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936
- 英文名:
Rnasin
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖北京现货RNA酶抑制剂(国产,进口)在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:北京现货RNA酶抑制剂(国产,进口)
编号:WE0223
规格:30μl(1200U)
英文名:Rnasin
品牌:百奥莱博
产地:北京
本品为从人胎盘中提取得到,分子量约50 KDa的广谱型RNase抑制剂。RNasin能够特异地与RNase以非共价键结合形成复合体从而使RNase失活,而不抑制RNase H、S1核酸酶、SP6、T7或T3 RNA 聚合酶、AMV或M-MLV反转录酶、Taq DNA聚合酶、RNaseT1等酶的活性,不影响后续的反转录及翻译过程。广泛的应用于RNA方面的研究,如RT-PCR,cDNA合成,mRNA的保护,体外转录和体外翻译,制备RNase-Free的抗体,原位杂交和mRNA定位等。
储存缓冲液:HEPES-KOH(pH7.6)20 mM, KCl 50 mM, DTT 8mM , Glycerol 50%。
活性定义:1个活性单位(U)指抑制50%5ng RNAse A中的苷2",3"-环磷酸发生水解所用的酶量。
主要用途:cDNA合成、体外翻译、体外转录、RNA 扩增、RNA纯化和储存。
纯度:
1、300 U的Rnasin和1μg的λ DNA-Hind Ⅲ分解物在37℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
2、300 U的 Rnasin 和1μg的超螺旋pBR322 DNA在37℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
3、100 U的Rnasin 和1μg的16 S,23S rRNA在37℃下反应1小时,RNA的电泳谱带不发生变化。
4、SDS-PAGE:在分子量50 KDa处是单一带。
注意事项:
1、本产品避免反复冻融,长期储存请与-70℃存放。
2、建议使用终浓度为1 U/μl。
储存条件:-20℃
欲咨询购买北京现货RNA酶抑制剂(国产,进口),请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
·柱式中量血液基因组DNA提取试剂盒(1~5ml)
编号:WE0177
英文名称:Blood Genomic DNA Midi Extraction Kit(1-5ml)
规格:50次
本试剂盒适用于从新鲜或冷冻全血(用柠檬酸盐、EDTA或肝素等抗凝剂处理过的血液样品)、血浆、血清、血沉棕黄层、骨髓、无细胞体液等样本中提取总DNA,包括基因组DNA,线粒体DNA及病毒DNA。本品采用柱式提取方法,可以处理1-5ml的全血,可纯化获得大小为100bp到50kb的DNA,纯化的DNA产量高、质量好,最大限度去除蛋白、色素、脂类及其他抑制性杂质污染,可直接用于PCR、荧光定量PCR、酶切和Southern Blot等实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 |
| Buffer RCL | 3×260ml |
| Buffer GR | 25ml |
| Buffer GL | 25ml |
| Buffer GW1(浓缩液) | 13ml |
| Buffer GW2(浓缩液) | 15ml |
| Buffer GE | 15ml |
| 蛋白酶K | 50 mg |
| 蛋白酶K 储存液 | 5ml |
| 吸附柱DL及收集管 | 50套 |
保存条件:Buffer RCL 2~8℃,其他组分室温(15~30℃)
自备试剂:无水乙醇。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、向蛋白酶K 中加入5ml 蛋白酶K 储存液使其溶解,-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置,避免反复冻融,以免影响其活性。
2、样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。
3、本试剂盒最多可以提取1-5ml全血样品,如需提取大量血液样本请选用血液基因组非柱式提取试剂盒(#WE0176)。
4、第一次使用前应按试剂瓶标签说明先在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
5、使用前请检查Buffer GL是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请置于56℃水浴重新溶解。
6、如下游实验对RNA污染较敏感,可加入4μl DNase Free的RNase A(100 mg/ml),RNase A本试剂盒并未提供,如需要可单独向本公司订购,货号:WE0225S。
7、试剂盒中的Buffer RCL浑浊后不能继续使用。
操作步骤:
1、向离心管(自备)中加入1-5ml血液样品,加入3倍体积的Buffer RCL轻轻涡旋或颠倒混匀。
2、3000 rpm(~900×g)离心10分钟,小心吸弃上清。
3、向沉淀中加入400μl Buffer GR,重悬沉淀。
注意:如果下游试验对RNA敏感,可加入4μl RNase A(100 mg/ml)溶液,震荡15秒,室温放置5分钟。
4、1-2ml血液样本提取时,向以上溶液中加入40μl 蛋白酶K ,混匀;2-5ml血液样本提取时,向以上溶液中加入100μl 蛋白酶K ,混匀。
5、加入400μl Buffer GL,颠倒混匀15次,剧烈涡旋震荡至少1分钟。
注意:不要直接将蛋白酶K 直接加入到Buffer GL中。
6、70℃孵育10分钟,其间颠倒混匀数次。
注意:
1)如溶液未彻底清亮,补加适量蛋白酶K ,孵育。延长孵育时间至溶液完全清亮为止。
2)孵育10分钟DNA的产量已经达到最大,继续延长孵育时间对DNA产量和纯度没有影响。
7、加入400μl无水乙醇,颠倒混匀10次。短暂离心,使管壁和管盖上液体集中到管底。
8、将上步所得到的溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱DL中,若一次不能加完溶液,可分多次转入。12000rpm(~~13400×g)离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
9、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
注意:如果提取样品是小鼠或猴子等血红素难以除去的种属的血液基因组,建议重复步骤9。
10、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
注意:如需进一步提高DNA纯度,可重复步骤10。
11、12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR 等)。
12、将吸附柱置于一个新的离心管中,向吸附柱中间部位悬空加入50-200μl Buffer GE或灭菌水,室温下放置2-5分钟,12000rpm离心1分钟,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。
注意:
