即用型LB平板培养基(含Tet)打折促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")即用型LB平板培养基(含Tet)打折促销，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：即用型LB平板培养基(含Tet)打折促销
规格：10块
品牌：百奥莱博
英文名：LB Petri Dish(Tet)
编号：BTN130848D
产地：国产|进口
本产品为即用型LB平板培养基，A型为无抗生素LB平板，B型为LB-Amp平板，C型为LB-Kan平板，LB-Tet平板。

储存条件：低温运输及保存，有效期半年。

我公司的即用型LB平板培养基(含Tet)打折促销，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：
3-*杀螨醇 5-Aminofluorescein 115-32-2
ARB11154 人肥大细胞类胰蛋白酶(MCT)elisa检测操作说明书 Human mast cell tryptase,mct ELISA KIT
ARB11564 人基质γ羧基谷*酸蛋白(MGP)Elisa方法检测 Human matrix gla protein,mgp ELISA KIT
ARB13517 鱼类皮质醇(CortIsol)elisa检测说明书 Fish cortisol ELISA KIT
λ DNA HindIII 
5704-04-1 Tricine  三(羟甲基)甲基甘*酸
ARB10738 人纤维蛋白(FIbrIn)含量测试 Human fibrin ELISA KIT
胆色素染色液(改良Fouchet法)   2×100ml
NF-207 羊抗人IgA血清
ARB13245 小鼠棒状杆菌Elisa分析 Mouse coryne*(代"b")acterium ELISA KIT
ARB10083 人CX3C趋化因子受体1(CX3CR1)定量分析 Human cx3c-chemokine receptor 1,cx3cr1 ELISA KIT
PY04-029  多粘菌素(II)  2.5万单位/支×10支  每支添加于100ml*化*多粘菌素B肉汤基础(SCPB)培养基中，用于副溶血性弧菌选择性增菌培养
ARB12108 大鼠可溶性CD40配体(sCD40L)elisa检测操作说明书 Rat soluble cluster of differentiation 40 ligand,scd40l ELISA KIT
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·96孔板PCR片段纯化回收试剂盒(真空法)
编号：BTN131211
英文名称：PCR fragment Purification Kit(with 96-wells plate)
规格：1次

·蛋白*(代"磷")酸酶抑制剂混合液Ⅱ
编号：BTN130525
英文名称：Phosphotase Inhibitor Cocktail 2
规格：1mL
组织/细胞裂解时会释放出大量内源性蛋白*(代"磷")酸酶，以各种方式催化磷酸化蛋白的去磷酸化，导致不同于正常生理状态的差异，影响实验结果。因此，加入外源性蛋白*(代"磷")酸酶抑制剂，抑制磷酸化蛋白的去磷酸化，维持蛋白质的磷酸化状态，是Western Blotting、免疫共沉淀检测磷酸化蛋白质和蛋白激酶活性测定等研究不可缺少的一步。本产品就是针对这一用途开发。

产品特点：
1. 即开即用，不需要单独购买每个成分然后再配制。
2. 由多种蛋白*(代"磷")酸酶抑制剂组成，各成分的浓度经过精心优化。
3. 抑制谱广，能特异性地抑制酪*酸磷酸酶、酸性磷酸酶和碱性磷酸酶，最大限度保持蛋白质磷酸化。
4.与各种动物细胞裂解液兼容。
5. 使用简单，在细胞裂解液中按一定比例加入即可(根据蛋白*(代"磷")酸酶决定，一般按1/100的体积比)。
6.适用于Western blot、免疫共沉淀检测磷酸化蛋白质、蛋白激酶活性测定和信号传导等试验。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1.在临用前溶解本产品，并按1/100的比例加入到细胞裂解液中(1mL细胞裂解液中加入10μL)。注意：对蛋白*(代"磷")酸酶含量特别丰富的组织，可以将加入比列提高到1/20-1/50。
2.后续动物细胞提取和蛋白组学处理按常规方法进行即可。

