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206
- 英文名:
RNase Inhibitor
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货RNase抑制剂(国产,进口),我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京现货RNase抑制剂(国产,进口)
英文名:RNase Inhibitor
规格:2000U|5×2000U
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
本RNase抑制剂是一种大肠杆菌表达的重组蛋白,可以通过非竞争性方式按1:1比例和RNase A、RNase B或RNase C结合,并抑制这三种酶的活性,保护RNA不被这三种酶降解。但本RNase Inhibitor不能抑制RNase I、T1、T2、H、U1、U2和CL3的酶活性。本品浓度为40U/μl
对于cDNA合成、体外转录、体外翻译等常见的反应体系中,为保护其中的RNA不被RNase降解,RNase Inhibitor推荐用量为最终浓度1-2U/μl。
特点:不含DNA内切酶和外切酶,用于各种RNA相关反应,防止RNase的污染。
用途:用于cDNA合成,体外转录,体外翻译,以及mRNA-protein复合物分离纯化等过程中保护RNA不被降解;还可用于特定RNase活性的鉴定等。
来源:由大肠杆菌表达,表达基因的来源为人类胎盘中编码该酶的基因。
分子量:约49.6 kDa(单体)。
活性定义:将能够抑制5ng RNase A的50% 活性的酶量定义为一个活性单位。
活性检测条件:100mMTris-HCl (pH7.5),1.2mMEDTA,0.1mg/ml BSA,100ng/ml RNase A,0.1mg/ml E.coli [3H]-RNA,50mg/ml yeast RNA,8mMDTT。
纯度:不含DNA内切酶和外切酶,不含RNA酶。
储存溶液:20mM HEPES-NaOH (pH7.5),50mM NaCl,8mM DTT,0.5mM Detergent,50% (v/v) glycerol。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
北京现货RNase抑制剂(国产,进口)极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·10mM dNTP溶液
编号:RFT162
英文名称:dNTP Mixture(10mM)
规格:0.5ml|5×0.5ml
本品为dATP、dGTP、dCTP、dTTP的等摩尔(10mM)混合物。dNTP纯度均达到99%以上,不含DNase和RNase,适合多种聚合酶的扩增反应。在PCR反应中,10mM dNTP是50μl反应体系用1μl(终浓度为各200μM)。
储存条件:-20℃。
·植物RNA提取试剂
编号:RFT032
英文名称:Plant RNA Extraction Reagent
规格:100ml
本试剂可从植物组织,特别是富含多酚或淀粉的植物组织中(如马铃薯块茎,白松松针或嫩苗,和西红柿叶等)提取高纯度的总RNA。每100 ml可处理100 mg组织200次。
自备试剂:液氮,研钵,无RNase离心管,5 M NaCl(无RNase水配制),*仿,异丙醇,75%乙醇(无RNase水配制),无RNase水。
少量提取操作步骤(样品少于0.1 g):
1.取不多于0.1g植物组织,在液氮中研碎,转移到1.5 ml 离心管中,加0.5 ml提取试剂,振荡至彻底混匀。
注:振荡不要太剧烈,否则容易导致基因组DNA污染。
2.室温放置5分钟。
3.4℃条件下12000 rpm离心2-3分钟,上清转入新的无RNase离心管。
4.上清中加入0.1 ml5 MNaCl(无RNase水配制),温和混匀。
5.加入0.3 ml *仿,上下颠倒混匀。
6.4℃条件下12000 rpm离心10-15分钟,取上层水相转入新的无RNase离心管。
7.加与所得水相等体积的异丙醇,混匀,室温放置10分钟。
8.4℃条件下12000 rpm离心10-15分钟。弃掉上清,注意不要倒出沉淀。加1 ml 75%乙醇冲洗沉淀。(沉淀可能很难看见,应小心操作。)
9.4℃条件下5000-7000rpm离心3分钟。倒出液体,注意不要倒出沉淀。剩余的少量液体短暂离心,用枪头吸出,室温晾干1-2分钟至沉淀干燥。
10.加适量无RNase水充分溶解RNA,-70℃保存。
注意:本试剂有刺激性味道,操作时请在通风处进行。
储存条件:4℃,有效期6个月。
北京现货RNase抑制剂(国产,进口)关键词:RFT107,RNase Inhibitor,RNase抑制剂
3810-74-0 Streptomycin 硫*(代"酸")链霉素
鞘磷脂 Pyrazinecarboxamide 85187-10-6
