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206
- 英文名:
IPTG Solution(50mg/ml)
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
冷藏
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
IPTG溶液(50mg/ml)北京厂家现货是高品质的分子生物学试剂产品,由北京百奥莱博供应,用于生化研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多IPTG溶液(50mg/ml)等分子生物学试剂产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:IPTG溶液(50mg/ml)北京厂家现货
品牌:百奥莱博
规格:5ml
编号:WE0219
英文名:IPTG Solution(50mg/ml)
产地:国产|进口
欲了解更多IPTG溶液(50mg/ml)北京厂家现货的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:
·新型固定组织基因组DNA提取试剂盒
编号:WE0172
英文名称:NewPurify FFPE DNA Extraction kit
规格:50次
本试剂盒适用于从福尔马林固定、石蜡包埋组织中有效纯化基因组DNA。本品使用专门优化脱蜡剂和裂解液,释放福尔马林固定或组织切片样本中的DNA,不涉及有机试剂二甲*,无需过夜操作;消化后的样品在较高的温度孵育后,去除游离DNA的福尔马林交联,有效提高DNA的产量和纯度;优化的缓冲系统使裂解液中的DNA可特异结合到吸附膜上,抑制剂通过两步漂洗步骤有效去除,最后使用低盐缓冲液或水洗脱,即可获得高纯度DNA。同时配置高效微量吸附柱,洗脱体积可低至20μl。经过纯化的DNA可以直接用于PCR、Real-time PCR、SNP基因分型、STR基因分型、二代测序和药物基因组学研究等。
从福尔马林固定、石蜡包埋样本中分离的DNA分子量通常低于新鲜或冷冻样本中的DNA。DNA片段化的程度取决于样本类型、储存时间以及固定的条件。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 |
| Buffer GTL | 15ml |
| Buffer GL | 15ml |
| Buffer GW1(浓缩) | 13ml |
| Buffer GW2(浓缩) | 15ml |
| Buffer EB | 10ml |
| Buffer DS | 10ml |
| 蛋白酶K | 25 mg |
| 蛋白酶K 储存液 | 1.25ml |
| 离心吸附柱DF及收集管 | 50套 |
| 离心管(L-1.5ml) | 50个 |
自备试剂:无水乙醇。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、获得样品后,要尽快将样品在4%-10%的福尔马林中固定,固定时间以14-24小时为宜,时间过长易导致基因组断裂,影响下游实验。如果甲醛固定时间过长或样本存放时间过久(>1年)则易导致DNA完整性受损,无法扩出长片段。
2、确保包埋前的样品彻底脱水,残留的福尔马林会抑制蛋白酶K 的作用。
3、向蛋白酶K 中加入1.25ml 蛋白酶K 储存液使其溶解,-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置,以免影响其活性。
4、第一次使用前应按试剂瓶标签说明先在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
5、使用前请检查Buffer GTL、Buffer GL和Buffer DS是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请将Buffer GTL、Buffer GL和Buffer DS于56℃水浴重新溶解。
6、如果下游实验对RNA污染比较敏感,可以在加入Buffer GL前加入2μl DNase-Free的RNase A(100 mg/ml),RNase A本试剂盒并未提供,如果需要可单独向本公司订购,货号:WE0225S。
7、实验开始前将水浴锅或恒温混匀仪预热至56℃。
操作步骤:
石蜡包埋样本
1、用手术刀将组织块中多余的石蜡修剪掉,露出组织后切成5-10μM的薄片。
2、取约1×1cm2的切片(共约3-8片切片)置于离心管(自备)中,加入160μl Buffer DS,涡旋震荡10秒。短暂离心将样本收集到管底。56℃孵育3分钟,水浴锅中取出后静置,降至室温后进行下一步操作。
注意:如果样品表面暴露在空气中,最初的2-3片弃掉不用。
3、上述管中加入180μl Buffer GTL,涡旋震荡混匀,12000rpm离心1分钟,溶液分为两层。取20μl 蛋白酶K 加入到下层溶液中,移液器小心吹吸混匀。
4、56℃孵育1小时,直至样品完全溶解。90℃孵育1小时。12000rpm离心1分钟,使用200μl枪头沿管壁小心吸取下层的水相于新的离心管中。
注意:
1)此步骤的目的是修复由甲醛变性的核酸,孵育的温度过高或时间过长可能造成DNA断裂,产生DNA碎片。