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感,可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响,若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围),pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。
3)用另外的50-200μl Buffer GE或灭菌水再次洗脱可以增加产量。
4)如果要提高DNA的终浓度,可以将步骤12所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上,12000rpm离心1min;若洗脱体积小于200μl,可以增加DNA的终浓度,但可能会减少总产量。如果DNA的量小于1μg,推荐用50μl Buffer GE或灭菌水洗脱。
5)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响,如需长期保存,推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。
储存条件:室温(15~30℃)。
北京现货RNA酶抑制剂(国产,进口)关键词:Rnasin,WE0223,RNA酶抑制剂
YT929 微管聚合抑制剂(CYT997) Lexibulin
HR0155 组织线粒体/胞浆蛋白提取试剂盒 Tissue mitochondria/cytoplasmic protein extraction kit
KFS311 DAF-FM DA(NO荧光探针)
SV0084 BamHI限制性内切酶 BamHI Restriction Endonuclease
SY0337 过硫*(代"酸")铵 Ammonium persulfate (APS)
BTN70503T DNA marker(250-15000bp) DNA ladder(250-15000bp)
YT027 基因定点突变试剂盒 Site-directed Gene Mutagenesis Kit
SV0989 dNTP 混合液
BTN80103 柱式细菌RNA提取试剂盒 Bacterial RNA Column extraction kit
BTN80816 超敏型BCA法蛋白定量试剂盒 Hypersensitive BCA Protein Assay Kit
YT379 PCR试剂盒(含Taq酶,Buffer,dNTP,上样液) PCR Kit with Taq
SV1639 SNAP-Cell 505-Star
KFS065 一抗稀释液(Western Blot) Western Blot Primary Antibody Dilution Buffer
BTN131290 PLPD固定液 PLPD Fixative Solution
SY0090 C/EBPa--Luc荧光素酶报告基因质粒 C/EBPa luciferase reporter plasmid
HR0355 HRP酶稳定剂 HRP enzyme stabilizer
WE0119 结核分枝杆菌基因分型试剂盒(HV-3) TB Typing Kit(HV-3)
SV0355 EcoRV限制性内切酶 EcoRV Restriction Endonuclease
SY0451 牛血清白蛋白(标准级别) BSA, Standard Grade
KFS212 细胞凋亡线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1) JC-1 Apoptosis Detection Kit
北京现货RNA酶抑制剂(国产,进口)关键词:Rnasin,WE0223,RNA酶抑制剂
BTN70901 柱式真菌DNA提取试剂盒 Fungus DNA Column extraction kit
BTN131115 OPD干粉 o-phenylenediamine dihydrochloride
YT538 乙醇脱*酶 Alcohol Dehydrogenase (Crude Enzyme)
ALH093 高纯酵母质粒大量提取试剂盒 Yeast high purity plasmid rapid extraction kit (centrifugal column)
BTN140383 农杆菌EHA105化学感受态细胞 E.coli EHA105 Chemical Competent Cell
RFT028 高纯度质粒提取试剂盒 High purity Plasmid Extraction Kit
SY0194 TCF/LEF1-GFP报告基因质粒 TCF/LEF1 GFP Reporter Plasmid
HR0524 10X PBS缓冲液(pH7.4) PBS 10X buffer (pH7.4)
BTN130857 T4 RNA连接酶2(截短型K227Q) T4 RNA Ligase 2(truncated K227Q)
SV0666 SalI-HF RE-Mix限制性内切酶 SalI-HF RE-Mix Restriction Endonuclease
SY0558 活细胞示踪剂CMFDA(绿色) CellTracker Green CMFDA (5-Chloromethylfluorescein Diacetate)
KFS316 MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒 MTT cell proliferation and Cytotoxicity Detection Kit
YT234 OCT-1凝胶迁移探针(10μM) OCT-1 Probe For EMSA(10μM)
SV1439 PURExpress Δ Ribosome 试剂盒
BTN90602C DNA marker(pUC19/MspI) DNA ladder(pUC19/MspI)
YT032 化学发光法生物素标记核酸检测试剂盒 Chemiluminescent Biotin-labeled Nucleic Acid Detection Kit
YT887 YT?免疫染色一抗稀释液 YT? Primary Antibody Dilution Buffer for Immunol Staining
HR0077 白细胞蛋白提取试剂盒 White cell protein extraction kit
BTN90610 卵白蛋白标准品(2mg/mL) Ovalbumin Standard
YT386 dCTP溶液(100mM) dCTP Solution
SY0298 BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型) BCA Protein Quantification Kit
KFS070 10×WB洗涤液(TBS) Western Blot Wash Buffer(10×) in TBS
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文献和实验1、焦磷酸二乙酯(DEPC):是一种强烈但不彻底的RNA酶抑制剂,他通过和RNA酶的活性基因团组氨酸的咪唑环结合使蛋白质变性,从而抑制酶的活性。 2、异硫氰酸胍:目前认为是最有效的RNA酶抑制剂,它在裂解组织的同时也使RNA酶失活,它既可破坏细胞结构使核酸从核蛋白中解离出来,又对RNA酶有强烈的变性作用。 3、氧钒核糖核苷复合物:由氧化钒离子和核苷形成的复合物,它和RNA酶结合
国产新冠药物登顶 NEJM,疗效不输 Paxlovid,且不良事件更少
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