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- 详细信息
- 技术资料
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544
- 英文名:
DNA Purification Kit
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
室温
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京DNA产物纯化试剂盒价格,我公司是生物试剂、化学试剂专业供应商,立足北京,服务全国的高校、研究所、医院、企业科研部门,欢迎各位老师来电垂询订购。
名称:北京DNA产物纯化试剂盒价格
品牌:百奥莱博
英文名:DNA Purification Kit
规格:50T|100T
DNA产物纯化试剂盒采用独特的离心吸附柱纯化酶切、PCR等反应液中的DNA片段,同时除去蛋白质、其他有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。使用DNA产物纯化试剂盒可回收100bp-40kb 大小的DNA片段,回收率可达80%以上(小于100bp和大于10kb的DNA片段回收率为30~50%)。使用DNA产物纯化试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、文库筛选、连接和转化等试验。
储存条件:室温
更多有关北京DNA产物纯化试剂盒价格的价格及使用说明等,请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·SDS(十二烷基硫*(代"酸")*)
编号:QN0244
英文名称:Sodium dodecylsulfate
规格:100g|500g
本品SDS主要用于从蛋白质中分离核酸,从宿主细胞中脱落某些病毒;蛋白电泳试剂,也可用于质粒提取。
别名:月桂基硫*(代"酸")*;十二烷基硫*(代"酸")**
CAS号:151-21-3
分子式:C12H25O4SNa
分子量:288.38
储存条件:密封阴凉干燥保存
性状:白色粉末
SDS生物学应用:
(1)SDS是阴离子表面活性剂常用于蛋白质和类脂类的电泳分离。当其与蛋白质混合,质量比达到1.4:1时,SDS能破坏蛋白质分子间以及其他物质分子间的非共价键使蛋白质的构象发生变化继而使蛋白质变性解离成单一亚基,从而降低或消除了各种蛋白质分子间的天然电荷差异。电泳常用10%的SDS作为储备液。
(2)SDS可以迅速破坏组织结构,抑制RNase和脱氧核糖核苷酶(DNase)活性,所以SDS也是核酸纯化试剂的关键组分。通常使用10%或者20%的SDS储备液,SDS的工作浓度是0.1-0.5%。
SDS贮存条件:密封阴凉干燥保存;
SDS毒性:低毒,大鼠经口半数致死量为1288mg/kg。有刺激性。
北京DNA产物纯化试剂盒价格关键词:DNA产物纯化试剂盒,QN0929,DNA Purification Kit
·DNA琼脂糖凝胶回收试剂盒
编号:QN0897
英文名称:DNA Extraction Kit
规格:50T|100T
本试剂盒采用可以高效、专一结合DNA的硅基质材料和独特的缓冲液系统,从TAE或TBE琼脂糖凝胶上回收DNA片段,同时除去蛋白质、其它有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。可回收100bp–40kb大小的片段,回收率大于80%(<100bp和>10kb 的DNA片段回收率为30-50%)。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、文库筛选、连接和转化等实验。
注意事项:
1、电泳时最好使用新的电泳缓冲液,以免影响电泳和回收效果,如下一步实验要求较高,则应尽量使用TAE电泳缓冲液。
2、切胶时,紫外照射时间应尽量短,以免对DNA造成损伤。
3、回收<100bp及>10kb的DNA片段时,应加大溶胶液的体积,延长吸附和洗脱的时间。
4、回收率与初始DNA量和洗脱体积有关,初始量越少、洗脱体积越小,回收率越低。
5、如非指明,所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
