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- 文献和实验
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673
- 英文名:
2×BAmp MasterMix(With Dye)
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
2×BAmp MasterMix(含染料) 是高品质的核酸扩增(PCR)产品,由北京百奥莱博供应,用于科研实验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多2×BAmp MasterMix(含染料)等核酸扩增(PCR)产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:2×BAmp MasterMix(含染料)
品牌:百奥莱博
编号:WE0106
英文名:2×BAmp MasterMix(With Dye)
规格:5ml
产地:国产|进口
BAmp MasterMix由BAmp DNA Polymerase、PCR Buffer、Mg2+、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂组成的预混体系,浓度为2×。BAmp DNA Polymerase是一种兼具高扩增效率和高保真性的耐热聚合酶。其主要特点是可以高效扩增长片段DNA,尤其在扩增>10 kb的DNA片段方面,其优势更加明显,所扩增的片段最长可以达到40 kb。该酶具有高度的延伸和校对能力,保真度高于普通Taq酶。预配好的PCR混合液使操作更加简单快捷,可最大限度地减少人为误差和污染。独创的MasterMix配方使整个反应体系非常稳定,重复性好。本产品已加入染料(蓝色),反应结束后可直接进行电泳检测,无需再使用上样缓冲液。扩增得到的PCR产物3"端附有一个“A”碱基,因此可直接用于T/A克隆。适用于构建基因图谱、序列测定及分子遗传学研究等。
产品组成:
| 组份 | 1ml | 5ml |
| 2×BAmp MasterMix(With Dye) | 1ml | 5×1ml |
| ddH2O | 1ml | 5×1ml |
注意:2×BAmp MasterMix含有BAmp DNA Polymerase,3 mM MgCl2 和400μM each dNTP。
质量控制:
1、经检验无外源核酸酶活性;
2、PCR方法检测无宿主残余DNA;
3、能有效地扩增多种基因组中的单拷贝基因。
使用方法:
以下举例为以人基因组DNA为模板,扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系
| 试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
| 2×BAmp MasterMix(With Dye) | 25μl | 1× |
| Forward Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Reverse Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Template DNA | <0.5μg | <0.5μg/50μl |
| ddH2O | up to 50μl |
注意:引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。
2、PCR反应条件
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 94℃ | 2 min | |
| 变性 | 94℃ | 30 s | 25-35 个循环 |
| 退火 | 55-65℃ | 30 s | |
| 延伸 | 72℃ | 30 s | |
| 终延伸 | 72℃ | 5 min |
注意:
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定,BAmp DNA Polymerase的扩增效率为2.0 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
关键词:含染料,2×BAmp MasterMix,2×BAmp MasterMix(含染料),2×BAmp MasterMix(With Dye),WE0106
欲咨询购买2×BAmp MasterMix(含染料) 核酸扩增(PCR),请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
| 编号 | 名称 |
| WE0352 | 抗GST标签单克隆抗体 |
| WE0390 | AP标记山羊抗小鼠IgG(H+L) |
| WE0336 | 抗His标签鼠克隆抗体 |
| WE0187 | 土壤基因组提取试剂盒 |
| WE0227 | 人类cDNA |
| WE0363 | HRP标记兔抗绵羊IgG(H+L) |
| WE0204 | 磁珠法游离DNA提取试剂盒 |
| WE0108 | 2×Pfu MasterMix(含染料) |
| WE0273 | 微量BCA蛋白定量试剂盒 |
| WE0154 | BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG酶) |
| WE0270 | Protein G琼脂糖凝胶 |
| WE0252 | DH5α感受态细胞 |
| WE0105 | BAmp DNA Polymerase |
| WE0357 | 抗GAPDH多克隆抗体 |
| WE0375 | HRP标记山羊抗人IgG(H+L) |
| WE0360 | FITC标记驴抗小鼠IgG(H+L) |
| WE0317 | 水性封片剂 |
| WE0350 | 抗HA标签多克隆抗体 |
| WE0313 | TBS(pH8.0,10×) |
| WE0315 | 免疫组化试剂盒(鼠源一抗) |
| WE0219 | IPTG溶液(50mg/ml) |
| WE0370 | HRP标记驴抗鸡IgY(IgG)(H+L) |
| WE0395 | 口腔拭子DNA样本保存管 |
| WE0364 | FITC标记驴抗山羊IgG(H+L) |
| WE0243 | Super DNA Ladder |
| WE0358 | DyLight594标记山羊抗人IgG(H+L) |
| WE0224 | RNase A溶液(10mg/ml) |
| WE0385 | FITC标记兔抗山羊IgG(H+L) |
| WE0242 | UltraStain DNA Marker |
| WE0289 | SDS-PAGE上样缓冲液(非还原,5×) |
| WE0178 | 细菌基因组DNA提取试剂盒 |
| WE0213 | DNase I(不含RNase) |
| WE0169 | 微量凝胶DNA回收试剂盒 |
| WE0211 | 6×UltraStain上样缓冲液 |
| WE0160 | 超纯dNTP混合液(10 mM) |
| WE0247 | TA快速连接试剂盒(pUC-T Simple)(含载体,连接酶) |
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文献和实验μL 体系 2× MasterMix 25 μL 上游 Primer ( 10 μM 1-5 μL 下游 Primer ( 10 μM ) 1-5 μL 模板 lamid DNA ~ 50 ng genomic DNA ~ 1000 ng cDNA ~ 500 ng 粗提液 ~ 2 μL 灭菌蒸馏水至 50 μL PCR 扩增实例: 一、plasmid DNA 扩增 1.提取的质粒 DNA 扩增 以pUC19 质粒为模板扩增 100,250,500
【资源】一种被广泛用于实时定量 PCR 的绿色荧光 DNA 染料
EvaGreen qPCR 荧光染料一种被广泛用于实时定量 PCR 的绿色荧光 DNA 染料 EvaGreen®是一种用于实时定量 PCR(qPCR)的 DNA 结合染料。该染料的诸多优点使它远胜于 SYBR Green I。除了有相似的光谱特性,EvaGreen 有三个主要特点使它区别于 SYBR Green I。首先,EvaGreen 对 PCR 的抑制性远小于 SYBR Green I。因此,使用EvaGreen 进行的 qPCR 实验可以使用快速 PCR 步骤
Real-time qPCR 手册——手把手教你从菜鸟到高手
操作。 3. 每管或每孔都要换新枪头!不要连续用同一个枪头加样! 4. 所有成分加完后,离心去除气泡。 5. 每个样品至少 3 个平行孔。 参比或者校正染料(reference dye,passive dye)常用的是 ROXTM (现在已经是ABI的注册商标了!)或者其他染料,只要不影响检测 PCR 产物的荧光值就可以。参比染料的作用是标准化荧光定量反应中的非 PCR 震荡,校正加样误差或者是孔与孔之间的误差,提供一个稳定的基线。现在很多公司已经把 ROXTM 配制在 MasterMix
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