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285
- 英文名:
RNase Inhibitor
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
阴凉干燥
- 规格:
3000U
特别提示:包括RNA酶抑制剂(40U/μl)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:RNA酶抑制剂(40U/μl)
英文名称:RNase Inhibitor
产品货号:JN0013
产品规格:3000U
本制品是经过大肠杆菌表达的重组蛋白,与RNase A形成1:1复合体,对RNase 表现高度的非竞争性抑制。该酶的特征与猪肝和人胎盘来源的此类酶相似。该反应是可逆的,通过尿素及巯基类试剂能够解离复合体,使RNase复性而抑制剂不可逆失活。使用时可直接加入含有RNA的反应液中。本品属蛋白质性质,与其它竞争性抑制剂(核酸类、无机磷酸类)不同,可以很容易地通过běn酚处理将其从反应体系中除去。但不能抑制反转录酶的RNase H的活性。本品具有与猪肝和人胎盘来源的酶相同的应用。
产品用途:
1、cDNA合成反应(RNase Inhibitor,反应量0.5 units/μl)
2、体外翻译(RNase Inhibitor,反应量1 unit/μl)。
3、多核糖体分离(RNase Inhibitor,反应量1 unit/μl)。
4、体外无细胞系统转录(RNase Inhibitor,反应量20 units/μl)。
5、SP6或T7 RNA聚合酶的体外转录(RNase Inhibitor,反应量1 unit/μl)。
使用建议:
1、抑制RNase活性的pH值范围较广,在pH7~8时表现最适范围。
2、RNase Inhibitor发挥活性作用需要至少1 mM的DTT。
质量保证:经多次柱纯化,SDS-PAGE检测纯度大于95%;PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,无核酸内、外切酶污染。
活性定义:抑制5 ng RNase A活性的50%所需要的酶量定义为1个活性单位(U)(抑制活性通过抑制RNase A水解Cyclic2′,3′-CMP的能力确定)。
我公司销售的RNA酶抑制剂(40U/μl)北京厂家,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验时可考虑100-400bp长。最好采用巢式PCR,即先扩增出一较长的片段,再以该片段为模板扩增出较短的片段,以保证探针的特异性。 (2)PCR:先用上游引物和下游引物Ⅰ进行PCR,再以PCR 产物为模板,用上游引物和下游引物Ⅱ-T7进行二次PCR。 (3)探针合成标记与纯化 在0.5ml 离心管中加入下列试剂: RNasin (40 U/μl) 0.5 μl GACU POOL GAC (含GTP、CTP、ATP各2.75 mM,UTP 61 μM) 2 μl [α-32
列为:5’-TAATACGACTCACTATAGGG 引物设计的其他要求与一般PCR引物的设计相同。PCR产物的长度决定了反义RNA探针的长度,具体设计时可考虑100-400bp长。最好采用巢式PCR,即先扩增出一较长的片段,再以该片段为模板扩增出较短的片段,以保证探针的特异性。 ② PCR 先用上游引物和下游引物Ⅰ进行PCR,再以PCR 产物为模板,用上游引物和下游引物Ⅱ-T7进行二次PCR(具体操作参见PCR章节)。 ③ 探针合成标记与纯化 在0.5ml 离心管中加入下列试剂: RNasin (40U/μl
生成因子, 几个厂家以不同的商品名出售这种抑制剂,该蛋白质应置于含5mmol/L二硫苏糖醇(DTT)的50%甘油中,贮存于-20℃。抑制剂制品冻融数次后或放置在氧化条件下即应弃之不用,因为上述处理会使蛋白质变性从而释放出所结合的RNA酶。因此,在使用变性剂裂解哺乳动物细胞这一提取RNA的初始步聚中不应使用这种蛋白抑制剂。然而职用更温和的裂解方法时应使用这种抑制剂,并且在后续的所有RNA纯化步骤中均应有此蛋白质存在。由于酚抽提可以除蛋白质抑制剂,故应在纯化过程中补加几次抑制剂。其最大活性的发挥要求巯基
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