对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行贝氏柯克斯体 qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明贝氏柯克斯体核酸阳性;否则判为样本阴性。
五、注意事项:
➤初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
➤所有使用的离心管最好高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
➤PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
➤样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
➤试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
关于贝氏柯克斯体荧光PCR检测试剂盒现货的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·伤寒杆菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA013
英文名称:Fluorescent PCR detection kit for Salmonella typhi
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·肺炎支原体/肺炎衣原体双重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA052
英文名称:Fluorescent PCR detection kit for Salmonella typhi
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
一、简介:
本试剂盒用一对犬细小病毒特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对犬细小病毒核酸进行体外扩增检测,用于对可疑感染病犬的病原学诊断。
二、用途:
本试剂盒适用于检测咽拭子、痰液,肺、淋巴结等组织以及血清等标本中肺炎支原体(MP)和肺炎衣原体(CP)DNA,适用于肺炎支原体和衣原体感染的辅助诊断。其检测结果仅供参考。
三、试剂盒组成:(48T)
| 名称 | 数量 | 规格 |
| 核酸提取液 | 2管 | 1.5ml/管 |
| Taq 酶系 | 1管 | 50μl/管 |
| qPCR MIX | 1管 | 1.0ml/管 |
| 阳性质控品 | 1管 | 50μl/管 |
| 阴性质控品 | 1管 | 250μl/管 |
四、荧光PCR 仪器适用范围:取得资格认证的荧光定量PCR仪。
五、储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融,有效期6个月。
六、样本采集及运输:
1. 适用标本:咽拭子、痰液、组织、血液等。
2. 标本采集:
痰液:取受检者深部痰液2-3ml置入5ml离心管,密闭送检。
咽试子:受检者生理盐水漱口,无菌咽试子粘取深部痰液,置入5ml离心管,密闭送检。
灌洗液:取待检者肺灌洗2-3ml,置于5ml离心管,密闭送检。
其他标本:取发病动物血液、组织等标本立即送检。
3. 保存运输:标本建议立即送检,如果需要保存建议于-20℃或者-80度保存,不超过6个月。避免反复冻融。标本运送时应采用0℃冰壶。
七、检测步骤:
1. 核酸提取
1.1 痰液或灌洗液:将痰液或灌洗液充分混匀,取0.5ml转至1.5ml干净离心管,加入等体积4%NaOH,充分混匀,室温放置10min,12000rpm离心5分钟,弃上清,沉淀加50μl核酸提取液,充分混匀,100℃处理10分钟,12000rpm离心5分钟,取上清液4μl做PCR反应。
1.2 咽试子:取1ml生理盐水加入5ml离心管,充分洗涤咽试子,将洗涤液转至1.5ml干净离心管中,13000rpm离心5分钟,弃上清,沉淀加50μl核酸提取液,充分混匀,100℃处理10分钟,12000rpm离心5分钟,取上清液4μl做PCR反应。
1.3 固体组织:剪取约0.5g组织,用生理盐水洗去血污,剪碎加入TE0.5ml转移到匀浆器中匀浆。将匀浆液50ul转移到1.5ml离心管中,加入50μl核酸提取液(使用前请室温溶解并充分混匀) 并与沉淀混匀,100℃恒温10min,13000rpm离心3min,取上清4μl进行PCR反应。
1.4 其他液体标本(培养物或血清等):取标本1-2ml,13000rpm离心3min,弃上清,沉淀加入50μl核酸提取液(使用前请室温溶解并充分混匀) 并与沉淀混匀,100℃恒温10min,13000rpm离心3min,取上清4μl进行PCR反应。
上述标本也可以选用取得资格认证的商业化试剂盒提取DNA。
2.PCR扩增
从试剂盒中取出qPCR MIX、Taq酶系室温融化并振荡混匀后,瞬时离心。设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
计算好各试剂的使用量,在一个灭菌洁净离心管中充分混匀,瞬时离心,向设定的N个PCR反应管或反应板中加入21μl上述试剂,然后再分别加入4μl 提取的待测样品、阳性质控品和阴性质控品,瞬时离心。放入荧光定量PCR仪器的反应槽内,按对应顺序设置阳性质控品、阴性质控品以及待测样品,并设置样品名称、报告基团设置为FAM和HEX(或JOE或VIC),其中FAM基团检测肺炎支原体,HEX(或JOE或VIC)基团检测肺炎衣原体,淬灭基团为TAMRA。
推荐扩增条件为:94℃→2分钟,后94℃ 30秒→55℃ 45秒(采集荧光),40个循环。
基线调整取6-15个循环的荧光背景信号,阈值设定原则上以阈值线刚超过阴性质控品的检测荧光曲线的最高点。
3. 结果分析判定
反应结束后,针对FAM和HEX(或JOE或VIC)双通道,使用手动调整阈值使阴性质控品Ct 值均在40以上,Ct 值小于35的为阳性;Ct 值在35-40之间,为灰区,需要进行重复试验。重复试验之后,如果Ct 值仍然在35-40之间,判断为阴性。
其中FAM通道为肺炎支原体检测结果,HEX(或JOE或VIC)通道为肺炎衣原体检测结果。
4. 质控标准
阴性质控品:CT值均显示UNDET或者CT=40,即结果为阴性;
阳性质控品:Ct 值均应小于 30,且呈标准“S”型扩增曲线。
以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效,全部试验应重新进行。
八、注意事项:
(1)初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2)所有使用的离心管应高压灭菌,而且必须不含DNA 酶。
(3)PCR 操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR 扩增区等),防止实验室污染。
(4)样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5)试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