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·罗丹明标记鬼笔环肽
编号:QN0267
英文名称:TRITC Phalloidin
规格:300T
本品为TRITC标记的鬼笔环肽,染色反应特异性强,对比性高,具有比Actin抗体更好的染色效果,适合用作F-actin的定性和定量检测。另外,经本品结合后的F-actin仍能维持actin自身具有的许多生物学特性。且本品的结合没有物种差异性,适用性广泛。
别名:罗丹明鬼笔环肽
分子式:C60H70N12O13S2
分子量:1231.4
性状:紫色粉末(冻干粉)
鬼笔环肽(Phalloidin)是一种来源于毒蕈类鬼笔鹅膏的环状七肽毒素,以高亲和力(Kd= 20 nM)选择性结合于丝状肌动蛋白F-actin,而不会与单体肌动蛋白G-actin结合,通常用来标记组织切片,细胞培养物或无细胞体系中的F-actin,从而对F-actin进行定性和定量分析。另外,鬼笔环肽衍生物也以相近的亲和力结合于大小纤维,无论是动植物来源的肌肉细胞或非肌肉细胞,按照每一个肌动蛋白亚基约与一个鬼笔环肽分子的计量比结合。且非特异性结合几乎可忽略,染色区域和非染色区域辨识度非常明显。因此,鬼笔环肽衍生物特别适合替代肌动蛋白(Actin)抗体进行相关研究。另外鬼笔环肽衍生物很小,直径约12-15Å,分子量<2000 Daltons,未标记肌动蛋白(Actin)的许多生理特性都得以维持,比如,同肌动蛋白结合蛋白如肌球蛋白,原肌球蛋白,DNase I等仍能发生反应;鬼笔环肽标记的纤维丝仍可穿透固相肌球蛋白基质;以及甘油抽提的肌纤维标记后仍可收缩等。
鬼笔环肽(Phalloidin)的结合阻止丝状肌动蛋白(微丝)的解离,稳定微丝结构,从而破坏微丝的聚合-去聚合的动态平衡。此特性使得肌动蛋白聚合发生的临界浓度(CC)降至<1µg/mL,因此,可用作一种聚合促进剂。此外,鬼笔环肽还可抑制F-actin的ATP水解活性。
1. 工作液准备
本品以溶于甲醇的 20µM 储存液形式提供,总量为 300µl。按照 100 nM 的工作液浓度来换算,可制备总量为 60ml 的工作液。建议收到产品后,根据单次使用量,对母液进行小量分装,-20℃避光冻存,一年稳定。开始实 验前,使用 1×PBS 缓冲液稀释储存液到需要的工作浓度。推荐工作浓度为:80~200nM。现配现用。
2. 染色步骤
1) 细胞爬片生长 24h,使其密度达到 50%汇合度。
2) 吸掉培养液,37℃预热的 1×PBS(pH 7.4)清洗细胞 2 次。
3) 使用溶于 PBS 的 4%甲醛溶液进行细胞固定,室温固定 10min。 注意:避免固定剂中含有甲醇成分,因为甲醇在固定过程中可能破坏肌动蛋白。
4) 室温条件下,用 PBS 清洗细胞 2~3 次,每次 10min。
5) 室温条件下,用丙*(代"酮")(≤-20℃)脱水或者用 0.5% Triton X-100 溶液透化处理 5min。
6) 室温条件下,用 PBS 清洗细胞 2~3 次,每次 10min。
7) 取 200µl 配制好的 TRITC 标记鬼笔环肽工作液,覆盖住盖玻片上的细胞,室温避光孵育 30min(通常情况下, 4℃~37℃孵育皆可)。 注意:为了降低背景,可于 TRITC 标记的鬼笔环肽工作液内加入 1% BSA;另外,孵育过程中为了避免溶液挥 发,可将盖玻片转移到一个密封的容器内。
8) 用 PBS 清洗盖玻片 3 次,每次 5min。
9) 使用 200µl DAPI 溶液(浓度:100 nM)对细胞核进行复染,约 30s。
10) 用 PBS 清洗盖玻片,然后倒置在已经滴有一滴 Fluoromount-GTM 水溶性封片剂的载玻片上。使用纸巾轻轻檫 掉多余封片剂,然后用指甲油永久封片。此法制备的标本玻片可置于 4℃避光保存,通常 6 个月内可继续做 F-actin 染色分析。 注意:也可以直接使用含有 DAPI 的抗荧光淬灭封片剂合并步骤 9)10),简化步骤。
11) 荧光显微镜或者共聚焦显微镜下进行荧光观察,选择 TRITC 激发/发射滤片(Ex/Em=540/570nm)和 DAPI 激 发/发射滤片(Ex/Em=364/454nm)。
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