大提柱式质粒DNA提取试剂盒特价优惠

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产供应大提柱式质粒DNA提取试剂盒特价优惠，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：大提柱式质粒DNA提取试剂盒特价优惠
产地：国产|进口
英文名：Mass-plasmid DNA column extraction kit
规格：5次
编号：BTN80912
本试剂盒是用于质粒DNA大量制备与纯化的试剂盒。菌体先经碱裂解法处理，再通过离心吸附柱，专一结合DNA，最后洗去杂质，高效快速提取质粒DNA，全*(代"套")操作可以在30分钟之内完成。使用本试剂盒可从50-100mL 过夜培养的菌液纯化得到高达300-500μg的高纯度质粒DNA(OD260/OD280= 1.8-2.0)，可以直接用于酶切、转化、测序及PCR等。

试剂盒特点：
1．快速、步骤少，整个操作在半个小时之内完成。
2．纯度高，采用本试剂盒提取的质粒OD 比值在1.8-2.0 之间。
3．产量高，每毫升过夜培养的细菌可以提取到2-5μg/mL。
4．用途广，适用于低拷贝和高拷贝质粒。
5．价格低，比多数国内同类产品的价格更便宜。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	30ml
溶液B	30ml
RNase A溶液(10mg/mL)	0.15ml
溶液C	40ml
大提离心吸附柱	5套
通用洗柱液	100ml
DNA洗脱液2.0	10ml×2
说明书	1份

储存条件：RNase A溶液需-20℃保存，其余成分可室温或4℃保存，如有沉淀可加热溶解后再使用。

使用方法：
1. 用250mL离心管收集100-300mL菌液，5000rpm离心10分钟，去除上清。
2. 往细菌沉淀中加入6mL溶液A，充分振荡悬浮(第一次使用时需要将RNase A溶液全部加入到溶液A中并混合均匀，未用完的、含RNase A的溶液A需放4℃保存)。注意：充分重悬细胞沉淀使之无细胞结块状物对于获得高的质粒产量十分重要。
3. 加入6mL溶液B，温和翻转10 余次至透明。若混合液不透明，应减少细菌的用量或室温放置5-10分钟直到裂解液变透明。注意: 避免剧烈振荡，否则细菌基因组DNA 将断裂为小片段，与质粒难以分离，污染质粒DNA。
4. 加入冰浴的8mL溶液C，颠倒混匀，冰上放置10分钟。混合物中将有白色絮状物形成。注意不要过分振荡。
5. 6000rpm离心10分钟。如果离心管承受能力强，离心速度还可以适当提高以充分沉淀絮状物。
6. 将上清液(约20mL)转移到离心吸附柱中，放入50mL 套管中。
7. 6000rpm离心5分钟，质粒DNA 将与离心吸附柱中的膜结合。弃穿透液。
8. 将10mL 通用洗柱液加入到离心吸附柱中，室温静置2分钟后6000rpm离心5分钟，弃穿透液。
9. 重复上步一次，即将10mL 通用洗柱液加入到离心吸附柱中，室温静置2分钟后6000rpm离心5分钟，弃穿透液。
10.室温6000rpm 空甩5分钟，弃穿透液。注意：此步对去除残留通用洗柱液很重要，否则通用洗柱液会影响DNA的使用。
11. 将离心吸附柱放入一个自备的、干净的50mL塑料离心管中，加1mL DNA洗脱液2.0(洗脱液如加热到50-65℃效果更佳)，室温静置2分钟后6000rpm离心5分钟，收集液即是质粒DNA溶液。
12. 本试剂盒中的离心吸附柱吸附能力较强，所以再用1mL DNA 洗脱液2.0洗脱3-4次才能把绝大部分质粒DNA 洗脱下来。得到的RNA可以收集在一起立即使用或存放于-80℃待用。注：如果DNA 洗脱液不够，可以用自备的DEPC 水代替。
 注：一般情况下，第一次洗脱可以洗脱约25%的质粒DNA；第二次洗脱可以洗脱约35%的质粒DNA；第三次洗脱可以洗脱约20%的质粒DNA；第四次洗脱可以洗脱约10%的质粒DNA；第五次洗脱可以洗脱约8%的质粒DNA。
13. 合并所得质粒DNA，立即使用或-20℃储存。如果需要使用液相内毒素清除剂清除质粒DNA中的内毒素，可以直接将此步所得的DNA溶液用于去内毒素处理。如果DNA浓度太低，可以另购本公司的核酸浓缩剂进行浓缩。

