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- BTN130562-BXR
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- 2025年07月12日
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- 库存：
950
- 英文名：
E.coli Tuner(DE3) Chemical Competent Cell
- 保质期：
6个月
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-80℃
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")大肠杆菌Tuner(DE3)化学感受态细胞价格，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。
名称：大肠杆菌Tuner(DE3)化学感受态细胞价格
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
规格：0.1mL*10
英文名：E.coli Tuner(DE3) Chemical Competent Cell
Tuner(DE3)为常规表达宿主菌，用于一般蛋白表达，lac 透性酶突变，可以精细控制表达水平。无抗性。
基因型：F–omp T hsd SB(rB– m–)gal dcm lacY1(DE3)
储存条件：干冰运输，-80℃保存，有效期6个月。
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大肠杆菌Tuner(DE3)化学感受态细胞价格关键词：BTN130562,大肠杆菌Tuner(DE3)化学感受态细胞,E.coli Tuner(DE3) Chemical Competent Cell
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大肠杆菌Tuner(DE3)化学感受态细胞价格关键词：BTN130562,大肠杆菌Tuner(DE3)化学感受态细胞,E.coli Tuner(DE3) Chemical Competent Cell
·cDNA第二链合成试剂盒
编号：BTN131005
英文名称：Second Strand cDNA Synthesis Kit
规格：30次
cDNA第二链合成的原理是用RNase H使RNA-DNA杂合链中的RNA产生切口，再用DNA Polymerase I通过切口平移(nick translation)反应进行RNA链取代合成cDNA第二链。
产品特点：
1. 即开即用，含有合成cDNA第二链的所有试剂。
2. 所得双链cDNA可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR、cDNA文库构建、抑制性差减杂交等。
试剂盒组成：
| 成分 | 规格 |
| 5×cDNA第二链合成缓冲液 | 480μl |
| 20×cDNA第二链合成酶混合液 | 120μl |
| 0.2 M EDTA溶液 | 120μl |
| 超纯水 | 2ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。
使用方法：
一、合成cDNA第一条链
本试剂盒不提供cDNA第一链合成试剂，用户需自备相关试剂合成cDNA第一链。
二、合成cDNA第二链
1.在冰浴上向已经完成合成cDNA第一条链的反应体系中依次加入下表试剂：
| 成分 | 用量 |
| cDNA第一链合成反应液 | 10μl |
| 超纯水 | 48μl |
| cDNA第二链合成缓冲液 | 16μl |
| cDNA第二链合成酶混合液 | 4μl |
| 轻柔吹打混匀后，短暂离心，16℃保温2小时 | |
| 自备的T4 DNA聚合酶 | 2μl |
| 轻柔吹打混匀后，16℃继续保温30分钟 | |
| 0.2M EDTA溶液 | 4μl |
注：如果不需要将双链cDNA平末端化，则可以跳过T4 DNA聚合酶处理步骤。
2.电泳5μl检测cDNA质量。如果cDNA在0.5-10Kb的范围内呈模糊一片，则cDNA合格。如果没看见cDNA或有其他异常，需查找原因后再继续。
3. 所得cDNA可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR、cDNA文库构建、抑制性差减杂交等实验。
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒，更多试剂产品需求，欢迎来电咨询选购大肠杆菌Tuner(DE3)化学感受态细胞价格。
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文献和实验实验目的1.了解转化的概念及其在分子生物学研究中的意义。2.学习氯化钙法制备大肠杆菌感受态细胞的方法。3.学习将外源质粒 DNA 转入受体菌细胞并筛选转化体的方法。实验原理转化( Transformation )是将异源 DNA 分子引入另一细胞品系，使受体细胞获得新的遗传性状的一种手段，它是微生物遗传、分子遗传、基因工程等研究的基本实验技术。转化中的受体细胞： 转化过程所用的受体细胞一般是限制性修饰系统缺陷的变异株，即不含限制性内切酶和甲基化酶的突变株，常用 RM 符号表示。转化方法：电击
4．操作步骤 1）大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl2法) (1) 从新活化的E.coli DH5α菌平板上挑取一单菌落，接种于3～5ml LB液体培养中，37℃振荡培养12h左右，直至对数生长期。将该菌悬液以1:100～1:50转接于100ml LB液体培养基中，37℃振荡扩大培养，当培养液开始出现混浊后，每隔20～30min测一次OD600nm，至OD600nm≤0.5时停止培养；(2) 每组取培养液3个2ml转入2ml离心管中，在冰上冷却20-30min，于4℃，4000r／
酶和甲基化酶的突变体（Rˉ，Mˉ），它可以容忍外源DNA分子进入体内并稳定地遗传给后代。受体细胞经过一些特殊方法（如电击法，CaCl2，RbCl（KCl）等化学试剂法）的处理后，细胞膜的通透性发生了暂时性的改变，成为能允许外源DNA分子进入的感受态细胞（Compenent cells）。进入受体细胞的DNA分子通过复制，表达实现遗传信息的转移，使受体细胞出现新的遗传性状。将经过转化后的细胞在筛选培养基中培养，即可筛选出转化子（Transformant，即带有异源DNA分子的受体细胞）。目前常用的感受态细胞
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