2)56℃孵育后的样品可置于室温,直至水浴锅或干浴锅温度达到90℃后再把样品置于90℃孵育。
3)如需除去RNA,可将样品温度降到室温后,加入2μl浓度为100 mg/ml 的RNase A溶液(货号:WE0225S),震荡混匀,室温放置2分钟。
福尔马林等固定液中的样本
1、取约20 mg的样本,切成小块,置于离心管中,加入500μl 10mM PBS(PH7.4),涡旋振荡,12000rpm(~~13400×g)离心1分钟,弃上清,重复3次。
2、上述管中加入180μl Buffer GTL,20μl 蛋白酶K ,涡旋震荡混匀。
3、56℃孵育1小时,直至样品完全溶解。90℃孵育1小时。短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
注意:
1)此步骤的目的是修复由甲醛变性的核酸,孵育的温度过高或时间过长可能造成DNA断裂,产生DNA碎片。
2)56℃孵育后的样品可置于室温,直至水浴锅或干浴锅温度达到90℃后再把样品置于90℃孵育。
4、12000rpm离心1分钟,使用200μl枪头沿管壁小心吸取上清到新的离心管中。
注意:如需除去RNA,可将样品温度降到室温后,加入2μl浓度为100 mg/ml 的RNase A溶液(货号:WE0225S),震荡混匀,室温放置2分钟。
5、加入200μl Buffer GL,涡旋震荡混匀后加入200μl无水乙醇,涡旋震荡彻底混匀。短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
注意:
1)加入Buffer GL和无水乙醇后要立即充分混匀。
2)加入Buffer GL和无水乙醇后可能会产生白色沉淀,不会影响后续实验。
3)如果需要对多个样品进行操作,可以将Buffer GL和无水乙醇事先混匀后加样。
6、将步骤5所得溶液全部加入已装入收集管的吸附柱DF中,若一次不能加完溶液,可分多次转入。12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
8、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
注意:如需进一步提高DNA纯度,可重复步骤8。
9、12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中废液。将吸附柱置于室温数分钟以彻底晾干。
注意:这一步目的是将吸附柱中残余乙醇去除,乙醇残留会影响后续酶促反应。
10、将吸附柱置于一个新的1.5ml收集管中,向吸附柱的中间部位悬空加入20-100μlBuffer EB或灭菌水,室温放置2-5分钟,12000rpm离心1分钟,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。
注意:
1)洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响,若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5,pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)如果要提高DNA的终浓度,可以将步骤10所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上,室温放置2分钟,12000rpm离心1分钟。
储存条件:室温(15~30℃)。
IPTG溶液(50mg/ml)北京厂家现货关键词:IPTG溶液,IPTG溶液(50mg/ml),WE0219,IPTG Solution(50mg/ml)
·高纯游离DNA中量提取试剂盒(负压法)
编号:WE0189
英文名称:CWhipro Circulating Nucleic Acid Midi Extraction Kit
规格:10次|50次
本试剂盒适用于从新鲜或冷冻的血清、血浆、羊水、尿液等无细胞体液中提取游离DNA。本试剂盒采用可以特异性结合核酸的吸附柱和独特的缓冲液系统,样品裂解后,游离DNA在高盐条件下与硅胶膜结合,在低盐、高pH值时游离DNA从硅胶膜上洗脱下来。本试剂盒使用负压法,同时配备延伸管,可处理多达5ml样本,纯化的DNA产量高、质量好,最大限度去除蛋白、色素、脂类及其他抑制性杂质污染。纯化得到的游离DNA质量稳定、可靠,可直接用于PCR、荧光定量PCR和二代测序等分子生物学实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 10次 | 50次 |
| Buffer CL | 45ml | 220ml |
| Buffer CB(浓缩液) | 60ml | 300ml |
| Buffer GTL | 15ml | 60ml |
| Buffer GW1(浓缩液) | 3ml | 13ml |
| Buffer GW2(浓缩液) | 3ml | 15ml |
| Buffer EBL | 2ml | 10ml |
| 蛋白酶K | 100 mg | 3×180 mg |
| 蛋白酶K 储存液 | 5ml | 30ml |
| 吸附柱DG及收集管 | 10套 | 50套 |
| 延伸管(20ml) | 10个 | 50个 |
| 连接管 | 10个 | 50个 |
| 离心管(L-1.5 m l) | 10个 | 50个 |