PY02-221 改良酵母浸汁-孟加拉红肉汤 250克
F030710 BIOTIN标记羊抗乙肝表面抗原抗体 Polyclonal Goat Anti-HBsAg*BIOTIN
D-201高等级大孔强碱Ⅰ型阴离子交换树脂 T4 9050-97-9
BTN131208 DNA探针变性液 DNA Probe Denaturation Solution
ARB11212 人细胞色素P450c21A/21-羟化酶(CYP21A)血清中含量检测 Human cytochrome p450c21/21-hydroxylase,cyp21a ELISA KIT
软骨染色液(番红O法) 2×100ml
DEAE纤维素 Sodium phosphite dibasic pentahydrate 9013-34-7
919-30-2 3-*丙基三乙氧基硅烷
ARB10425 人布鲁氏杆菌IgG ELISA代测服务 Human brucella igg,IgG ELISA KIT
D-赖*酸 TG 923-27-3
ARB11796 人碱性胎儿蛋白(BFP)Elisa方法检测 Human basic fetoprotein,bfp ELISA KIT
PY08-004 巧克力琼脂平板 9CM 10皿/盒,用于淋病奈瑟球菌及其他奈瑟球菌的培养
BTN130575 小鼠抗c-Myc标签单抗 Anti c-Myc-Tag Mouse Mab
生物素酰肼 N-Acetyl-D-Proline 66640-86-6
ARB14191 山羊基质金属蛋白酶-2(MMP-2)含量检测
ARB13049 小鼠表皮生长因子(EGF)ELISA检测服务 Mouse epidermal growth factor,egf ELISA KIT
北京现货RNase抑制剂(国产,进口)关键词:RFT107,RNase Inhibitor,RNase抑制剂
·5×RNA上样液
编号:RFT189
英文名称:5×RNA loading buffer
规格:5×1ml
·λ噬菌体DNA
编号:RFT118
英文名称:Lambda bacteriophage DNA
规格:100μg
本品常用于限制性内切酶的底物。
长度:48502bp
纯度:A260/A280=1.8~2.0
浓度:0.4μg/μl
分子量:31.5×10^6Da
贮存溶液:10mM Tris-HCl pH8.0,1 mM EDTA
来源:Bacteriophage λcⅠ857 Sam7
储存条件:-20℃。
·SDS-PAGE凝胶制备及电泳试剂盒
编号:RFT076
英文名称:SDS-PAGE gel preparation and electrophoresis Kit
规格:50次
本公司提供的SDS-PAGE蛋白电泳试剂盒包含凝胶制备以及蛋白电泳所需的全部试剂。本试剂盒可配制至少50块常规大小的PAGE胶。
试剂盒组成:
| 组份 | 规格 | 保存条件 |
| 40%PAA(29:1) | 100 ml | 4℃ |
| 4×Tris/SDS分离胶缓冲液 pH8.8 | 100 ml | 4℃ |
| 4×Tris/SDS浓缩胶缓冲液 pH6.8 | 50 ml | 4℃ |
| APS(干粉) | 0.5 g | RT |
| TEMED | 0.5ml | 4℃,避光 |
| 4×蛋白电泳上样缓冲液(含还原剂) | 1 ml | -20℃ |
| 5×Tris-甘*酸电泳缓冲液(干粉) | 1 L | RT |
使用方法:
一、配制分离胶(各试剂使用量请参考表二)
根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度(表一),再按照下面的分离胶配方表(表二)配制SDS-PAGE的分离胶(即下层胶)。
表一:不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围:
| SDS-PAGE分离胶浓度 | 最佳分离范围 |
| 6% | 50-150kD |
| 8% | 30-90kD |
| 10% | 20-80kD |
| 12% | 12-60kD |
| 15% | 10-40kD |
配制分离胶前,根据以下配方准备10% APS:
10% APS配制-5 ml:将0.5 gAPS干粉溶于5 ml灭菌水中,彻底溶解后分装,1 ml/支,-20℃备存,每次取一管使用。10% APS应尽量减少室温存放时间,以防失效。10%APS在4℃有效期为一周,-20℃有效期6个月。若发现凝胶聚合时间延长,应考虑更换使用-20度保存的10%APS。
制备分离胶步骤:
1、参照凝胶模具说明书,装配好凝胶模具。
2、按照表二将不同体积的成分在小烧杯或试管中混合;加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
