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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖重亚硫*(代"酸")盐转化试剂盒价格厂家在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:重亚硫*(代"酸")盐转化试剂盒价格厂家
编号:SV1580
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
特性:
完全转化未修饰的胞嘧啶为尿嘧啶
简单明了的实验步骤
稳定可靠的结果
提供纯化柱
概述:
重亚硫*(代"酸")盐转化试剂盒可以检测每个胞嘧啶基团的甲基化状态,并可根据大规模测序要求进行相应调整。该试剂盒能将未修饰的胞嘧啶转化为尿嘧啶,而 5-mC 和 5-hmC 修饰的胞嘧啶则不被改变。借助在重亚硫*(代"酸")*中进行加热、变性交替循环处理,重亚硫*(代"酸")盐转化试剂盒可以检测到甲基化修饰的胞嘧啶。试剂盒提供所有试剂包括离心柱。经重亚硫*(代"酸")盐处理后的样本,可用 EpiMark 热启动 Taq DNA 聚合酶进行扩增。
重亚硫*(代"酸")盐转化试剂盒包含以下组份:
– 偏重亚硫*(代"酸")*
– 溶解缓冲液
– 脱磺化反应缓冲液
– 离心柱及 2 ml 收集管
– 结合缓冲液
– 洗涤缓冲液
– 洗脱缓冲液
欲了解更多重亚硫*(代"酸")盐转化试剂盒价格厂家的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:
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文献和实验引物(红色星号=突变核苷酸,灰色线条 = 删除的序列,蓝色线条 = 插入的序列)。也可考虑使用其他引物设计,如具有 5′ 重叠序列的引物[4-6]。 图 6.使用含突变序列和同源末端序列的 PCR 引物进行的定点突变。该图所示方法阐述了 Invitrogen™ GeneArt™ 定点突变试剂盒的机制,其中,方块代表重组和突变位点。 5.甲基化 PCR 可用于研究位点特异性甲基化。在 甲基化特异性 PCR(MSP)方法中,设计了两个引物对,以区分目标位点的甲基化状态[7,8]。 首先使用重亚硫酸盐处理
脱氨基转变成尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶保持不变(见图1),行PCR扩增所需片段,则尿嘧啶全部转化成胸腺嘧啶,最后,对PCR产物进行测序并且与未经处理的序列比较,判断是否CpG位点发生甲基化。此方法是一种可靠性及精确度很高的方法,能明确目的片段中每一个CpG位点的甲基化状态,但需要大量的克隆测序,过程较为繁琐、昂贵[27]。 图1:重亚硫酸盐处理过程示意图。DNA经重亚硫酸盐处理后,甲基化的胞嘧啶不变,未甲基化的胞嘧啶转变为尿嘧啶 2.2.3 甲基化特异性的PCR(methylation
LightCycler通过实时荧光PCR技术进行DNA甲基化分析
的定量。 更多有关特定CpG位点的甲基化的详细信息,可采用重亚硫酸氢盐修饰后测序分析。 LightCycler主要应用:实时荧光PCR技术进行快速准确的DNA甲基化分析 我们使用罗氏诊断公司的LightCycler®480高分辨熔解扩增试剂盒在LightCycler®480实时荧光PCR仪上,通过MS-HRM测定法对两种已知的经过启动子(FANCE和MGMT)甲基化的DNA修复基因的检测性能。 材料和方法 将多种细胞株的DNA样本作为检测模板。每μg的每种DNA样本都经过重亚硫酸盐修饰
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