IPTG溶液(50mg/ml)北京厂家现货

IPTG溶液(50mg/ml)北京厂家现货

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  • ¥100 - 1820
  • 百奥莱博
  • WE0219-ZKT
  • 北京
  • 2025年07月02日
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      206

    • 英文名

      IPTG Solution(50mg/ml)

    • 保质期

      长期

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      冷藏

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    IPTG溶液(50mg/ml)北京厂家现货是高品质的分子生物学试剂产品,由北京百奥莱博供应,用于生化研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多IPTG溶液(50mg/ml)等分子生物学试剂产品请联*(代"系")我司咨询订购。


    名称:IPTG溶液(50mg/ml)北京厂家现货
    品牌:百奥莱博
    规格:5ml
    编号:WE0219
    英文名:IPTG Solution(50mg/ml)
    产地:国产|进口

    欲了解更多IPTG溶液(50mg/ml)北京厂家现货的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:

    ·新型固定组织基因组DNA提取试剂盒
    编号:WE0172
    英文名称:NewPurify FFPE DNA Extraction kit
    规格:50次
      本试剂盒适用于从福尔马林固定、石蜡包埋组织中有效纯化基因组DNA。本品使用专门优化脱蜡剂和裂解液,释放福尔马林固定或组织切片样本中的DNA,不涉及有机试剂二甲*,无需过夜操作;消化后的样品在较高的温度孵育后,去除游离DNA的福尔马林交联,有效提高DNA的产量和纯度;优化的缓冲系统使裂解液中的DNA可特异结合到吸附膜上,抑制剂通过两步漂洗步骤有效去除,最后使用低盐缓冲液或水洗脱,即可获得高纯度DNA。同时配置高效微量吸附柱,洗脱体积可低至20μl。经过纯化的DNA可以直接用于PCR、Real-time PCR、SNP基因分型、STR基因分型、二代测序和药物基因组学研究等。
      从福尔马林固定、石蜡包埋样本中分离的DNA分子量通常低于新鲜或冷冻样本中的DNA。DNA片段化的程度取决于样本类型、储存时间以及固定的条件。

    试剂盒组成

     
    组份 50次
    Buffer GTL 15ml
    Buffer GL 15ml
    Buffer GW1(浓缩) 13ml
    Buffer GW2(浓缩) 15ml
    Buffer EB 10ml
    Buffer DS 10ml
    蛋白酶K 25 mg
    蛋白酶K 储存液 1.25ml
    离心吸附柱DF及收集管 50套
    离心管(L-1.5ml) 50个


    自备试剂:无水乙醇。

    实验前准备及重要注意事项/strong>:
    1、获得样品后,要尽快将样品在4%-10%的福尔马林中固定,固定时间以14-24小时为宜,时间过长易导致基因组断裂,影响下游实验。如果甲醛固定时间过长或样本存放时间过久(>1年)则易导致DNA完整性受损,无法扩出长片段。
    2、确保包埋前的样品彻底脱水,残留的福尔马林会抑制蛋白酶K 的作用。
    3、向蛋白酶K 中加入1.25ml 蛋白酶K 储存液使其溶解,-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置,以免影响其活性。
    4、第一次使用前应按试剂瓶标签说明先在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
    5、使用前请检查Buffer GTL、Buffer GL和Buffer DS是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请将Buffer GTL、Buffer GL和Buffer DS于56℃水浴重新溶解。
    6、如果下游实验对RNA污染比较敏感,可以在加入Buffer GL前加入2μl DNase-Free的RNase A(100 mg/ml),RNase A本试剂盒并未提供,如果需要可单独向本公司订购,货号:WE0225S。
    7、实验开始前将水浴锅或恒温混匀仪预热至56℃。

