北京现货核酸内切酶V特价优惠

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百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货核酸内切酶V特价优惠，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京现货核酸内切酶V特价优惠
规格：250U
英文名：Endonuclease V
产地：国产|进口
核酸内切酶V是在E.coli中发现的一种DNA修复酶。它识别DNA中的脱氧次黄嘌呤核苷，即脱氧腺苷的去*基产物。核酸内切酶V，也称为脱氧次黄嘌呤核苷3´内切酶，识别含脱氧次黄嘌呤核苷(无论配对与否)的双链或单链DNA 。也可识别含脱碱基(AP)位点或尿素、碱基错配、插入/缺失错配、发夹结构、未配对loop环、折叠flaps和类 -Y型结构的DNA，但是识别后者的能力不如前者。普遍认为核酸内切酶V发挥DNA修复功能时，还需另外一种蛋白的存在，因为它不能切除 DNA上的脱氧次黄苷或受损碱基。核酸内切酶V对错配脱氧次黄嘌呤核苷3´端第二个或第三个磷酸二酯键进行切割，切割第二个磷酸二酯键的效率是95%，第三个磷酸二酯键的效率是5%，产生一个3´羟基、5´磷酸的切刻。

产品特点：
➤ 切割错配；
➤ 切割含脱氧次黄嘌呤核苷的寡核苷酸，对含错配碱基的寡核苷酸亲和力较弱。

产品组成：

 

成分	规格
核酸内切酶V(10000 U/mL)	25μL
10×Buffer	1ml
使用手册	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

热失活：65℃，20分钟。

活性定义：1单位指在10μl反应体系中，37℃条件下1小时内，能够切割1pmol含单脱氧次黄嘌呤核苷位点的34bp寡核苷酸双链所需要的酶量。

脱氧次黄嘌呤核苷位点的制备：合成34bp寡核苷酸双链时，在其一条链的中间掺入脱氧次黄嘌呤核苷(dI)碱基。

更多有关北京现货核酸内切酶V特价优惠的价格及使用说明等，请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：

·甲基化PCR试剂盒2.0
编号：BTN130428
英文名称：Methylation-Specific PCR Kit 2.0
规格：150次
亚硫*(代"酸")*盐修饰DNA时要求DNA必须在单链状态，反应还必须在低温进行，常规的修饰试剂盒由于是在液相进行，要在低温下让DNA 不相互复性而保持单链状态非常棘手，所以常规修饰试剂盒的修饰效率一般都不高。此外，常规方法要切换反应液，有多次沉淀步骤，使得DNA的回收率一般都不超过50%。为克服这些缺点，本公司开发出了此升级产品。


产品特点：
1．用包埋的样品进行所有操作，免去所有沉淀和纯化步骤，极大简化了操作。
2．免去了DNA提取过程，所需实验材料比常规方法更少，最少几个细胞都可以，极大地节约了宝贵材料，尤其适用于珍稀材料。
3．包埋处理后，DNA在整个操作过程中都处于最适于修饰的单链状态，极大提高了修饰效率。
4．DNA 包埋于包埋块中，切换反应液非常方便，而且DNA 不会丢失，所以最终回收率都在90%以上。
5．适用于实体材料、悬浮细胞和纯化好的DNA样品。
6．本试剂盒提供的甲基化修饰试剂盒足够制备150多个10μL包埋块(如果用纯化好的DNA)或25个10μL包埋块(如果用悬浮细胞)；本试剂盒提供的PCR试剂盒足够180次100μL体系的PCR反应。

试剂盒组成：
成分一：甲基化修饰试剂盒(BTN130301)

成分	规格
包埋液	1.5ml
分子生物学级石蜡油	25ml
包埋块裂解液	12.5ml
蛋白酶K溶液(10mg/mL)	150μl
溶液A	30ml
溶液B成分一	2.3 g×5棕色瓶
溶液B成分二	110mg×5棕色管
TE缓冲液，pH8.0	125ml
说明书	1份

注：包埋液用1.5mL旋盖离心管包装，溶液B成分一用5mL棕色瓶包装，溶液B成分二用1.5mL旋盖棕色管包装。
成分二：即用型PCR 3.0(BTN90805)

成分	规格
PCR MagicMix 3.0	9ml
专用染料	360μl
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存，保存期一年。但Proteinase K和即用型PCR Mix3.0 需要低温运输，-20℃保存。

使用方法：

一、准备试剂
1．在装有2.3g溶液B成分一干粉的瓶中加入3.9mL水和0.9mL溶液A，摇晃溶解得到4.8mL溶液B成分一。在装有110mg溶液B成分二干粉的离心管中加入1mL 50℃预热的超纯水，摇晃溶解，得到溶液B成分二。将0.6mL溶液B成分二加入到4.8mL溶液B成分一中，得到5.4mL溶液B，冰上放置待用。未用完的溶液B下次不得再使用。
2．每次实验前，将装有1.5mL 包埋液离心管在沸水浴上放置数分钟直到变成溶液，然后放80℃待用。

