北京丙型流感病毒荧光PCR检测试剂盒现货价格

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名称：北京丙型流感病毒荧光PCR检测试剂盒现货价格
规格：48次/盒
编号：SYA164
等级：科研试剂
产地：国产|进口

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·羊口蹄疫亚I型抗体ELISA检测试剂盒
编号：SYA666
等级：科研实验专用
规格：96次/盒

·空肠弯曲菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA010
英文名称：Fluorescent PCR detection kit for Campylobacter jejuni
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·猪种布鲁氏菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA118
英文名称：Fluorescent PCR detection kit for Campylobacter jejuni
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·禽马立克氏病病毒(MDV)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA360
英文名称：Fluorescent PCR detection kit for Campylobacter jejuni
等级：科研实验专用
规格：48次/盒|96次/盒
一、简介：
本试剂盒用一对禽马立克病病毒特异性引物，结合一条特异性探针，用荧光PCR技术对禽马立克病病毒DNA进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染动物的病原学诊断。

二、用途：
该试剂盒适合于检测肿瘤组织、病变淋巴结、肝、肾、脾组织等样本中的禽马立克病病毒，用于禽马立克病毒病病毒(MDV)感染的辅助诊断，其检测结果仅供参考。

三、试剂盒组成：(48T)
组份 数量 规格
MDV反应液(MDV-qPCR MIX) 1管 672μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
MDV阳性对照(MDVPTC) 1管 50μL/管

四、储存条件及有效期：
本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为6个月。

五、荧光PCR仪器适用范围：
ABI系列，Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。

六、样品的采集与DNA提取
6.1 样品的采集
剪取肿瘤组织、病变淋巴结组织。
6.2 样品前处理
组织样品：每份组织分别从3个不同的位置称取样品约1g，手术剪剪碎混匀后取0.05g于研磨器中研磨，加入1.5mL生理盐水后继续研磨，待匀浆后转至1.5mL灭菌离心管中，8000rpm离心2min，取上清液100μL于1.5mL灭菌离心管中。
6.3 DNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液，按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(MDV-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(MDV-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃ 延伸时收集荧光信号 。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX 参比荧光。

八、结果分析
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
（1） 阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
（2） 阳性对照(MDV-PTC)：均产生扩增曲线。
（3） 以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
（1） 在试验成立的条件下，Ct值≤35，且曲线有明显的指数增长曲线，表明MDV核酸阳性。
（2） Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明MDV核酸阴性。
（3） 如果Ct值>35，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
（4） 对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行MDV 检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明MDV核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
（1） 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
（2） 所有使用的离心管最好高压灭菌，而且必须不含DNA酶。
（3） PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
（4） 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
（5） 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。



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83-79-4 鱼藤酮 Rotenone
66-22-8 Uracil   尿嘧啶
葡萄糖-6-磷酸脱*酶(G6PD)检测试剂盒(简易微板法)   100T
ARB10448 人甲酰甲硫*酸(fMet)elisa测定使用说明书 Human formylmethionine,fmet ELISA KIT
FMOC-L-甘*酸 Dibenzo-18-crown-6 29022-11-5
电解脱*液(甲*(代"酸")法)   500ml
ARB11672 人维生素D结合蛋白(DBP)尿液中含量检测 Human vitamin d-binding protein,dbp ELISA KIT
F030807 BIOTIN标记山羊抗小鼠IgG2b抗体 Goat Anti-Mouse IgG2b*BIOTIN
CYB164011 羊抗人IgG(1：500～2000)-HRP
ARB12748 小鼠CD19分子(CD19)Elisa分析 Mouse cluster of differentiation 19,cd19 ELISA KIT
7365-45-9 N-2-哌*(代"嗪")-N"-2-乙磺酸 HEPES
BL1289 8％多聚甲醛
*氧乙酸 Acid blue 1 122-59-8
MES buffer(0.1mol/L,pH4.7)   100ml
F030409 胶体金标记山羊抗小鼠IgG3抗体 Goat Anti-Mouse IgG3*GOLD
BL0965 封闭绵羊血清正常(原液) 10ml
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·肺炎支原体单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA035
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·禽流感通用型/新城疫病毒(AIV-M和NDV)通用型双重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA378
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·博卡病毒(HBocaV)/偏肺病毒(HMPV)双重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA189
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
本试剂盒适用于各种咽拭子、鼻拭子样品等临床样品中偏肺病毒/博卡病毒的特异性检测。适用于偏肺病毒/博卡病毒感染的辅助诊断、监测及流行病学调查，其检测结果仅供临床参考。

