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- Thermo Fisher
- EN0141
- 2025年12月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
充足
- 英文名：
Endonuclease V (5 U/μL)
- 保质期：
4年
- 供应商：
翌圣生物科技（上海）股份有限公司
- 保存条件：
-20度
- 规格：
询价
嗜热海栖热袍菌（T. maritima）内切核酸酶V（Endonuclease V，Endo V）是一种参与DNA修复的3'-内切核酸酶，识别含脱氧次黄嘌呤核苷（无论配对与否）的双链和单链 DNA，也可识别含脱碱基（AP）位点或尿素、碱基错配、插入/缺失错配、发夹结构、未配对 loop 环、折叠 flap 和类 Y 型结构的 DNA，但是识别后者的能力不如前者。当酶过量时，最初产生的单链缺口产物的互补链会发生第二次切割事件，从而导致双链断裂。然而，在低浓度下，内切核酸酶V首先会在更靠近DNA分子5'端的损伤处切割DNA单链。该酶活性需要镁离子（Mg²⁺）或锰离子（Mn²⁺）的参与。
产品信息
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货号 |
EN0141 |
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规格 |
5,000 U |
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酶活 |
5 U/μL |
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分子量 |
25 kDa |
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来源 |
大肠杆菌重组表达来源于Thermotoga maritima的nfi基因 |
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酶活定义 |
酶活力单位定义为：在 65°C条件下，30分钟内使1 μg脱嘌呤的超螺旋质粒DNA解旋。酶活性检测采用以下反应体系：25 mM HEPES-NaOH (pH 7.4), 5 mM MgCl2, 5 mM DTT, 2% (v/v) glycerol, 2 µg of depurinated pUC19 DNA |
组分信息
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组分名称 |
EN0141 |
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核酸内切酶V（海栖热袍菌）(5 U/μL) |
5,000 U |
*如需反应Buffer，可自行配置，配方如下10X Reaction Buffer：250 mM HEPES-NaOH (pH 7.4 at 25 °C), 50 mM MgCl2, 50 mM DTT, 20% (v/v) glycerol.
应用
1. 诱变与 DNA 修复研究。
2. 错配切割。
3. 基因分型
储存条件
-25~-15℃保存，有效期4年。
注意事项
1.本产品仅作科研用途。
2.为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
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文献和实验，或者与其他生物共生。人体是大量细菌的栖息地；可以在皮肤表面、肠道、口腔、鼻子和其他身体部位找到。据估计，人体内及表皮上的细菌细胞总数约是人体细胞总数的十倍。此外，也有部分种类分布在极端的环境中，例如温泉，甚至是放射性废弃物中，它们被归类为嗜极生物，其中最著名的种类之一是海栖热袍菌（Thermotoga maritima），科学家是在意大利的一座海底火山中发现这种细菌的。
DNA结合的引物长度足够的条件下，其5’端碱基可不与模板DNA互补而呈游离状态，因此可在引物5’端加上限制性内切酶位点、启动子序列或其它序列等以便于PCR产物的分析克隆等，引物的5’端最多可加10个碱基而对PCR反应无影响。 PCR反应系统总体积10 μl，模板DNA的量为植物总DNA 10 ng。 PCR反应体系(10 μl) 各对引物的复性温度不一样，用x代替。延伸时间用y代替，其中片断长度如果大于1kb，y为1.5 min；大于2kb，y为2.0 min；片断长度如果小于1kb，y
，调好水平。3．灌胶：(1)称取0.8克琼脂糖,加入80毫升TAE中,热浴溶解至透明(2)60℃左右加入EB100μl(终浓度0.5μg/ml),倒入备好的凝胶槽中。应注意胶面平整,无气泡(3)冷却后,拔去梳子4．加样:(1)去掉胶布，将灌好的胶板平放在电泳槽中(2)加入电极Buffer使之高出胶面(1-3毫米)(3)用进样器吸样品20μl加入样品槽中5．电泳: v = 100V,1-1.5小时,至溴酚蓝移出2/36．观察: (戴手套)紫外灯下（254-365nm）,暗处观察,记录。可见DNA橙红