    操作步骤

    石蜡包埋样本
    1、用手术刀将组织块中多余的石蜡修剪掉,露出组织后切成5-10μM的薄片。
    2、取约1×1cm2的切片(共约3-8片切片)置于离心管(自备)中,加入160μl Buffer DS,涡旋震荡10秒。短暂离心将样本收集到管底。56℃孵育3分钟,水浴锅中取出后静置,降至室温后进行下一步操作。
    注意:如果样品表面暴露在空气中,最初的2-3片弃掉不用。
    3、上述管中加入180μl Buffer GTL,涡旋震荡混匀,12000rpm离心1分钟,溶液分为两层。取20μl 蛋白酶K 加入到下层溶液中,移液器小心吹吸混匀。
    4、56℃孵育1小时,直至样品完全溶解。90℃孵育1小时。12000rpm离心1分钟,使用200μl枪头沿管壁小心吸取下层的水相于新的离心管中。
    注意:
    1)此步骤的目的是修复由甲醛变性的核酸,孵育的温度过高或时间过长可能造成DNA断裂,产生DNA碎片。
    2)56℃孵育后的样品可置于室温,直至水浴锅或干浴锅温度达到90℃后再把样品置于90℃孵育。
    3)如需除去RNA,可将样品温度降到室温后,加入2μl浓度为100 mg/ml 的RNase A溶液(货号:WE0225S),震荡混匀,室温放置2分钟。

    福尔马林等固定液中的样本
    1、取约20 mg的样本,切成小块,置于离心管中,加入500μl 10mM PBS(PH7.4),涡旋振荡,12000rpm(~~13400×g)离心1分钟,弃上清,重复3次。
    2、上述管中加入180μl Buffer GTL,20μl 蛋白酶K ,涡旋震荡混匀。
    3、56℃孵育1小时,直至样品完全溶解。90℃孵育1小时。短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
    注意:
    1)此步骤的目的是修复由甲醛变性的核酸,孵育的温度过高或时间过长可能造成DNA断裂,产生DNA碎片。
    2)56℃孵育后的样品可置于室温,直至水浴锅或干浴锅温度达到90℃后再把样品置于90℃孵育。
    4、12000rpm离心1分钟,使用200μl枪头沿管壁小心吸取上清到新的离心管中。
    注意:如需除去RNA,可将样品温度降到室温后,加入2μl浓度为100 mg/ml 的RNase A溶液(货号:WE0225S),震荡混匀,室温放置2分钟。
    5、加入200μl Buffer GL,涡旋震荡混匀后加入200μl无水乙醇,涡旋震荡彻底混匀。短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
    注意:
    1)加入Buffer GL和无水乙醇后要立即充分混匀。
    2)加入Buffer GL和无水乙醇后可能会产生白色沉淀,不会影响后续实验。
    3)如果需要对多个样品进行操作,可以将Buffer GL和无水乙醇事先混匀后加样。
    6、将步骤5所得溶液全部加入已装入收集管的吸附柱DF中,若一次不能加完溶液,可分多次转入。12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
    7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
    8、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
    注意:如需进一步提高DNA纯度,可重复步骤8。
    9、12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中废液。将吸附柱置于室温数分钟以彻底晾干。
    注意:这一步目的是将吸附柱中残余乙醇去除,乙醇残留会影响后续酶促反应。
    10、将吸附柱置于一个新的1.5ml收集管中,向吸附柱的中间部位悬空加入20-100μlBuffer EB或灭菌水,室温放置2-5分钟,12000rpm离心1分钟,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。
    注意:
    1)洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响,若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5,pH值低于7.0时洗脱效率不高。
    2)如果要提高DNA的终浓度,可以将步骤10所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上,室温放置2分钟,12000rpm离心1分钟。

    储存条件:室温(15~30℃)。


    IPTG溶液(50mg/ml)北京厂家现货关键词:IPTG溶液,IPTG溶液(50mg/ml),WE0219,IPTG Solution(50mg/ml)


    ·高纯游离DNA中量提取试剂盒(负压法)
    编号:WE0189
    英文名称:CWhipro Circulating Nucleic Acid Midi Extraction Kit
    规格:10次|50次
      本试剂盒适用于从新鲜或冷冻的血清、血浆、羊水、尿液等无细胞体液中提取游离DNA。本试剂盒采用可以特异性结合核酸的吸附柱和独特的缓冲液系统,样品裂解后,游离DNA在高盐条件下与硅胶膜结合,在低盐、高pH值时游离DNA从硅胶膜上洗脱下来。本试剂盒使用负压法,同时配备延伸管,可处理多达5ml样本,纯化的DNA产量高、质量好,最大限度去除蛋白、色素、脂类及其他抑制性杂质污染。纯化得到的游离DNA质量稳定、可靠,可直接用于PCR、荧光定量PCR和二代测序等分子生物学实验。