注意：避免反复冻融本产品，所以第一次溶化后，如果还有剩余，可将其分装成小份冻存，每次用多少取多少。

·链霉亲和素磁珠
编号：BTN130521
英文名称：Magnetic beads binding with streptavidin
规格：2mL
本产品是由磁性纳米颗粒与高纯度的链霉亲和素共价偶联而成。这种微球能用于捕获生物素标记的底物，如抗原、抗体和核酸等。链霉亲和素(streptavidin)与生物素(biotin)的结合是最著名的非共价生物交互作用之一，因此，这也是亲和层析法所使用的一种强大工具。生物分子可以与生物素轻松融合，而层析基质上固定的链霉亲和素配体可以与之结合，而且这种链霉亲和素-生物素相互作用具有较低的非特异亲和性，捕获所需的底物能够直接应用于后续实验。本产品可广泛应用于免疫学检测、核酸纯化、核酸固相杂交检测、细胞分选等分子生物学实验。

产品特点：
1. 对于生物素化样品的捕获、漂洗及检测等流程操作更加简便。
2. 体系经过优化，更易于大规模、多样品、自动化操作。
3. 磁珠浓度：1%磁珠含量；
 固相载体：超顺磁性硅基磁珠；
 磁珠粒径：1μm；
 pH耐受范围：2-9。
4. 载样量(每毫克磁珠)：﹥3000pmol游离生物素；﹥450pmol生物素标记的单链寡核苷酸；﹥20μg生物素化IgG。
5.缓冲液：10mM PBS，0.1% BSA，0.05% sodiu*(代"m") azide，0.1% Tween20。

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 取适量磁珠(推荐每次取30μL-50μL 磁珠混悬液，用户可根据样品种类及需求调整使用量)于干净离心管中，通过磁力架磁分离后弃上清。
 注：磁珠使用前请使用上样缓冲液淋洗磁珠3-5次，以保证磁珠的使用效果。
2. 加入待反应样品，室温振荡反应10-30分钟后(反应时间根据生物素化分子的大小及空间结构的复杂性可适当延长)，置于磁力架上进行磁分离，弃上清，并用上样缓冲液重复淋洗3次。
3. 链霉亲和素和生物素的结合非常迅速，且结合后不受pH，温度，有机溶剂和其他变性剂的影响。下表列出了常用链霉亲和素和生物素的解离办法及效率(基于游离生物素，与偶联复合物的生物素数据有明显差异)，用户也可根据自己样品的需求自行设定洗脱方式。
4. 洗脱后的样品客户可根据需求采用适当方法检测。
洗脱条件参照表：

 

洗脱温度和时间	洗脱溶液	洗脱效率
90℃ for 10min	10mM EDTA pH8.2 and 95%甲酰胺	96.8%
90℃ for 5min	10mM EDTA pH8.2 and 95%甲酰胺	96.4%
90℃ for 2min	10mM EDTA pH8.2 and 95%甲酰胺	96.8%
65℃ for 5min	10mM EDTA pH8.2 and 95%甲酰胺	96.4%
65℃ for 2min	10mM EDTA pH8.2 and 95%甲酰胺	97.9%
37℃ for 10min	10mM EDTA pH8.2 and 95%甲酰胺	41.9%
90℃ for 10min	H2O	7.3%
90℃ for 10min	10mM EDTA pH8.2	52.0%
90℃ for 10min	95%甲酰胺	35.9%
90℃ for 10min	30mM NaOAc pH9 and 95%甲酰胺	95.5%
90℃ for 10min	80mM NaOAc pH9 and 95%甲酰胺	97.3%
90℃ for 10min	140mM NaOAc pH9 and 95%甲酰胺	95.4%