3、在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液(对于mini-gel,凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5 cm或距梳齿约0.5 cm即可),然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-5 cm的水层,使凝胶表面保持平整。
4、静置30-60分钟,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后,说明凝胶已聚合
表二:SDS-PAGE分离胶配方表
| 组份 | 不同凝胶体积对应各组份的取样量(ml) | |||
| 5ml | 10ml | 15ml | 20ml | |
| 8%胶 | ||||
| H2O | 2.7 | 5.4 | 8.1 | 10.8 |
| 4×Tris/SDS分离胶buffer pH8.8 | 1.25 | 2.5 | 3.75 | 5 |
| 40% PAA(29:1) | 1 | 2 | 3 | 4 |
| TEMED | 0.005 | 0.01 | 0.015 | 0.02 |
| 10% APS | 0.05 | 0.1 | 0.15 | 0.2 |
| 10%胶 | ||||
| H2O | 2.45 | 4.9 | 7.35 | 9.8 |
| 4×Tris/SDS分离胶buffer pH8.8 | 1.25 | 2.5 | 3.75 | 5 |
| 40% PAA(29:1) | 1.25 | 2.5 | 3.75 | 5 |
| TEMED | 0.005 | 0.01 | 0.015 | 0.02 |
| 10% APS | 0.05 | 0.1 | 0.15 | 0.2 |
| 12%胶 | ||||
| H2O | 2.2 | 4.4 | 6.6 | 8.8 |
| 4×Tris/SDS分离胶buffer pH8.8 | 1.25 | 2.5 | 3.75 | 5 |
| 40% PAA(29:1) | 1.5 | 3 | 4.5 | 6 |
| TEMED | 0.005 | 0.01 | 0.015 | 0.02 |
| 10% APS | 0.05 | 0.1 | 0.15 | 0.2 |
| 15%胶 | ||||
| H2O | 1.825 | 3.65 | 5.475 | 7.3 |
| 4×Tris/SDS分离胶buffer pH8.8 | 1.25 | 2.5 | 3.75 | 5 |
| 40% PAA(29:1) | 1.875 | 3.75 | 5.625 | 7.5 |
| TEMED | 0.005 | 0.01 | 0.015 | 0.02 |
| 10% APS | 0.05 | 0.1 | 0.15 | 0.2 |
二、浓缩胶制备:
1、去除覆盖在分离胶上的水层。
2、按照表三将不同体积成分在一个小烧杯或试管中混合;加入10%过硫*(代"酸")铵和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
3、将浓缩胶溶液加至分离胶的上面,直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
4、将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。
5、静置30-60分钟,等待浓缩胶聚合。
表三:SDS-PAGE浓缩胶(4%)配方表
| 组份 | 不同凝胶体积对应各组份的取样量(ml) | |||
| 2 ml | 4 ml | 5 ml | 10 ml | |
| H2O | 1.17 | 2.34 | 2.925 | 5.85 |
| 4×Tris/SDS浓缩胶buffer pH6.8 | 0.63 | 1.26 | 1.575 | 3.15 |
| 40% PAA(29:1) | 0.2 | 0.4 | 0.5 | 1 |
| TEMED | 0.002 | 0.004 | 0.005 | 0.01 |
| 10% APS | 0.02 | 0.04 | 0.05 | 0.1 |
三、电泳:
凝胶凝固好后,根据以下配方准备电泳缓冲液。
5×Tris-甘*酸电泳缓冲液的配制-1 L:将一包5×Tris-甘*酸电泳缓冲液干粉全部倒入1L烧杯中,加入约900 ml水彻底溶解,用水定容至1 L,即配成5×Tris-甘*酸电泳缓冲液(此溶液不用调节pH值)。用前再稀释5倍即配成1×Tris-甘*酸电泳缓冲液。在电泳槽的内槽内加入1×Tris-甘*酸电泳缓冲液(让电泳缓冲液漫过加样孔),轻轻的拨出梳子,随后在电泳槽外槽加入适量的1×Tris-甘*酸电泳缓冲液。上样,电泳,一般是浓缩胶80V,分离胶120V恒压,等指示前沿*酚兰电泳到分离胶下缘后,结束电泳,染色或者进行下一步实验。
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购北京现货RNase抑制剂(国产,进口)。
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