猪肺炎支原体荧光PCR检测试剂盒厂商

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北京百奥莱博致力于最快速、最有效的检测产品，包括猪肺炎支原体荧光PCR检测试剂盒厂商在内的动物疫病PCR检测试剂盒产品是我公司倾力打造的优势产品，欢迎选购。

名称：猪肺炎支原体荧光PCR检测试剂盒厂商
编号：SYA487
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口

除猪肺炎支原体荧光PCR检测试剂盒厂商外，我公司正在打折促销以下产品：
298-93-1 MTT 噻唑兰
曲拉通x-114 Sudan Ⅰ 9036-19-5
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ARB12108 大鼠可溶性CD40配体(sCD40L)含量测试 Rat soluble cluster of differentiation 40 ligand,scd40l ELISA KIT
CYB164030 兔抗牛IgG(1：500～1000)-HRP
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Masson-Fontana黑色素染色液   3×50ml|3×100ml
PY02-326  PALCAM琼脂基础  250克  
SJ0853 鸡血清
5704-04-1 Tricine  三(羟甲基)甲基甘*酸
λ DNA HindIII 
F010206 小鼠抗猪IgG抗体 Monoclonal Mouse Anti-Pig IgG
ARB13517 鱼类皮质醇(CortIsol)Elisa方法检测 Fish cortisol ELISA KIT
*化乙酰胆碱 N-Acetyl-DL-Methionine 66-23-9
ARB10669 人血管紧张素Ⅱ受体2(AT2R)代做ELISA实验 Human angiotensin Ⅱ receptor 2,at2r ELISA KIT
3-*杀螨醇 5-Aminofluorescein 115-32-2
ARB14224 猪蓝耳病抗体(PRRS-Ab)血清中含量检测 
P:C:I(25:24:1,pH﹥7.8)   100ml
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·登革热病毒Ⅱ型单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA226
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·牛种布鲁氏菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA117
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·小肠结肠炎耶尔森菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA065
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·新疆出血热病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA243
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·驴源性成分单重荧光PCR检测试剂盒(定量)
编号：SYA306
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·禽流感病毒N9亚型(AIV-N9)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA374
等级：科研实验专用
规格：48次/盒|96次/盒

·甲型H1N1/甲型流感病毒双重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA166
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
一、简介
本试剂盒用一对甲型流感病毒特异性引物，一对甲型H1N1特异性引物，分别结合一条特异性荧光探针，用一步法双重荧光RT-PCR技术对甲型流感病毒RNA、流感H1N1病毒RNA进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。本试剂盒中甲型流感病毒的探针报告基团为VIC/HEX/JOE，流感H1N1病毒的探针报告基团为FAM。

二、用途：
本试剂盒适用于检测各种咽拭子、鼻拭子、泄殖腔拭子、组织样品等临床样品中甲型流感病毒和H1N1亚型流感病毒。可用于甲型流感病毒和H1N1亚型感染的辅助诊断、监测及流行病学调查，其检测结果仅供参考。

二、试剂盒组成(48T)
组份 数量 规格
甲型流感/H1N1荧光qRT-PCR反应液(IAV-A/H1N1-qRT-PCR MIX) 1管 672μL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
无核酸酶水(Nuclease-Free Water) 1管 500μL/管
阴性对照(NTC) 1 管 50μL/管
阳性对照(IAV-A/H1N1-PTC) 1 管 50μL/管

四、储存条件及有效期：
本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为6个月。

五、荧光PCR仪器适用范围：
ABI7500荧光定量PCR检测仪。

六、样品的采集与RNA提取
6.1 样品的采集
按照相关标准采集。标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-70℃。但不能超过6个月，标本运送应采用0℃冰壶。
6.1.1 血清：用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL，注入无菌的干燥玻璃管，室温(22-25℃)放置30-60min，血标本可自发完成凝集析出血清，或直接使用水平离心机，3000rpm离心5min，吸取上层血清，转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.2 血浆：用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL，注入含EDTA2Na(乙二*(代"胺")四乙酸二*)或柠檬酸*抗凝剂的玻璃管，立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次，使抗凝剂与静脉血充分混匀，5-10min后即可分离出血浆，转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.3 拭子、分泌物等样品：在装有拭子或分泌物的离心管中加入500µL PBS或生理盐水，剧烈振荡30s。棉拭子尽量挤出液体转移到无RNA酶污染的离心管中，6000rpm离心20s，取上清备用。
6.1.4 病灶组织样品：称取组织约0.1g于研磨器或组织匀浆器中研磨(最好置于冰上或加入液氮)，再加1mL生理盐水研磨至无块状物，然后将样品转至1.5mL灭菌离心管中，8000rpm离心2min，取上清液于1.5mL灭菌离心管中。
6.2 样品RNA提取
可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的RNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光RT-PCR反应液(IAV-A/H1N1-RT-PCR MIX)、酶混合液(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合液 1 µL N×1 µL
总量 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(IAV-A/H1N1-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。总体系20µL。
7.2 real time RT-PCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
反转录(Reverse Transcription) 1循环 45℃ for 10 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 45 sec
在60℃延伸时收集荧光信号 报告基团：设置为FAM和VIC(若仪器无VIC通道，可选择HEX或JOE通道)。其中FAM基团检测H1N1，VIC/HEX/JOE基团检测IAV-A，淬灭基团均为None，请勿选择ROX参比荧光。

八、结果分析
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
（1） 阴性对照(NTC)：FAM和VIC/HEX/JOE通道全部阴性。
（2） 阳性对照(IAV-A/H1N1-PTC)：FAM和VIC/HEX/JOE通道均有扩增曲线。
（3） 以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
（1） FAM通道：Ct值≤35 H1N1亚型流感病毒核酸为阳性；Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明H1N1亚型流感病毒核酸阴性。Ct值在35-40个循环之间，为灰区，需要进行重复试验。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明H1N1亚型流感病毒核酸阳性；否则判为样本阴性。
（2） HEX/VIC/JOE通道：Ct值≤35 甲型流感病毒核酸为阳性；Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明甲型流感病毒核酸阴性。Ct值在35-40个循环之间，为灰区，需要进行重复试验。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明甲型流感病毒核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
（1） 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
（2） 所有使用的离心管最好高压灭菌，而且必须不含RNA酶。
（3） PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
（4） 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
（5） 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。



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PY02-348  脑心浸液培养基  100克  
3-*丙*(代"酸") Fmoc-L-valine 501-52-0
ARB12814 小鼠乙型肝炎核心抗体(HBcAb)酶标法分析 Mouse hepatitis b virus core antibody,hbcab ELISA KIT
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多聚甲醛-戊二醛混合固定液(4%/1%)   500ml
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ARB12333 大鼠卵泡抑素(FS)定量分析 Rat follistatin,fs ELISA KIT
ARB13664 兔可溶性凋亡相关因子(sFAS/Apo-1)ELISA检测服务 Rabbit soluble factor-related apoptosis,sfas/apo-1 ELISA KIT
橄榄油 Polyquaternium-10 8001-25-0
ARB10839 人抗肾上腺皮质抗体(AAA)检测服务 Human anti-adrenocortical antibody,aaa ELISA KIT

北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒，更多试剂产品需求，欢迎来电咨询选购猪肺炎支原体荧光PCR检测试剂盒厂商。