    试剂盒组成
    组份 10次 50次
    Buffer CL 45ml 220ml
    Buffer CB(浓缩液) 60ml 300ml
    Buffer GTL 15ml 60ml
    Buffer GW1(浓缩液) 3ml 13ml
    Buffer GW2(浓缩液) 3ml 15ml
    Buffer EBL 2ml 10ml
    蛋白酶K 100 mg 3×180 mg
    蛋白酶K 储存液 5ml 30ml
    吸附柱DG及收集管 10套 50套
    延伸管(20ml) 10个 50个
    连接管 10个 50个
    离心管(L-1.5 m l) 10个 50个

    保存条件:吸附柱DG置于2~8℃,其他组分室温(15~30℃)

    产品特点
    1、适合大体积样本:试剂盒使用负压法,配备延伸管,配套使用负压装置可将样品处理量提高至5ml。
    2、提取得率高:使用高效微量吸附柱结合目的片段,有效提升核酸的回收率,洗脱体积可在10-150μl之间灵活变化,可浓缩低浓度核酸。
    3、纯度高:经纯化和浓缩的游离DNA不含蛋白、核酸酶和其他杂质,可即用于下游各种应用,包括PCR、荧光定量PCR、二代测序等。

    自备试剂:无水乙醇、异丙醇

    实验前准备及重要注意事项/strong>:
    1、向每管蛋白酶K *(代"粉")末中加入指定用量(10次加5ml/50次每瓶加9ml)的蛋白酶K 储存液,使其完全溶解后-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置,避免反复冻融,以免影响其活性。其它组分可以在干燥、室温(15~30℃)环境下稳定保存一年。如需保存更长时间,可置于2~8℃。
    2、样品应避免反复冻融,否则会导致DNA提取量下降。
    3、本试剂盒最多可以从5ml血清血浆、4ml尿液中提取cfDNA。
    4、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer CB中加入异丙醇,混合均匀,并在试剂瓶标签上做好标记。
    5、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇,混合均匀,并在试剂瓶标签上做好标记。
    6、使用前请检查Buffer CL、Buffer CB是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请将Buffer CL、Buffer CB于56℃水浴孵育重新溶解,混匀后使用。
    7、实验开始前将水浴锅预热至60℃。
    8、可将洗脱缓冲液Buffer EBL预热至60℃。
    9、负压装置。

    操作步骤(血清、血浆样本1-5ml):

    1、样品处理:向离心管(自备)中加入1ml血清/血浆样本,若样本不足1ml,加入PBS溶液补至1ml体积。
    注意:当样品量超过1ml时,请等比例增加蛋白酶K 、Buffer CL和Buffer CB试剂用量,具体
    2、向以上溶液中加入100μl 蛋白酶K ,混匀。
    3、加入800μl Buffer CL,剧烈震荡至少30秒。
    4、60℃孵育30分钟,其间颠倒混匀数次。
    5、加入1800μl Buffer CB(使用前检查是否加入异丙醇),颠倒混匀10次或剧烈震荡15-30秒。
    6、冰浴5分钟。
    7、正确连接负压装置,将连接管插到负压装置的插口上。
    8、将吸附柱插入到连接管上。
    9、将延伸管插入开盖的吸附柱中。
    注意: 确保连接管、吸附柱和延伸管连接稳固,防止发生漏液。
    10、将冰浴后的混合溶液全部加入延伸管中,开启并调节负压至-900~-800 mbar,缓慢吸走管中溶液。待溶液完全吸走,关闭负压开关,当压力恢复至0 mbar时,小心移去延伸管。
    11、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否加入无水乙醇), 开启并调节负压至-900~-800 mbar,待溶液完全吸走,关闭负压开关。
    12、向吸附柱中加入750μl Buffer GW2(使用前检查是否加入无水乙醇),开启并调节负压至-900~-800 mbar,待溶液完全吸走,关闭负压开关。
    13、向吸附柱中加入750μl无水乙醇,开启并调节负压至-800~-900 mbar,待溶液完全吸走,关闭负压开关。
    14、当压力恢复至0 mbar时,将吸附柱取下,置于新的收集管中,12000rpm离心3分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
    注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应。
    15、将吸附柱置于新的1.5ml离心管中,向吸附柱的中间部位悬空加入20-150μl Buffer EBL,室温放置3分钟,12000rpm离心1分钟,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。

    附表1:不同血清/血浆样本量推荐加入试剂量

     
    加入物 加入量(ml)
    样本 1 2 3 4 5
    蛋白酶K 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5
    Buffer CL 0.8 1.6 2.4 3.2 4
    Buffer CB 1.8 3.6 5.4 7.2 9


    储存条件:室温(15~30℃)。


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