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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
10
- 细胞类型:
见说明书
- 组织来源:
见说明书
- 物种来源:
人大小鼠等
- 免疫类型:
见说明书
- 细胞形态:
见说明书
- 运输方式:
原代冻存干冰运输,传代室温运输
- 年限:
一年
- 生长状态:
见说明书
- 规格:
1×106cells/T25培养瓶
生长特性:贴壁 悬浮 半悬浮半贴壁(详情可咨询我们)
生长条件:详情联系我们索取该产品说明书
培养条件:90%DMEM/F12+10%FBS+1%P/S
培养温度:37℃
空气条件:5% CO2,95% AIR
传代方法:1:2传代,2~3天换液
冻存条件:0%FBS+10%DMSO
人子宫内膜癌细胞KLE,使用方法
1、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
取出25cm2培养瓶,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态,然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
2、细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀细胞用12ml完全培养基重悬,然后按1:2比例进行分瓶传代,最后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)待细胞完全贴壁后,观察培养结果,之后进行换液培养或传代。
3、细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
3)用适量的冻存液(FBS:DMSO=9 :1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。
4、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中, 1000rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种25cm2培养瓶,于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。
人子宫内膜癌细胞KLE,原代细胞与细胞系有什么区别?细胞培养物来源于原代外植体或分散的细胞悬液。通常在这样的培养物中细胞增殖形成汇合地单层细胞或密集地细胞悬液。根据传统定义,第一次收获和接种的细胞被称为原代细胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 这类细胞生命周期有限,在有限的生命周期内需掌握好细胞最大的生长空间,以保持细胞群中基因型和表型的一致性。细胞系是不断生长,分化的细胞群,因其经过遗传改造,致使其具有无限增长的潜能。体外生长的细胞系用于医疗或科研。实际上,连续细胞系可以用大量次培养基培养,随着代数的增加细胞的基因型和表型都有可能发生改变。需要指出的是,在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群除非细胞经过了遗传改造。
1、倍增和代数有什么区别?倍增是培养物中细胞总数加倍,通常是指细胞指数或对数生长期。代数是指细胞群从培养瓶中移出,传代培养过程的次数,传代培养的目的是使细胞处于低密度以刺激其进一步生长。
2、接收到的冻存细胞该如何处理?收到包装箱后,立即将冻存细胞从干冰移入液氮中冻存。此过程尽量快以避免升温。不要将细胞储存在-80℃,这样会对细胞造成不可挽回的伤害。
3、有多少经验才能开始正常人类细胞培养?推荐有经验者在无菌环境下用层流净化罩工作,如果有经验的话对其它细胞类型也是很有利的。如果你是细胞培养的初学者或打算建立细胞培养实验室,我们会为你提供帮助。请联系我们的细胞培养专家。
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文献和实验Science:直击肿瘤命门,Shibin Zhou 等开发靶向 TP53 突变的双特异性抗体
靶向 TP53 突变和 CD3 的双特异性单链抗体(scDb)。 研究人员首先确证了 p53R175H 在三种人肿瘤细胞系(KMS26, TYK-nu, KLE)中表达,并以 p53R175H/HLA-A*02:01 复合物的形式被呈递到细胞表面。通过噬菌体文库技术筛选得到了两个特异性靶向 p53R175H/HLA-A*02:01 复合物的抗体克隆,分别命名为 H2-scDb 和 H20-scDb。这两个克隆可以特异性地与 p53R175H/HLA-A*02:01 复合物结合,并激活 T 细胞
肿瘤的出现:比如双侧乳腺癌,双侧肾癌,双侧视网膜母细胞瘤。 多个原发性肿瘤在同一个病人身上出现:如一个患者既有原发性肠癌,又有原发性卵巢癌。 非肿瘤临床表现的出现:如Cowden综合征,该疾病是一种罕见的常染色体显性遗传病,主要表现为多重错构瘤及某类肿瘤发生风险的增加。临床表现多种多样,包括乳腺癌、子宫内膜癌、甲状腺癌等,皮肤方面表现为口腔及皮肤乳头状瘤,胃肠方面表现为混合性息肉(包括错构瘤)。 无外环境风险因素的发现:一般我们认为肿瘤是复杂疾病,肿瘤的发生是遗传因素与环境因素(包括
【讲座】精品文献讲座第一讲---三苯氧胺在子宫内膜癌的调节机制
雌激素相关靶基因的表达,而且调控一系列独特的基因表达,进而发现PAX2基因在介导雌激素和三苯氧胺刺激的子宫内膜细胞的增殖和癌变过程中起着关键作用。此外,他们还发现PAX2只在子宫内膜癌细胞中被雌激素和三苯氧胺激活表达,而在正常的子宫内膜上皮细胞中则不能被雌激素和三苯氧胺激活,这种差异是由于与癌症相关的PAX2基因启动子低甲基化造成的。 实验设计(括号内为实验的意义和感想): 1. 确定基因芯片处理时间 子宫内膜癌上皮细胞Ⅰ期,Ⅱ期分别原代培养 预实验3小时产生最大量的雌激素受体的靶基因
技术资料暂无技术资料 索取技术资料