保存条件:吸附柱DG置于2~8℃,其他组分室温(15~30℃)
产品特点:
1、适合大体积样本:试剂盒使用负压法,配备延伸管,配套使用负压装置可将样品处理量提高至5ml。
2、提取得率高:使用高效微量吸附柱结合目的片段,有效提升核酸的回收率,洗脱体积可在10-150μl之间灵活变化,可浓缩低浓度核酸。
3、纯度高:经纯化和浓缩的游离DNA不含蛋白、核酸酶和其他杂质,可即用于下游各种应用,包括PCR、荧光定量PCR、二代测序等。
自备试剂:无水乙醇、异丙醇
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、向每管蛋白酶K *(代"粉")末中加入指定用量(10次加5ml/50次每瓶加9ml)的蛋白酶K 储存液,使其完全溶解后-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置,避免反复冻融,以免影响其活性。其它组分可以在干燥、室温(15~30℃)环境下稳定保存一年。如需保存更长时间,可置于2~8℃。
2、样品应避免反复冻融,否则会导致DNA提取量下降。
3、本试剂盒最多可以从5ml血清血浆、4ml尿液中提取cfDNA。
4、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer CB中加入异丙醇,混合均匀,并在试剂瓶标签上做好标记。
5、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇,混合均匀,并在试剂瓶标签上做好标记。
6、使用前请检查Buffer CL、Buffer CB是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请将Buffer CL、Buffer CB于56℃水浴孵育重新溶解,混匀后使用。
7、实验开始前将水浴锅预热至60℃。
8、可将洗脱缓冲液Buffer EBL预热至60℃。
9、负压装置。
操作步骤(血清、血浆样本1-5ml):
1、样品处理:向离心管(自备)中加入1ml血清/血浆样本,若样本不足1ml,加入PBS溶液补至1ml体积。
注意:当样品量超过1ml时,请等比例增加蛋白酶K 、Buffer CL和Buffer CB试剂用量,具体
2、向以上溶液中加入100μl 蛋白酶K ,混匀。
3、加入800μl Buffer CL,剧烈震荡至少30秒。
4、60℃孵育30分钟,其间颠倒混匀数次。
5、加入1800μl Buffer CB(使用前检查是否加入异丙醇),颠倒混匀10次或剧烈震荡15-30秒。
6、冰浴5分钟。
7、正确连接负压装置,将连接管插到负压装置的插口上。
8、将吸附柱插入到连接管上。
9、将延伸管插入开盖的吸附柱中。
注意: 确保连接管、吸附柱和延伸管连接稳固,防止发生漏液。
10、将冰浴后的混合溶液全部加入延伸管中,开启并调节负压至-900~-800 mbar,缓慢吸走管中溶液。待溶液完全吸走,关闭负压开关,当压力恢复至0 mbar时,小心移去延伸管。
11、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否加入无水乙醇), 开启并调节负压至-900~-800 mbar,待溶液完全吸走,关闭负压开关。
12、向吸附柱中加入750μl Buffer GW2(使用前检查是否加入无水乙醇),开启并调节负压至-900~-800 mbar,待溶液完全吸走,关闭负压开关。
13、向吸附柱中加入750μl无水乙醇,开启并调节负压至-800~-900 mbar,待溶液完全吸走,关闭负压开关。
14、当压力恢复至0 mbar时,将吸附柱取下,置于新的收集管中,12000rpm离心3分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应。
15、将吸附柱置于新的1.5ml离心管中,向吸附柱的中间部位悬空加入20-150μl Buffer EBL,室温放置3分钟,12000rpm离心1分钟,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。
附表1:不同血清/血浆样本量推荐加入试剂量
| 加入物 | 加入量(ml) | ||||
| 样本 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| 蛋白酶K | 0.1 | 0.2 | 0.3 | 0.4 | 0.5 |
| Buffer CL | 0.8 | 1.6 | 2.4 | 3.2 | 4 |
| Buffer CB | 1.8 | 3.6 | 5.4 | 7.2 | 9 |
储存条件:室温(15~30℃)。
IPTG溶液(50mg/ml)北京厂家现货关键词:IPTG溶液,IPTG溶液(50mg/ml),WE0219,IPTG Solution(50mg/ml)
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F020223 兔抗豚鼠IgG抗体 Rabbit Anti-Guinea Pig IgG
我公司生产供应销*(代"售")的分子生物学试剂正全品类优惠促销,十分期待您的咨询选购IPTG溶液(50mg/ml)北京厂家现货。
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