相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
361
- 英文名:
One Step RT-PCR Kit
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应一步法逆转录试剂盒怎么卖,我公司销*(代"售")高质量、高纯度的生化试剂,同时价格极具竞争力,满心期待您的咨询订购。
名称:一步法逆转录试剂盒怎么卖
品牌:百奥莱博
编号:QN0931
产地:国产|进口
本品是一步法RT-PCR反应的专用试剂,反应过程在同一管内连续进行,避免开管,能有效防止污染。本品含有高温反转录酶(RNase H-)和新型热启动酶,采用优化配方的专用Buffer,具有更高的反转录和PCR扩增效率,适合于低浓度RNA模板的高灵敏度扩增。
试剂盒组份:
25×One Step RTase mix
5×One Step RT Mix Buffer
本品首先采用反转录酶以RNA为模板合成 cDNA,然后再以合成的cDNA为模板,经过PCR扩增反应的热变性、引物退火、链延伸三个步骤循环往复,在短时间内扩增得到大量DNA片段,扩增得到的目的产物3’末端含有一个A碱基,可直接用于T/A克隆。
技术说明:
1、 该体系常用50℃进行反转录反应,可以在45℃~60℃范围内进行反转录温度优化;根据反应特征不同,可以在10~30分钟内对反转录时间进行优化;
2、 该体系所用的反转录酶是在MMLV基础上进行了基因改造,去除了RNaseH活性,使其具有更高的温度耐受性和反转录温度,对RNA复杂结构模板具有更高的反转录效率;
3、 该体系具有更好的体系稳定性和适用性,非常适合于病毒、组织等样本提取RNA复杂模板的检测。
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期一年。
关于一步法逆转录试剂盒怎么卖的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·四乙基*化铵
编号:QN0578
英文名称:Tetraethylammonium bromide
规格:100g
CAS号:71-91-0
别名:*化四乙铵;四乙*铵
分子式:C8H20BrN
分子量:210.16
·全蛋白提取试剂盒(强)
编号:QN1069
英文名称:Tetraethylammonium bromide
规格:50T|100T
全蛋白提取试剂盒(强)用于哺乳动物组织和细胞中提取总蛋白,试剂盒中的裂解液含有蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂,作用较为强烈,可快速获得总蛋白,可用于免疫印迹实验等基础研究实验,由于含有上述的酶抑制剂,不能用于研究蛋白激酶和磷酸激酶的研究。
操作方法:
1、组织总蛋白的提取
(1)在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制剂、蛋白酶抑制剂和PMSF;混匀,放置在冰上备用;
(2)称取0.1g的新鲜组织,放置于玻璃匀浆器的入口缓冲处,用眼科剪将组织块尽可能的剪碎,然后加入0.5-1ml的新配置的裂解液,研磨直至没有明显的组织块,这个过程注意冰上操作;
(3)将组织匀浆液移入1.5ml的EP管中,4℃12000g离心30min;
(4)吸取上清至新的管中;
(5)进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。
(提取好的蛋白建议保存于-80℃,即用即取,避免反复冻融,避免长时间储存。)
2、细胞总蛋白的提取
裂解液的用量:107个细胞需要裂解液1ml;
贴壁细胞:弃去培养基,用冷的PBS洗两次,弃去PBS,然后加入计算好的细胞裂解液;在冰上用细胞刮刀进行刮离细胞,
将刮离的细胞裂解液移入EP管中,颠倒裂解20-30min
悬浮细胞:4℃400g离心收集细胞,用冷的PBS洗两次细胞,同样按细胞数加入裂解液,
涡旋10s,放置冰上裂解10min,重复3-4次;
裂解完毕之后,将细胞裂解液4℃12000g离心30min;
将上清移入新的EP管中;
进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。
(提取好的蛋白建议保存于-80℃,即用即取,避免反复冻融,避免长时间储存。)
注意事项:
实验过程,所有试剂都要需要预冷或者即融,保证操作过程中的低温环境;
PSMF(有毒)现用现加,因为PMSF在水溶液中会快速降解;
储存条件 :-20℃
一步法逆转录试剂盒怎么卖关键词:One Step RT-PCR Kit,一步法逆转录试剂盒,QN0931
·6-磷酸葡萄糖二*
编号:QN0194
英文名称:glucose-6-phosphate
规格:500mg|1g
本品常用于测定6-磷酸葡萄糖脱*酶的底物等生化研究方面。
别名:6-磷酸葡萄糖二*盐;Robison ester
CAS号:3671-99-6
分子式:C6H11Na2O9P·xH2O
分子量:304.10
储存条件:−20℃
纯度:≥98%
性状:白色结晶性粉末
溶解性:溶于水,参考浓度100mg/ml
·左氧*沙星
