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238
- 英文名:
E.coli BL21 (DE3)plysS Chemical Competent Cell
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半年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-80℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")大肠杆菌BL21(DE3)pLysS化学感受态细胞北京厂家,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:大肠杆菌BL21(DE3)pLysS化学感受态细胞北京厂家
编号:BTN90507
规格:0.1mL*10
英文名:E.coli BL21 (DE3)plysS Chemical Competent Cell
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
本产品是大肠杆菌BL21(DE3)plysS菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的热击转化。使用pUC19质粒检测本产品,转化效率可达107。该菌株带有质粒plysS,具有*霉素抗性,此质粒含有表达T7 溶菌酶的基因,T7 溶菌酶能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰IPTG 诱导的表达。本感受态细胞具有*霉素抗性,适合于毒性蛋白和非毒性蛋白的表达。
菌株基因型为:F- ompT hsdSB(rB-mB-)gal dcm(DE3)pLysS Camr
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
自备试剂:目的DNA、SOC或LB培养基等。
使用方法:
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL,根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA 所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB 固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。
注意事项:
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA 总量较少,可取200-300μL转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(4,000rpm,2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
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大肠杆菌BL21(DE3)pLysS化学感受态细胞北京厂家关键词:大肠杆菌BL21(DE3)pLysS化学感受态细胞,E.coli BL21 (DE3)plysS Chemical Competent Cell,BTN90507
·生物素标记dUTP溶液(Biotin-11-dUTP)
编号:BTN100920
英文名称:Biotin-dUTP Solution
规格:50μL
本产品是浓度为1mM的Biotin-11-dUTP。分子式:C28H41N6O17P3SNa3,分子量:927.6。分子结构式图如下:

Biotin-11-dUTP常用于PCR、缺口平移、cDNA合成、随机引物标记和引物延伸等方法标记DNA。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期两年。
·6nt随机引物(0.5 ug/uL)
编号:BTN100409
英文名称:Hexamer
规格:5μg
本产品为长度为6nt的随机引物,序列为5´-(NNNNNN)-3´,主要用于以任何RNA为模板合成cDNA,也可以用于DNA探针的随机引物标计。
储存条件:低温运输和-20℃保存,有效期一年。
疑难解答:
Q:在合成cDNA时,使用Oligo dT12-18和用随机引物有何区别?
A:只有当以带polyA尾巴的RNA作为模板才能使用Oligo dT作为引物,而任何RNA模板都可以使用随机引物。使用后者的序列覆盖率比使用Oligo dT更高。
·S1核酸酶
编号:BTN120407
英文名称:S1 Nuclease
规格:20000U
本产品从Aspergillus oryzae中纯化得到,是单链特异性的核酸内切酶,能将DNA或RNA降解成为酸可溶性5´-P核苷酸,也可以降解双链核酸中的单链部分。本产品可以除去DNA-DNA和DNA-RNA杂交体中的单链部分、可以将双链DNA末端平滑化和进行S1 mapping。本产品在0.4M NaCl,0.6% SDS和0.8M尿素中活性稳定,当反应液中含有40~50%甲醛时需将酶量增加10倍。本产品对热极其稳定,在底物存在下65~70℃仍能表现活性。
产品用途:
1.分子量为32000,且依赖Zn2+的糖蛋白质。
2.最适合的pH为4.5(CH3COONa缓冲液)。
3.必要的辅因子为Zn2+。
4.抑制剂为EDTA溶液(1~20mM)和磷酸盐。抑制剂磷酸盐分别是磷酸(2mM抑制活性50%)、焦磷酸盐(20μM抑制活性50%)、dAMP(85μM抑制活性50%)和dATP(1μM抑制活性50%)。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:(DNA单链部分的特异性分解)
1.将底物DNA与S1核酸酶以及S1核酸酶缓冲液混合,反应体系如下:
| DNA | 1μg |
| 10×S1核酸酶缓冲液 | 2μl |
| S1核酸酶(5U/μL) | 2μl |
| 超纯水 | up to 20μL |
2.将反应混合液置于23℃反应15分钟。
3.向反应液中加入2uL自备的0.5 M EDTA溶液,终止反应。
4.用自备的Klenow Fragment或T4 DNA Polymerase把反应液中的DNA片段修复成平滑末端。
大肠杆菌BL21(DE3)pLysS化学感受态细胞北京厂家关键词:大肠杆菌BL21(DE3)pLysS化学感受态细胞,E.coli BL21 (DE3)plysS Chemical Competent Cell,BTN90507
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