本试剂盒用一对偏肺病毒型特异性引物，一对博卡病毒型特异性引物，分别结合一条特异性荧光探针，用一步法双重荧光RT-PCR 技术对偏肺病毒/博卡病毒RNA 进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。本试剂盒中偏肺病毒型的探针报告基团为FAM，博卡病毒型的探针报告基团为VIC/HEX/JOE。

试剂盒组成：

 

组份	数量	规格
偏肺病毒/博卡病毒反应液(HMPV/HBocaV-qRT-PCR MIX)	1管	576μL/管
qRT酶混合物(qRT Enzymes MIX)	1管	192μL/管
无核酸酶水(Nuclease-Free Water)	1管	500μL/管
阴性对照(NTC)	1管	50μL/管
偏肺病毒/博卡病毒阳性对照(HMPV/HBocaV-PTC)	1管	50μL/管

储存条件：-20℃以下，有效期6个月。

使用方法：

一、样品采集：
按照相关标准采集。标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-80℃，但不能超过6个月，标本运送应采用0℃冰壶。
➤血清：用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL，注入无菌的干燥玻璃管，室温(22-25℃)放置30-60min，血标本可自发完成凝集析出血清，或直接使用水平离心机，3000rpm离心5min，吸取上层血清，转移至1.5mL灭菌离心管。
➤血浆：用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL，注入含EDTA2Na(乙二*(代"胺")四乙酸二*)或柠檬酸*抗凝剂的玻璃管，立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次，使抗凝剂与静脉血充分混匀，5-10min后即可分离出血浆，转移至1.5mL灭菌离心管。
➤拭子、分泌物等样品：在装有拭子或分泌物的离心管中加入500μL PBS或生理盐水，剧烈振荡30s。棉拭子尽量挤出液体转移到无RNA酶污染的离心管中，6000rpm离心20s，取上清备用。
➤病灶组织样品：称取组织约0.1g于研磨器或组织匀浆器中研磨(最好置于冰上或加入液氮)，再加1mL生理盐水研磨至无块状物，然后将样品转至1.5mL灭菌离心管中，8000rpm离心2min，取上清液于1.5mL灭菌离心管中。

二、RNA提取：
可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的RNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取4μL 加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

三、检测步骤：
1．试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qRT-PCR 反应液(HMPV/HBocaV-qRT-PCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm 离心10s。
设所需要的PCR 反应管管数为N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：

试剂	每个反应加入的量	N个反应加入的量
荧光PCR反应液	12µL	N×12µL
酶混合物	4µL	N×4µL
总量	16µL	N×16µL

计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm 离心10s，向设定的N 个PCR 反应管中分别加入16μL，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(HMPV/HBocaV-PTC)4μL，10000rpm 瞬时离心10 秒。
2．qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件：

	反转录(Reverse Transcription)	1循环	50℃ for 30 min
预变性	1循环	95℃ for 5 min
PCR扩增	40循环	95℃ for 10 sec 55℃ for 45 sec

在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM和VIC(若仪器无VIC通道，可选择HEX或JOE通道)。其中FAM基团检测HMPV，VIC/HEX/JOE基团检测HBocaV。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

四、结果分析：
1．结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
2．试验成立判定
➤阴性对照(NTC)：FAM和VIC/HEX/JOE通道均无扩增。
➤阳性对照(HMPV/HBocaV-PTC)：FAM和VIC/HEX/JOE通道均有扩增。
➤以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效
3．结果判定
➤FAM通道：Ct值≤35HMPV核酸为阳性；Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明HMPV核酸阴性。
Ct值在35-40个循环之间，为灰区，需要进行重复试验。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明HMPV核酸阳性；否则判为样本阴性。
➤VIC/HEX/JOE通道：Ct值≤35 HBocaV核酸为阳性；Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明HBocaV核酸阴性。Ct值在35-40个循环之间，为灰区，需要进行重复试验。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明HBocaV核酸阳性；否则判为样本阴性。

五、注意事项：
➤初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
➤所有使用的离心管最好高压灭菌，而且必须不含RNA 酶。
➤PCR 操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR 扩增区等)，防止实验室污染。
➤样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
➤试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。

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