注意事项：
1．细菌培养时间一般为12-16小时，但接种量大时应减少时间。过度培养会降低质粒的质量甚至导致质粒DNA突变。
2．溶液A：溶液B：溶液C的比例为3：3：4。若细菌量增大，需按此比例放大这些溶液的使用量。
3．随菌体增多应延长溶液B的作用时间，直至溶液成粘稠透明状。但时间过长会导致质粒DNA变性。
4．加溶液C后形成的白色沉淀中有变性的蛋白质、细菌基因组DNA和细胞碎片，离心后应避免带入到后续处理中。
5．通用洗柱液洗涤离心柱后必须甩干一次，否则残留通用洗柱液中的乙醇会干扰后续实验。
6．质粒的具体产量跟细菌量、质粒拷贝数、质粒大小和操作规范程度密切相关。100mL高拷贝的菌液一般能得到700-1500ug质粒DNA，100mL低拷贝的菌液一般能得到150-350ug质粒DNA。
7．纯化的质粒在电泳中表现为2-3 条带有时甚至为4-6 条带均属正常，未分开的环套质粒，易被误判为基因组DNA。

除大提柱式质粒DNA提取试剂盒特价优惠外，我公司正在打折促销以下产品：

·高载量PCR片段纯化试剂盒
编号：BTN90212
英文名称：Maxi PCR Clean-Up Kit
规格：100次
本试剂盒可用于PCR产物回收，并且对于一些酶反应液回收(酶切、连接、探针标记等)也同样适用。试剂盒采用可以高效、专一结合DNA的硅胶膜。可回收50bp－40 kb的DNA片段，回收效率可达80%。得到的DNA可直接用于连接、转化、酶切、测序、杂交等分子生物学实验。

产品特点：
1.高效，回收效率高达90%。
2.快速，整个过程只需要十余分钟，可同时处理多个样品，节省时间。
3. 纯度高，本试剂盒回收的DNA可直接用于酶切、连接、PCR等多种分子生物学实验。
4. 用途广，本试剂盒能回收单链、双链及环状DNA。
5.处理量大，每个离心吸附住最多可吸附的DNA量为20μg。
6. 价格便宜，比国内绝大多数同种产品的价格便宜。
7. 储存方便，试剂盒可以在室温放置数月，不影响其质量。

试剂盒组成：

成分	100T
平衡液	50ml
通用溶胶液(专用上柱液)	30ml
离心吸附柱	100套
通用洗柱液	100ml
DNA洗脱液	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

使用方法：
1.离心吸附柱平衡：向离心吸附柱中加入500μL的平衡液，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液。
2.在含DNA片段的PCR反应产物中，加入3倍体积的专用上柱液。
3. 60℃水浴5分钟。
4. 将离心管中的溶液转移到离心吸附柱中，套上液体收集管，静置3分钟，12000rpm离心半分钟并倒掉收集管中的液体。
5. 加入700μL 通用洗柱液于离心柱中，室温静置2分钟，12000rpm离心半分钟，倒弃收集管中的废液。
6. 12000rpm离心半分钟以去除离心柱中的残留液体。
7. 将离心柱置于一新的干净的离心管(自备)中，加入30-50μL的通用洗脱液于离心吸附柱硅胶膜的中央，静置3分钟，12000rpm离心1分钟。
8.离心管底部所得溶液即为纯化的DNA溶液，可立即用于后续实验或者放冰箱长期保存。

注意事项：
1.电泳回收DNA时，电泳缓冲液可以为TAE、TBE或者百奥莱博的DNA/RNA两用快速电泳液SuperBuffer-2，回收效果为SuperBuffer-2 最好，TAE次之，TBE最差。
2. 专用上柱液含有容易挥发物质，请密闭保存。
3.液体转移到离心柱后，可以延长静置时间使DNA与膜充分结合，提高回收效率。
4. 加专用上柱液的作用是洗盐。
5. 洗脱 DNA前的空甩很重要，以去除膜上残留酒精，否则残留酒精会影响后续DNA反应。
6. 加 TE 洗脱DNA时，最好把离心柱放入50-65℃水浴加热，但要注意把离心管密闭好；增大TE 使用量有利于回收，但要注意实际上样量与最终回收体积的关系，以便于计算回收率。TE可以用水替代，但pH不能低于7.5。

