BTN60105型平末端DNA加A试剂盒厂家现货

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名称：BTN60105型平末端DNA加A试剂盒厂家现货
编号：BTN60105
英文名：dA Tailing Kit
产地：国产|进口
本产品利用Taq DNA polymerase的不依赖于模板的末端转移酶活性，在只有dATP 存在的情况下，在平末端的DNA片段加上一个dA 尾巴，使平末端片段也能被T载体克隆。其流程图如下：


产品特点：
1. 简单，2×Tailing Buffer中含有所需要的所有成分,不需要单独准备。
2.适用于任何平末端的DNA片段，包括Pfu DNA polymerase等酶合成的DNA片段。
3.产物可以直接用于与T载体的连接。

试剂盒组成：

 

成分	规格
Taq DNA polymerase(5U/μL)	50μl
2×Tailing Buffer	1.25ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一：反应前纯化处理：
用Vent，Deep Vent，Pfu，Pwo等具有3 到5外切活性的DNA聚合酶扩增得到的DNA片段，必须经过彻底的去除残留的酶的处理过程(如酚/*仿抽提或Proteinase K处理)，否则它们将在加A反应时，切除掉加上的A尾巴，干扰反应。可以采取胶回收和酚/*仿抽提法等常规方法纯化，最后溶解在水或TE中，终浓度以0.1μg/μL为宜。
二：加A反应
在干净的0.5mL或1.5mL离心管中，分别加入下列成分：

回收的DNA片段	0.2-2ug
2×dA Tailing Buffer	25μL
Taq DNA polymerase(5U/μL)	1μL
补水到	50μL
72℃保温2小时

三：反应后处理
加A反应后，Taq DNA pol

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·BAL 31核酸酶
编号：BTN120409
英文名称：BAL 31 Nuclease
规格：50U
BAL 31核酸酶纯化自埃氏交替单胞菌BAL-31培养物。BAL-31核酸外切酶降解双链DNA的3´和5´末端，不切割分子内部。该酶同时还是高度特异性的单链核酸内切酶，在切刻、缺口、双链DNA单链区和双链RNA的单链区进行切割。其工作原理图如下：


产品特点：
1．从两端逐步对双链DNA进行切割，缺失的长度适合于100～1000个碱基左右。
2．加入EGTA可失活。
3．限制性酶切图谱的构建。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：1单位指在50μl反应体系，1X核酸酶BAL-31反应缓冲液，30℃条件下，10分钟从线性双链φX174 DNA(40μg/ml)的两端各切下200个碱基对所需要的酶量。

使用方法：
1．在离心管中加入下列溶液：

成分	用量
pBR322 -Ava I fragment	3μg(2.0pmol)
2×反应 Buffer	37.5μl
BAL 31 Nuclease	3～6U
H2O	up to 75μl

2．30℃保温。分别于1、2、3 min时各取样25μl。
3．加入20mM EGTA，65℃加热10分钟灭活酶。
4．用1% Agarose电泳确认DNA片段。

注意事项：
1．该核酸外切酶的双链产物是平齐末端和粘性末端的混合物。尽管要达到最佳连接效率需要用合适的聚合酶修复粘性末端，但该混合物仍可以直接进行克隆。
2．如果需要，可以在使用前用反应缓冲液稀释该酶。
3．只有在20mM EGTA存在条件下，酶的热失活才有效。


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·CTP溶液(100mM)
编号：BTN120627
英文名称：CTP Solution，100mM
规格：0.25mL
本产品纯度在98%以上(HPLC检测)，不含DNA内切酶、DNA外切酶、RNA酶和磷酸酶的污染，可以直接用于体外RNA转录合成。

GTP分子式为C9H13N3O14P3Na3 ，分子量是549.1，消光系数为9.0×103M -1×cm-1(pH7.0)，λmax为271nm。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·液体样品蛋白纯化回收试剂盒
编号：BTN121208
英文名称：Liquid Sample Protein Purification Kit
规格：50次
本产品专门用于对液体样品进行蛋白提取浓缩、脱盐、脱去垢剂、脱还原剂等。

产品特点：
1.适用于各种液体样品，包括蛋白溶液、胞浆提取液、胞核提取液、细胞或微生物培养基上清液、血液、尿液、脑脊液等。也适于原代或传代细胞悬液。
2. 灵敏，对一般蛋白样品，最低浓度可达1μg/mL；对含SDS的样品，最低浓度为5μg/mL。
3.蛋白回收率95-100%，远高于经典的丙*(代"酮")或三*醋酸沉淀法，且可有效去除样品中的脂质，不影响后续SDS-PAGE和Western Blot等生物实验
4. 得到的蛋白质可用于后续的SDS-PAGE、免疫沉淀和质谱分析等实验。但蛋白已经变性，没有活性。
5. 能有效去除液体样品中的盐(1M)、还原剂(1%巯基乙醇或DTT)、去垢剂(5%SDS、1% Triton X-100、1% NP-40)和油脂等。
6. 操作方便迅速，只需要混匀后离心，不需要其他仪器。
7.产品稳定，可室温长期放置。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	0.5ml
溶液B	1ml
溶液C	50ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

使用方法：

使用方法一(用于不含SDS的液体样品，但样品蛋白浓度不能低于1μg/mL)
1．将100μL需要液体蛋白样品转移到一个自备的1.5mL塑料离心管中。
2．加入10μL溶液A，涡旋激烈震荡10-30秒混匀。
3．冰上放置15分钟。
4．加入10μL溶液B，轻轻混匀。
5．冰上放置60分钟。
6．4℃12000～15000×g离心10分钟。
7．小心移弃上清液，保留蛋白沉淀。
8．加入1mL 冰浴的溶液C，震荡混匀后4℃12000～15000×g离心15分钟。
9．小心移弃上清液，保留蛋白沉淀。
10．短暂离心，小心移弃残留上清液后，将有蛋白沉淀的离心管敞开放置在冰上，空气晾干。一般需要10分钟左右。
11．样品放4℃保存或立即电泳检测。可直接用1×SDS-PAGE上样液或其他电泳缓冲液溶解蛋白沉淀，取适量上样。如果蓝色的*酚蓝染料变黄，则说明有残留酸性物质污染，必须加少量自备的1M Tris-HCl(pH8.8)缓冲液，直到颜色变成蓝色为止，否则将影响电泳结果。

使用方法二(用于含SDS的液体蛋白样品，但样品蛋白浓度不能低于5μg/mL)
1．将200μl液体蛋白样品转移到一个自备的1.5mL塑料离心管中。
2．加入8μl溶液B，涡旋激烈震荡10-30秒混匀。
3．冰上放置30分钟或-20℃放置15分钟(过夜放置更好)。
4．4℃ 12000～15000×g离心15分钟。
5．小心移弃上清液，保留蛋白沉淀。
6．加入1mL 冰浴的溶液C，震荡混匀后4℃ 12000～15000×g离心15分钟。
7．小心移弃上清液，保留蛋白沉淀。
8．短暂离心，小心移弃残留上清液后，将有蛋白沉淀的离心管敞开放置在冰上，空气晾干。一般需要10分钟左右。
9．样品放4℃保存或立即电泳检测。可直接用1×SDS-PAGE上样液或其他电泳缓冲液溶解蛋白沉淀，取适量上样。如果蓝色的*酚蓝染料变黄，则说明有残留酸性物质污染，必须加少量自备的1M Tris-HCl(pH8.8)缓冲液，直到颜色变成蓝色为止，否则将影响电泳结果。

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