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585
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长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
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阴凉干燥
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博致力于最快速、最有效的检测产品,包括SYA449型猪流感病毒H1亚型荧光PCR检测试剂盒(SIV-H1)批发在内的动物疫病PCR检测试剂盒产品是我公司倾力打造的优势产品,欢迎选购。
名称:SYA449型猪流感病毒H1亚型荧光PCR检测试剂盒(SIV-H1)批发
产地:国产|进口
编号:SYA449
规格:48次/盒|96次/盒
等级:科研试剂
除SYA449型猪流感病毒H1亚型荧光PCR检测试剂盒(SIV-H1)批发外,我公司正在打折促销以下产品:
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SYA449型猪流感病毒H1亚型荧光PCR检测试剂盒(SIV-H1)批发关键词:百奥莱博,SIV-H1,SYA449,猪流感病毒H1亚型荧光PCR检测试剂盒,猪流感病毒H1亚型荧光PCR检测试剂盒(SIV-H1)
·猪伪狂犬(PRV)单重凝胶PCR检测试剂盒
编号:SYA572
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
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编号:SYA531
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规格:48次/盒
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规格:48次/盒
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等级:科研实验专用
规格:48次/盒
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编号:SYA570
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
一、简介:
本试剂盒用一对副猪嗜血杆菌特异性引物,对副猪嗜血杆菌DNA进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
二、用途:
该试剂盒适合于发病猪呼吸道、血液样本中副猪嗜血杆菌(HPS)的特异性检测,用于副猪嗜血杆菌(HPS)的辅助诊断,其检测结果仅供临床参考。
三、试剂盒组成:(48T)
| 组份 | 数量 | 规格 |
| 副猪嗜血杆菌PCR反应液(HPS-PCR MIX) | 1管 | 720μL/管 |
| DNA抽提液(DNA Extraction) | 2管 | 1.5mL/管 |
| 阴性对照(NTC) | 1管 | 50μL/管 |
| 阳性对照(HPS-PTC) | 1管 | 50μL/管 |
四、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为6个月。
五、PCR仪器适用范围
ABI系列,Roche系列等PCR检测仪等。
六、样品的采集与DNA提取
6.1 样品的采集
6.1.1 血清:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入无菌的干燥玻璃管,室温(22-25℃)放置30-60min,血标本可自发完成凝集析出血清,或直接使用水平离
心机,3000rpm离心5min,吸取上层血清,转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.2 血浆:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入含EDTA2Na(乙二*(代"胺")四乙酸二*)或柠檬酸*抗凝剂的玻璃管,立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次,使抗凝剂
与静脉血充分混匀,5-10min后即可分离出血浆,转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.3 粪便样品:取粪便置于灭菌的收集管中送检。
6.1.4 病灶部位样品:取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
注:上述样品建议经过增菌后,收集培养物用于检测。
6.2DNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液,按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-凝胶配套),并按照相应
试剂盒说明进行操作。
6.2.1 培养物:取培养物50μL(培养至一定浊度)或者挑取单克隆菌落与50μL DNA抽提液充分混匀,100℃恒温10min,13000rpm离心3min,取上清5μL进行PCR
反应。
6.2.2 粪便样品:挑取米粒大小粪便于灭菌离心管中,加入0.5mL生理盐水,振荡混匀,13000rpm离心3分钟,弃上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀,
100℃恒温10min,13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
6.2.3 其他液体标本:取标本2-3mL,13000rpm离心3min,弃上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀,100℃恒温10min,13000rpm离心3min取上清5μL进
行PCR反应。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出PCR反应液(HPS-PCR MIX),室温融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下:
| 试剂 | 每个反应加入的量 | N个反应加入的量 |
| PCR反应液 | 15µL | N ×15µL |
向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL PCR反应液,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(HPS-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 PCR反应条件
将各反应管放入PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件:
| 预变性 | 1循环 | 94℃ for 2 min |
| PCR扩增 | 35循环 | 94℃ for 30 sec 58℃ for 30 sec 72℃ for 30 sec |
八、结果分析:
(1)称取1.5g琼脂糖放于250mL锥形瓶中,加入100mL 1×TAE电泳缓冲液,微波炉加热溶解,稍冷后加入10μL染色液混匀,倒入插有梳子的制胶板中。
(2)待胶凝固后,取10μL Maker(推荐使用DL2000 Maker)点样于左侧凝胶孔中,取10μL PCR产物依次点样于凝胶孔中,电压值设定为电泳槽正负极距离
(cm)与5(V/cm)的乘积。待*酚兰指示剂电泳至凝胶中部时停止电泳并使用凝胶成像仪或紫外透照台观察结果。
九、结果分析:
(1)阴性对照(NTC):无任何的条带(引物带除外)。
(2)阳性对照(HPS-PTC):在115bp处有条带。
(3)被检样品:在115bp处有条带为阳性样品,否则为阴性样品。
(4)以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
SYA449型猪流感病毒H1亚型荧光PCR检测试剂盒(SIV-H1)批发关键词:百奥莱博,SIV-H1,SYA449,猪流感病毒H1亚型荧光PCR检测试剂盒,猪流感病毒H1亚型荧光PCR检测试剂盒(SIV-H1)
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文献和实验。世卫组织在26日发布的一份公告中对猪流感做出了详细介绍。世卫组织说,猪流感是一种发生在猪身上的高度传染性急性呼吸道疾病,由猪流感病毒引起。猪流感在猪中的发病率较高,但死亡率较低,仅为1%至4%。猪流感在猪之间主要通过空气悬浮颗粒、直接或间接接触、携带猪流感病毒但无症状的猪传播。猪流感常年都可能发生,在温带地区秋冬季节发病率会更高。许多国家采取注射疫苗的方法预防猪流感。 猪流感病毒大多是A/H1N1型,但其他亚型也会在猪中传播,例如H1N2、H3N1、H3N2。其中,H3N2型被认为
的变异红细胞凝集素( H0 、 H1 、 H2 、 H3 )和神经氨(糖)酸苷酶( N1 、 N2 )的膜抗原。韦伯斯特( R. G. Webster)用人、鸡、猪、马等流感病毒的膜抗原进行遗传杂交而获得了稳定的新毒株。他认为这是流感之所以一再流行的原因。分离株的命名是依次记载它的型号、自然宿主、亚型、分离地点、分离编号、分离年代( H抗原型、 N抗原型)。例如 1968年在香港分离到的流行株记载为: A/人( human)/ 3/香港( Hong Kong)/ 1/ 68( H3 N2
,其中规定了确诊病例的诊断方法:具有急性发烧呼吸道疾病的临床症状并且经实时荧光定量PCR (real-time RT-PCR)或病毒分离培养 (viral culture)实验室检测方法检验证实感染A(H1N1)型猪流感病毒。卫生部办公厅于4月30日印发了《人感染猪流感预防控制技术指南(试行)》的通知》[7],其中在实验室检测和病例诊断报告章节,内容如下:检测程序呼吸道标本应首先应用real time RT-PCR方法检测A型流感病毒的M基因、Swine( H1N1)的HA基因和NP基因,以及质控对照
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