二、对微量组织材料(如果材料足够，可先纯化DNA，再按第三方案进行)
1．用常规的胰酶消化法处理动物实体组织或培养细胞，得到浓度不超过60细胞/μL的单细胞PBS 悬液。如果实验材料已经是单细胞悬浮液(如卵细胞)，则PBS 洗涤后直接离心沉淀，再重悬在PBS中(浓度不超过60细胞/μL)。注：本试剂盒不含本步所需相关试剂。
2．在一个2mL离心管中加入3μL细胞悬液，再迅速滴加7μL在80℃预热的包埋液。注：不需要吹打混匀以免混合液在抢头里面凝固。
3．加入500μL分子生物学级石蜡油，将离心管在沸冰浴中放置20分钟。
4．将离心管转移到冰上放置30分钟，低温下包埋液和细胞混合液将凝固成10μL的包埋块。
5．加入500μL 包埋块裂解液和5μL Proteinase K溶液，37℃保温过夜。加入的溶液比重都比石蜡油大，将会自动沉降到石蜡油下层，不需离心。
6．吸弃包埋块之外的所有溶液(包括石蜡油)，用1mL TE缓冲液室温浸泡包埋块2次，每次15分钟。此步可去除残留包埋块裂解液。
7．酶切包埋块中的DNA：选定不识别PCR靶片段的内切酶(本试剂不提供该相关试剂)，再用100μL选定内切酶的1×缓冲室温液浸泡包埋块15分钟，吸弃缓冲液后再加入100μL 选定内切酶的1×缓冲液和50U选定的内切酶，37℃保温2小时。
8．吸弃酶切反应液，再加入500μL 新鲜配制的处理液A(配制方法：100μL溶液A+400μL超纯水)室温放置15分钟，重复此步一次。此时DNA 将呈单链。
9．吸弃处理液A，用1mL新鲜配制的处理液B(配制方法：50μL溶液A+950μL超纯水)室温浸泡包埋块5分钟。
10．吸弃处理液B，加入750μL石蜡油，然后沸水浴20-30秒，使DNA单链彻底彼此分开。
11．奖离心管转移到冰上放置30分钟使包埋块重新凝固。
12．在离心管中加入1mL预冷的溶液B，溶液B将自动沉降到石蜡油下层。继续在冰上放置30分钟。此步用于修饰单链的DNA。
13．将离心管转移到50℃放置3.5小时。
14．吸弃溶液B，用1mL TE缓冲液常温洗涤包埋块2次，每次15分钟。
15．吸弃TE缓冲液，用500μL新鲜配制的处理液C(50μL溶液A+450μL超纯水)常温洗涤包埋块2次，每次15分钟。
16．吸弃处理液C，用1mL TE缓冲液常温洗涤包埋块3次，每次10分钟.
17．吸弃TE缓冲液，所得包埋块可以在4℃保存数月待用，也可以用超纯水洗涤两次(每次15分钟)后直接用做100μL体系甲基化PCR的模板。

三、对纯化好的DNA
18．选用不识别PCR 靶片段的合适内切酶酶切纯化的基因组DNA(本试剂不提供所需试剂)，总体积不超过20μL，基因组DNA 不超过700ng。
19．酶切结束后，沸水浴5-10分钟灭活内切酶并变性DNA。
20．冰上放置并短暂离心数秒后，再加入4μL溶液A，50℃保温15分钟。
21．迅速加入50μL在80℃预热的包埋液，用手指快速弹击管底混匀溶液并继续放80℃待用。不要吹打混匀以避免包埋液在移液枪头中凝固。
22．在一个新的、2mL离心管中，加入1mL预冷的溶液B，再加上750mL石蜡油，并将离心管放冰上预冷。
23．迅速取80℃保温的混合液10μL，用在空中滴加的方式加到上步准备的预冷的离心管中，滴加的混合液遇冷将迅速在石蜡油中形成包埋块并自动沉入管底。注意：不要将枪头浸入到预冷的溶液中，否则包埋液将迅速在枪头内凝固。如果包埋块没有沉到管底，可以用枪头将其拨到石蜡层下面的液相中。
24．再重复上步操作，共可以得到7个包埋块(约含100ng DNA)。
25．将离心管(含7个包埋块)继续放冰上30分钟进行修饰。
26．后续操作同第13-17步。

四、甲基化专一性PCR(由于包埋块可能会抑制PCR，所以最好使用100μL体系的PCR进行甲基化检查，如果效果不好，建议使用巢式PCR)
27．在一干净的PCR 管中，加入下列成分(冰上操作)：

成份	样品管	对照管
PCR MagicMix 3.0	50μl	50μl
DNA包埋块(修饰后DNA)	1块(约含100ng DNA)	无
对照DNA(修饰前DNA)	无	100ng
自备MSP引物F	25 pmol	无
自备MSP引物R	25 pmol	无
自备非甲基化PCR引物F	无	25 pmol
自备非甲基化PCR引物R	无	25 pmol
补水到	100μl	100μl

28．将混合物混匀，放入PCR仪中进行热启动PCR，结束后取5-10μL PCR产品直接进行琼脂糖电泳。


北京现货核酸内切酶V特价优惠关键词：Endonuclease V,核酸内切酶V,BTN130640


·SDS-PAGE样品预处理试剂盒
编号：BTN131074
英文名称：Sample Preparation Kit for SDS-PAGE
规格：50次
本产品为SDS-PAGE电泳样品制备专用试剂盒。

产品特点：
1．减少由于不兼容污染物造成的电泳假象，提供重复性好的SDS-PAGE 结果。
2．快速且容易使用的离心管形式(微量离心)。
3．在20分钟以内将稀释的蛋白溶液富集成六倍浓缩液。
4．无需透析即可去除染料、还原剂、去污剂、糖、甘油、胍、尿素及硫*(代"酸")铵。
5．对于大多数蛋白可以得到75-85%的蛋白回收率。
6．洗脱缓冲液与BCA蛋白定量分析试剂盒兼容，因此可以对处理过的样品进行定量。
7．最少可以处理2微升样品。

试剂盒组成：

成份	规格
PAGEprep树脂(浆状物，溶剂为DMSO)	1mL
PAGEprep洗脱缓冲液	5mL
DMSO	27mL
离心收集管-硝酸纤维素薄膜滤器	50个
收集管	72个
泳道指示剂，非还原性上样缓冲液(5X)	5mL
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。


北京现货核酸内切酶V特价优惠关键词：Endonuclease V,核酸内切酶V,BTN130640

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