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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
10
- 细胞类型:
见说明书
- 组织来源:
见说明书
- 物种来源:
人大小鼠等
- 免疫类型:
见说明书
- 细胞形态:
见说明书
- 运输方式:
原代冻存干冰运输,传代室温运输
- 年限:
一年
- 生长状态:
见说明书
- 规格:
1×106cells/T25培养瓶
生长特性:贴壁 悬浮 半悬浮半贴壁(详情可咨询我们)
生长条件:详情联系我们索取该产品说明书
培养条件:90%DMEM/F12+10%FBS+1%P/S
培养温度:37℃
空气条件:5% CO2,95% AIR
传代方法:1:2传代,2~3天换液
冻存条件:0%FBS+10%DMSO
OSKMZ-1小鼠诱导型多能干细胞,使用方法
1、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
取出25cm2培养瓶,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态,然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
2、细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀细胞用12ml完全培养基重悬,然后按1:2比例进行分瓶传代,最后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)待细胞完全贴壁后,观察培养结果,之后进行换液培养或传代。
3、细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3)用适量的冻存液(FBS:DMSO=9 :1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。
4、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中, 1000rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种25cm2培养瓶,于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。
OSKMZ-1小鼠诱导型多能干细胞,原代细胞与细胞系有什么区别?细胞培养物来源于原代外植体或分散的细胞悬液。通常在这样的培养物中细胞增殖形成汇合地单层细胞或密集地细胞悬液。根据传统定义,第一次收获和接种的细胞被称为原代细胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 这类细胞生命周期有限,在有限的生命周期内需掌握好细胞最大的生长空间,以保持细胞群中基因型和表型的一致性。细胞系是不断生长,分化的细胞群,因其经过遗传改造,致使其具有无限增长的潜能。体外生长的细胞系用于医疗或科研。实际上,连续细胞系可以用大量次培养基培养,随着代数的增加细胞的基因型和表型都有可能发生改变。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
1、倍增和代数有什么区别?倍增是培养物中细胞总数加倍,通常是指细胞指数或对数生长期。代数是指细胞群从培养瓶中移出,传代培养过程的次数,传代培养的目的是使细胞处于低密度以刺激其进一步生长。
2、接收到的冻存细胞该如何处理?收到包装箱后,立即将冻存细胞从干冰移入液氮中冻存。此过程尽量快以避免升温。不要将细胞储存在-80℃,这样会对细胞造成不可挽回的伤害。
3、有多少经验才能开始正常人类细胞培养?推荐有经验者在无菌环境下用层流净化罩工作,如果有经验的话对其它细胞类型也是很有利的。如果你是细胞培养的初学者或打算建立细胞培养实验室,我们会为你提供帮助。请联系我们的细胞培养专家。
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文献和实验Cell Rep:中山大学王继厂课题组开发新的干细胞模型,重现人类早期胚胎发育过程
健康等。 近年来的研究表明,「原始态」人类多能干细胞在长期培养过程中,会产生基因组不稳定、基因印记异常、分化潜能低下等问题。这些问题表明目前的「原始态」人类多能干细胞与人类植入前上胚层细胞存在较大差异,因此仍需继续优化培养条件以建立更加稳定、更高质量、更强分化潜能的新型干细胞系。 为了建立与人类植入前上胚层细胞更相似的干细胞系,王继厂教授团队首先利用特异性标记干细胞多能态的荧光报告系统,通过小分子化合物和细胞因子筛选,建立了一种新的培养体系,由此获得一种新型人类多能干细胞系。该干细胞系具有与人类植入
更加明显,RA 持续时间更长,但其起病较缓慢,没有病情的波动和复发情况,也没有关节外皮肤及眼部表现的改变。 图为集萃药康 Male DBA/1J 诱导模型 3. 胶原抗体诱导的关节炎(CAIA) CAIA 属于 CIA 模型的扩展,是抗体诱导型关节炎模型中最常见的模型之一。与 CIA 依赖的 MHC 单倍型易感品系相比,CAIA 可在大多数小鼠上诱导关节炎,如 DBA/1、BALB/c、C57BL/6、C57BL/10 等小鼠[8]。 造模机制:通过靶向 Ⅱ 型胶原蛋白的各种表位的抗体混合
原因。这篇文章旨在探索用 AAV 基因疗法治疗由 NPHS2 基因突变引起的肾病综合征。 实验设计 AAV-LK03 和 AAV 2/9 的选择:研究者比较了 AAV-LK03 和 AAV 2/9 两种血清型在人类和鼠类足细胞中的转导效率。 体外实验:通过体外培养的突变人类足细胞中来测试基因疗法的效果。 体内实验:在诱导型足细胞蛋白(Podocin)敲除小鼠模型中测试疾病诱导前(预防性)的基因治疗效果,在诱导型突变 Podocin 敲入小鼠中测试疾病诱导后(治疗性)的基因疗法效果。 图 4 体内
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