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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
444
- 英文名:
High purity Plasmid Extraction Kit
- 保质期:
12个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
室温
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖RFT028型高纯度质粒提取试剂盒哪里卖在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:RFT028型高纯度质粒提取试剂盒哪里卖
品牌:百奥莱博
英文名:High purity Plasmid Extraction Kit
编号:RFT028
本试剂盒采用经典的碱裂解法裂解细菌,再通过离心吸附柱在高盐状态下特异性地结合DNA的特性,可以从1–5ml大肠杆菌LB培养液中快速提取3–20μg纯净的高拷贝质粒DNA。提取的质粒可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、连接和转化等实验。然而,对质粒纯度要求更高的转染实验(要求无内毒素),此试剂盒不能达到要求。另外,尽管该试剂盒可以抽提较大的质粒(>10kb),但我们不推荐使用。如果一定要使用,请参考以下方法:加大菌体使用量(使用5–10 ml过夜培养物),同时按照比例增加P1、P2、P3的用量;洗脱缓冲液应在70℃预热,在吸附和洗脱时可以适当的延长时间,以增加提取效率,其它步骤相同。
本试剂盒使用了有颜裂解液,菌体裂解是否完全一目了然。由于判断菌体裂解和中和是否彻底更主要取决于操作者的经验,所以我们增加了有颜裂解液(一种能使裂解/中和体系变换颜色的试剂)来帮助观察裂解/中和的程度。加入P1后,有颜裂解液使菌液变为浑浊的红色;加入P2后,有颜裂解液立即使溶液变为澄清的红色,裂解是否完全只要观察红色溶液是否澄清,如果红色非常均一,表明裂解充分;在完全裂解的体系中加入P3混匀后,体系立即变为黄色,任何红色的残留表明没有完全混匀或者中和不彻底。
本试剂盒增加了去蛋白液PD,能更加彻底地去除蛋白污染,得到纯度更高的质粒。
试剂盒组份:
| 试剂盒组成 | 100次 | 200次 | 贮存方式 |
| RNase A | 300μl | 600μl | -20℃ |
| 有颜裂解液 | 600μl | 2×600μl | 室温 |
| 溶液P1 | 30 ml | 60 ml | 室温(加入RNase A后2-8℃保存) |
| 溶液P2 | 30 ml | 60 ml | 室温 |
| 溶液P3 | 40 ml | 80 ml | 室温 |
| 去蛋白液PD | 60 ml | 120 ml | 室温 |
| 漂洗液PW | 25 ml | 2×25 ml | 室温 |
| 洗脱缓冲液EB | 15 ml | 15 ml | 室温 |
| 质粒吸附柱CP | 100个 | 2×100个 | 室温 |
| 收集管(2 ml) | 100个 | 2×100个 | 室温 |
| 说明书 | 1份 | 1份 |
储存条件:室温,有效期12个月。
关于RFT028型高纯度质粒提取试剂盒哪里卖的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
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RFT028型高纯度质粒提取试剂盒哪里卖关键词:高纯度质粒提取试剂盒,RFT028,High purity Plasmid Extraction Kit
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·考马斯亮蓝快速染色液
编号:RFT054
英文名称:Commassie Blue Fast Staining Solution
规格:500ml
本考马斯亮蓝快速染色液是以考马斯亮蓝G-250为主要成分,采用新配方配置而成。可用于SDS-PAGE或非变性PAGE胶(native gel)的快速染色。由于配方中不含甲醇、乙酸等物质,因此在整个染色过程中清洁、安全,并且用水即可脱色。整个染色脱色过程只需30分钟左右即可得到清晰可见的结果,灵敏度高,可见10ng蛋白带。
用前必读:
1、使用前如发现瓶中有少许沉淀,请混匀后使用。
2、以下“使用方法”是针对0.75mm厚度,10×10cm凝胶染色程序。
使用方法:
1、漂洗:
将电泳后的PAGE胶取下放入微波炉专用塑料容器中,加入适量超纯水(以刚刚覆盖过胶面为适),微波炉中高火(700-800瓦)加热,至溶液沸腾后继续煮沸1-2分钟;取出容器均匀摇动数下;重复上述步骤2-3次;弃尽水溶液。
2、染色:
加入适量染色液(用量根据凝胶面积的大小及容器大小而定,以浸没胶面为准),放入微波炉中高火(700-800瓦)加热,溶液沸腾后继续煮沸1-2分钟;取出容器均匀摇动数下;重复上述步骤数次,直至蛋白条带清晰可见时即可停止加热;弃去染色液(收集到备用容器中,可以反复利用1-2次)。
注:
a.此步骤是染色的关键步骤,染色停止的标准是-条带清晰可见。如由于挥发导致染色液减少,可适当补加染色液。
b.如使用1.0mm或更厚的凝胶,染色煮沸时间会相应延长。
3、脱色:
加入适量超纯水(以刚刚覆盖过胶面为适),放入微波炉中高火(700-800瓦)加热,至溶液沸腾后继续煮沸1-2分钟;取出容器均匀摇动数下;重复上述步骤1-2次,此时PAGE胶的蓝色背景应已去除。
4、保存:
弃去水溶液,加入适量超纯水,观察和保存染色结果。
注意事项:
1、使用方法中的各种参数仅针对面积8×10cm或10×10cm,厚度0.75mm的凝胶,如果使用更大面积或更厚的凝胶,请加入更多的染色液并延长各步骤的时间。
2、对于SDS-PAGE胶,步骤1的漂洗非常重要,因为残余的SDS会严重影响后续的染色;而对于不含SDS的非变性胶的染色,可以省略步骤1。
3、本染色液可以重复利用1-2次,敏感性没有明显下降。
4、本染色液有轻微腐蚀性,请带手套操作。
储存条件:室温,有效期2年。
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文献和实验00501101 1、nf-kb荧光素酶报告基因nf-kb质粒有卖的没?哪家公司啊?或者,请教怎么构建啊,有步骤没,我对构建是一点也不懂,着急啊。 2、EMSA:我准备定Pierce公司的核蛋白提取试剂盒、化学发光EMSA试剂盒、NF-kB的探针。但是Pierce公司的尼龙膜要2800,也太贵了吧,有没有便宜点的可以做出结果来的尼龙膜哪个公司可以买,或者卖单张的。 erik nf-kb荧光素酶报告基因nf-kb质粒
的时间和精力,最后因为试剂盒的问题影响实验的进度有点得不偿失,而且脂质体都比较贵。因此,性价比是最重要的因素。大部分的质粒提取试剂盒所得产物可分为如下几个级别:1.高级转染级:这是最高纯度的去内毒素的质粒纯化,主要使用于基因治疗,cell显微注射,原代细胞转染等。2.常规转染级:它要优于2次cscl超速离心纯化的质粒。3.分子生物学级,相当于1次cscl超速离心纯化的质粒。4.测序级:主要用于常规酶切与连接用。我们实验室用过qiagene,axgene,omiga和国产天根的。大家对qiagene
有浪费的嫌疑(当然经费充足无可厚非)。但是有些国产的试剂盒不怎么令然放心,象楼主这样做稳定转染 的,要花费很多的时间和精力,最后因为试剂盒的问题影响实验的进度有点得不偿失,而且脂质体都比较贵。因此,性价比是最重要的因素。大部分的质粒提取试剂盒所得产物可分为如下几个级别: 1.高级转染 级:这是最高纯度的去内毒素的质粒纯化,主要使用于基因治疗,cell显微注射,原代细胞转染等。 2.常规转染 级:它要优于2次cscl超速离心纯化的质粒。 3.分子 生物
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