贝氏柯克斯体荧光PCR检测试剂盒现货关键词:SYA133,贝氏柯克斯体荧光PCR检测试剂盒,百奥莱博
·肠产毒性大肠杆菌(ETEC)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA088
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·恶性疟原虫/间日疟原虫核酸双重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA137
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·腮腺炎/乙脑/肠道病毒三重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA223
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·猪附红细胞体病ELISA检测试剂盒
编号:SYA642
等级:科研实验专用
规格:96次/盒
·鸡毒支原体(MG)单重凝胶PCR检测试剂盒
编号:SYA546
等级:科研实验专用
规格:96次/盒
·对虾白斑病毒(WSSV)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA513
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
本试剂盒适合于检测对虾样品按不同的大小或感染期取不同组织样品等样本中的对虾白斑病毒(WSSV),用于对虾白斑病毒(WSSV)感染的辅助诊断,其检测结果仅供参考。
本试剂盒用一对对虾白斑病毒特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对对虾白斑病毒DNA进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染动物的病原学诊断。
试剂盒组成:
| 组份 | 数量 | 规格 |
| WSSV反应液(WSSV-qPCR MIX) | 1管 | 672μL/管 |
| DNA抽提液(DNA Extraction) | 2管 | 1.5mL/管 |
| 酶混合物(Enzymes MIX) | 1管 | 48μL/管 |
| 阴性对照(NTC) | 1管 | 50μL/管 |
| WSSV阳性对照(WSSV-PTC) | 1管 | 50μL/管 |
储存条件:-20℃,有效期6个月。
使用方法:
一、样品采集及前处理:
对虾样品按不同的大小或感染期取不同组织样品0.1g左右,其中,对虾幼体、仔虾取完整个体,3cm以下的幼虾取摘除虾眼的头胸部,较大的幼虾可取腮区或数根腮丝,成虾取1-2根腮丝或自心脏或腹部血窦抽取血淋巴,怀疑为慢性感染的较大幼虾或成虾取淋巴器官。如果2h以后才能处理,宜将样本保存于无水乙醇中。非对虾的甲壳类动物参照对虾的方法取样。非生物样品,取0.1-0.5g。
手术剪剪碎混匀后取0.05g于研磨器中研磨,加入1.5mL生理盐水后继续研磨,待匀浆后转至1.5mL灭菌离心管中,8000rpm离心2min,取上清液100μL于1.5mL灭菌离心管中。
二、DNA提取:
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液,按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套),并按照相应试剂盒说明进行操作。
对上述处理好的样本加入等体积核酸提取液(固体标本加入50μL核酸提取液),100℃恒温处理10min,13000rpm离心5min,取上清液转移至新的1.5mL EP管,-20℃保存;
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
三、检测步骤:
1.试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(WSSV-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
| 试剂 | 每个反应加入的量 | N个反应加入的量 |
| 荧光PCR反应液 | 14µL | N×14µL |
| 酶混合液 | 1µL | N×1µL |
| 总量 | 15µL | N×15µL |
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(WSSV-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
2.qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件:
| 1循环 | 50℃ for 2 min | |
| 预变性 | 1循环 | 95℃ for 10 min |
| PCR扩增 | 40循环 | 95℃ for 15 sec 60℃ for 60 sec |
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
四、结果分析:
1.结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
2.试验成立判定
➤阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
➤阳性对照(WSSV-PTC):均产生扩增曲线。
➤以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
3.结果判定
➤在试验成立的条件下,Ct值≤35,且曲线有明显的指数增长曲线,表明WSSV核酸阳性。
➤Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明WSSV核酸阴性。
➤如果Ct值>35,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
➤对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行WSSV 检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明WSSV核酸阳性;否则判为样本阴性。
五、注意事项:
➤初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
➤所有使用的离心管最好高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
➤PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
➤样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
➤试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
贝氏柯克斯体荧光PCR检测试剂盒现货关键词:SYA133,贝氏柯克斯体荧光PCR检测试剂盒,百奥莱博
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