使用举例：
利用链霉亲和素磁珠从总RNA中提取mRNA的方法
1. 取0.1-1mg的总RNA样品加入到无菌、无RNase的1.5ml离心管中，加入无菌去离子水至终体积为500μl(注：总RNA 量可低至50μg，但是在该条件下所提取得到的mRNA 常规电泳检测不到，需要采用RT-PCR进行微量检测)。
2. 将上步样品管于65℃温浴10min。
3. 加入3μl 生物素化的Oligo(dT)和13μl的20×SSC溶液到总RNA样品中，温和混匀，室温放置至完全冷却，这一步需要约10min左右。
4.预处理链霉亲和素磁珠：将链霉亲和素磁珠充分混匀后，取适量磁珠于1.5mL无菌、无RNase的离心管内，放在磁力架上，待磁液分离后，移除上清。加1mL 0.5× SSC 洗涤磁珠，放在磁力架上磁液分离，移除上清，重复两次。加100μl 0.5× SSC重悬链霉亲和素磁珠。
5. 将第3 步制备的总RNA 混合溶液加入到上步制备的已经洗涤好且重悬的链霉亲和素磁珠溶液中。
6.室温放置10min，期间每隔1-2min 轻柔混匀以防磁珠出现沉降现象。采用磁力架分离磁珠，小心移除上清，过程中不要触碰到磁珠，该步上清在确定mRNA已经结合并洗脱后再弃掉。
7. 加300μl 0.1×SSC溶液温和吹打或是轻弹洗涤磁珠，然后置于磁力架上分离磁珠，磁液分离后小心移除上清，重复三次，最后一步洗涤后尽可能移除所有上清液。
8. 加入100μl 无RNase 去离子水(洗脱液)，温和吹打或轻弹离心管使磁珠和洗脱液充分混匀。65℃水浴2分钟。
9. 置于磁力架上分离磁珠，将上清转移到一个新的无RNase的离心管内，不要触碰到磁珠(注：如果在转移过程中将磁珠悬起，可将样品管置回磁力架上重新吸取上清)。
10. 回收洗脱液中的mRNA。

链霉亲和素磁珠提取生物素化IgG
1.预处理链霉亲和素磁珠：链霉亲和素磁珠的保存需要加入BSA以保持其活性，故在使用链霉亲和素磁珠之前要彻底除去磁珠储存缓冲液中的BSA、叠氮*和Tween20。使用前需用PBS缓冲液于30分钟之内清洗3次以使磁珠达到最佳使用效果。
 注：在使用前必须彻底重悬链霉亲和素磁珠以保证最佳使用效果和重复性。如果磁珠出现结块现象请勿再继续使用。
2. 将生物素化的IgG 溶解于PBS，IgG浓度大于2mg/mL 较利于筛选。
3. 取100μl预处理过的链霉亲和素磁珠充分震荡混匀，置于磁力架上分离磁珠，去除上清，该过程尽量不要触碰到磁珠团。
4. 取500μl PBS 重悬磁珠，放于磁力架上，磁液分离后，移除上清，重复洗两次。PBS 重悬磁珠，使磁珠恢复到最初的浓度10mg/mL。
5. 将第2 步制备的IgG 加到磁珠管内，室温震荡反应30min。保持磁珠处于悬浮状态，以达到好的结合效率。反应结束后，置于磁力架上，磁液分离后，用移液器小心将上清移至一干净离心管内。注：该步上清可以用来检测未结合到链霉亲和素磁珠上的IgG浓度。
6. 加入1mL PBS溶液重悬淋洗磁珠，置于磁力架上，磁液分离后，移除上清，重复淋洗两次。
7. 选择合适的洗脱方式洗脱IgG。


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·蓝色DNA上样液(6×,非甘油)
编号：BTN130958B
英文名称：DNA Loading Buffer(Blue)
规格：10mL

·大肠杆菌XL10-Gold化学感受态细胞
编号：BTN140431
英文名称：E.coli XL10-Gold Chemical Competent Cell
规格：0.1mL*10
 本产品是采用大肠杆菌XL10菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。本产品适用于高效的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定复制，还适合非甲基化DNA的转化。使用pUC19质粒检测，本产品转化效率可达108。本感受态细胞具有四环素和*霉素抗性。

菌株基因型：Tetr D(mcrA)183 D(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lac Hte [F- proAB lacIqZDM15 Tn10(Tetr)Amy Camr]

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备试剂：目的DNA、SOC或LB培养基等。

使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL，可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μL感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μL无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。

注意事项：
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA总量较少，可取200-300μL转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4,000rpm，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

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