编号:QN0040
英文名称:Levofloxacin
规格:5g
本品广泛应用于分子生物学,药理学等科研方面。本品具有广谱抗菌作用,抗菌作用强,对多数肠杆菌科细菌,如大肠埃希菌、克雷伯菌属、变形杆菌属、沙门菌属、志贺菌属和流感嗜血杆菌、嗜肺军团菌、淋病奈瑟菌等革兰阴性菌有较强的抗菌活性。对金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、化脓性链球菌等革兰阳性菌和肺炎支原体、肺炎衣原体也有抗菌作用,但对厌氧菌和肠球菌的作用较差。
CAS:138199-71-0
分子式:2(C18H20FN3O4).H2O
分子量:740.75
储存条件:室温,避光防潮密闭干燥
纯度:98%
性状:类白色至淡黄色结晶性粉末
本品为氧*沙星的左旋体,其体外抗菌活性约为氧*沙星的两倍。其作用机制是通过抑制细菌DNA旋转酶的活性,阻止细菌DNA的合成和复制而导致细菌死亡(仅供参考)。
一步法逆转录试剂盒怎么卖关键词:One Step RT-PCR Kit,一步法逆转录试剂盒,QN0931
·多聚-L-赖*酸(3-7万)
编号:QN1265
英文名称:Poly-L-lysine hydrobromide mol wt 30,000-70,000
规格:25mg
多聚赖*酸溶液是广泛应用的组织切片与玻片黏合剂,该多聚阳离子分子与组织切片上的阴离子相互作用会产生较强的黏合力。培养瓶表面的性质对于细胞培养至关重要,细胞表面的糖蛋白(阴性)易于吸附在亲水性的表面上,因而细胞培养表面如果有相当含量的阳性电荷更能促进细胞吸附,这正是运用多聚赖*酸优化细胞培养表面的重要所在。
应用:
适用组织学,免疫组织化学,冰冻切片,细胞涂片,原位杂交等使用的玻片的防脱片处理,以防实验操作过程中组织掉片。也可用于细胞培养,增加细胞贴壁能力。
别名:聚-L-赖*酸(**酸盐);多聚赖*酸
CAS号:25988-63-0
分子量:30,000-70,000
储存条件:2~8℃,有效期2年。
玻片处理:
1. 灭菌水稀释聚赖*酸溶液,一般的使用浓度为0.01%。
2. 将玻片浸在稀释的多聚赖*酸溶液5分钟。注意增加时间不会提高包被效果。
3. 在60℃烘箱1小时干燥,或室温18-26℃过夜干燥待用。
注意:
1. 每100mL已稀释的多聚赖*酸溶液要包被的玻片40-90张, 超过90张片子将影响其黏合力。
2. 用之前的玻片必须保持清洁。必要时用含1% HCl的70%乙醇溶液来清洗。
3. 释过的多聚赖*酸溶液要放在2~8℃,至少在3个月内是稳定的。
4. 用过的稀释液要过滤,若出现浑浊或长菌要丢弃
5. 多聚赖*酸浓度可以高一些,吸出来的可以重复利用至少20次。
培养瓶处理:
1. 包被培养板或者是培养瓶,一般多聚赖*酸浓度为0.01%,
2. 准备100ml三蒸水,经高压灭菌处理。
3. 0.01%的多聚赖*酸以50微升每平方厘米的量均匀涂于培养底物的表面,室温下静置5min,吸除多余液体。
4. 加入灭菌水,反复冲洗三次,无菌操作。
5. 处理后无菌晾干备用。
6. 回收后保持无菌的多聚赖*酸可反复利用。
我公司强烈推荐核酸扩增(PCR)系列产品,热情期待您的咨询选购一步法逆转录试剂盒怎么卖。
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验1. 原理 RT—PCR 是一种将 cDNA 合成与 PCR 技术结合分析基因表达的快速灵敏的方法,主要用于对表达信息进行检测或定量分析, 还可以用来检测基因表达差异而不必构建 cDNA 文库克隆 cDNA。 RT-PCR 的模板可以为总 RNA 或 poly(A) 选择性 RNA 。逆转录反应可以使用逆转录酶,以随机引物、oligo(dT) 或基因特异性的引物(GSP)起始。 在实际应用中,RT—PCR 又常常分为一步法 RT—PCR 和两步法 RT—PCR。 2. 特点 一步法
-PCR 中,逆转录酶将 RNA 转化为 cDNA,然后通过 PCR 反应扩增 cDNA,为下游实验提供研究模板,因而逆转录酶是实验成功的关键步骤之一(如下图)。选定的逆转录酶应对所有样本均具有最高效率,即便是难转录 RNA 样本,如降解、抑制剂残留或具有高度二级结构的 RNA 样本。 图. 逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)。RT =逆转录,RTase =逆转录酶 常用的 RT-PCR 方法分为一步法和两步法,每种方法都各有优缺点,简要概述如下: 表. 对比一步法和两步法 RT-PCR 定量 RT
检测或定量。另外,这项技术还可以用来检测基因表达差异或不必构建cDNA文库克隆cDNA。RT-PCR比其他包括Northern印迹、RNase保护分析、原位杂交及S1核酸酶分析在内的RNA分析技术,更灵敏,更易于操作。 RT-PCR的模板可以为总RNA或poly(A)+选择性RNA。逆转录反应可以使用逆转录酶,以随机引物、oligo(dT)或基因特异性的引物(GSP)起始。RT-PCR可以一步法或两步法的形式进行。在两步法RT-PCR中,每一步都在最佳条件下进行。cDNA的合成首先在逆转录缓冲液中进行
技术资料暂无技术资料 索取技术资料