疑难解答：
Q：为何用硅胶膜吸附柱法回收TBE胶中的DNA效果不好？
A：因为TBE中的硼*(代"酸")会跟硅胶表面的OH基团反应，而这些OH 又是吸附DNA所必需的。


大提柱式质粒DNA提取试剂盒特价优惠关键词：Mass-plasmid DNA column extraction kit,BTN80912,大提柱式质粒DNA提取试剂盒


·重组蛋白A
编号：BTN131079
英文名称：Staphylococcal protein A
规格：1mg
本品为重组蛋白A，分子量32kD，纯度＞90%，带His标签。

储存条件：-20℃保存，有效期1年。

·虾碱性磷酸酶(SAP)
编号：BTN120403
英文名称：Shrimp Alkaline Phosphatase
规格：300U
虾碱性磷酸酶与大肠杆菌来源的碱性磷酸酶同样，催化所有磷酸单酯的水解，不能催化磷酸二酯以及磷酸三酯的水解，也能催化ATP等焦磷酸键水解。但该酶与大肠杆菌来源的BAP以及小牛肠来源的CIAP 不同，通过65℃，15分钟的热处理，可使酶完全不可逆失活。

产品用途：
1．去除DNA片段的5´-末端的磷酸基。防止线状DNA的自身环化(Self-Ligation)。
2．除去PCR反应后残存的dNTP。PCR产物进行测序时，在反应体系中如果有多余的Primer和dNTP，将影响测序反应的正常进行。使用Exonuclease I分解残存的Primer；用SAP处理可降解多余的dNTP，之后不需要对PCR产物进行精制，立即可以进行测序反应。

产品组成：

成分	规格
虾碱性磷酸酶(1U/μL)	300U
10×Buffer	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：在37℃、pH9.8的条件下，1分钟内水解对硝基*(代"*")磷酸盐生成1μmol的对硝基*(代"*")酚所需要的酶量定义为1个活性单位。

纯度：

1．5U的本酶和1μg的λDNA-Hind III片段在37℃、pH7.5的条件下反应1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
2．5U的本酶和1μg的16S，23S rRNA在37℃、pH7.5的条件下反应1小时，RNA的电泳谱带不发生变化

使用举例：
1．在1.5mL离心管中配制下列反应液，定容至50μL。

成分	用量
DNA Fragment	1～10pmol
SAP(1～5μL)	1～5U
10×Buffer	5μL
dH2O	up to 50μL

2．37℃反应15～30分钟。
3．65℃反应15分钟(加热失活)。
4．加入2.5μL的3M NaCl(终浓度150mM)。
5．乙醇沉淀加入125μL(2.5倍量)的预冷无水乙醇，-20℃放置30～60分钟，离心。
6．加入200μl的70％冷乙醇清洗沉淀后，干燥。
7．TE Buffer(<20μL)溶解沉淀。



大提柱式质粒DNA提取试剂盒特价优惠关键词：Mass-plasmid DNA column extraction kit,BTN80912,大提柱式质粒DNA提取试剂盒

ARB12448 大鼠*结合蛋白(CR)酶标法分析 Rat calretinin,cr ELISA KIT
D-缬*酰-L-白*酰-L-赖*酸对硝基*(代"*")胺2盐*(代"酸")盐 Magnesium gluconate 62354-43-2
ARB12796 小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)Elisa定量检测 Mouse β-galactosidase,βgal ELISA KIT
N-*乙基-3-*丙基甲基二甲氧基硅烷 DL50 3069-29-2
孔雀绿草酸盐 Cuprizon 2437-29-8
*基脲 IPA-K 57-56-7
乙酸*缓冲液(0.2mol/L,pH3.6-5.8)   500ml
ARB10329 人内毒素(ET)elisa检测说明书 Human endotoxin,et ELISA KIT
5-肌苷一磷酸二*盐 Chromotrope 2R 20813-76-7
SB固体培养基粉剂(Super Broth)   1L
632-69-9 虎红(玫瑰红)(孟加拉红) Rose Bengal sodiu*(代"m") salt
L-甲基多巴 Ethylenediamine dihydrochloride 41372-08-1
ARB11374 人前列腺素F2α(PGF2α)免费代测 Human prostaglandin f2α,pgf2α ELISA KIT
113-24-6 Pyruvic Acid   丙*(代"酮")酸*

我公司正在打折促销DNA纯化全系列产品，恭候您的咨询选购大提柱式质粒DNA提取试剂盒特价优惠。