快速核酸银染试剂盒优惠促销

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北京百奥莱博专业生产销*(代"售")快速核酸银染试剂盒优惠促销，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：快速核酸银染试剂盒优惠促销
产地：国产|进口
编号：SY0274
英文名：Rapid Silver Stain Kit for Nucleic Acid
分子生物学实验中，常利用银染的方法显示聚丙*(代"烯")酰胺凝胶或者琼脂糖凝胶中的核酸条带，其检测原理是：银离子(Ag+）可与核酸形成稳定的复合物，随后Ag+ 在碱性环境下被还原剂如甲醛还原成银颗粒，后者通过显色可把核酸电泳条带染成黑褐色。该方法检测灵敏度比EB高达200倍，常用于检测SSR标记、SNP标记等。

常规的银染方法由固定、氧化、染色、显影、终止等若干个步骤组成，操作十分繁琐，尤其不适用于大批量实验。而本品的推出可大大改善上述问题，主要体现在：1）超快速，整个过程仅需20分钟；2）操作简单，只有染色和显影两步；3）灵敏度跟常规方法相当，比EB高200倍，能检测到10ng的DNA条带。4）两个成分都是现用现配，可重复性好。

按照本方案提供的配制方法，共可配制试剂A和试剂B分别1000ml。

产品组份：

 

组分名称	规格	外观
试剂A 1	2g	干粉
试剂A 2（10×）	100ml	液体
试剂A 3（10×）	100ml	液体
试剂B 1（10×）	100ml	液体
试剂B2	5ml	液体

注意事项：
1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2）银染主要出现在PAGE胶的表面，因此该方法更适合用于薄胶（0.5-0.75mm）的检测。
3）染色过程中，缓慢的振荡是必要的，一般选择40-60 rpm。
4）凝胶表面的裂纹多是由于压力、手印及表面干燥所致，所以全程操作中都应带手套。
5）PAGE凝胶背景呈均一的黑色多是水中的杂质引起的，所以溶液的配制应使用电导率小于1 μS的去离子水。
6） 如果染色后有呈灰尘或烟雾状灰色或棕色的沉淀出现在凝胶表面，可能是几步漂洗过程不够彻底，或染色过程温度太低。
7）较深的银染背景多是丙*(代"烯")酰胺中的杂质所致。
8）室温操作时，温度的波动往往会干扰银染的效果，恒温水浴可以解决这个问题。
9）染色使用的玻璃器皿必须非常干净，用酸浸泡可以满足要求。
10）银染应尽快照相，随着时间延长，蛋白条带会变浅，而背景会加深。
11）影响硝酸*(代"银")染色效果的因素很多，其使用容器的材质也是一个非常重要的因素。通常玻璃平皿是最理想的银染容器，其化学性质极其稳定，几乎不与银染试剂中的任何成分发生反应，且不具有吸附染料的特性。其次是医用搪瓷盘，瓷釉为无机玻璃质材料，能耐各种浓度的无机酸(包括强氧化性酸)、有机酸、弱碱和强有机溶剂，但不耐酸、碱介质交替使用，而常规银染法就是酸碱介质交替使用，因此搪瓷盘银染效果不如玻璃平皿。塑料种类较多，如果塑料是由含*基官能团的有机物（脲、三聚*胺或*代三聚*胺）与醛类（主要是甲醛）化合物经缩聚反应而得，则这种塑料会在碱性溶液中与有强还原作用的甲醛发生反应，进而使甲醛消耗，减弱银离子与蛋白的结合，降低显色敏感度和显色速度。

操作方法

1 配制试剂A（以100ml为例）
所需要配制的试剂A（即染色液）的体积跟PAGE胶的大小相关，一般的mini-PAGE胶需要20-30mL。本方案以配制100mL试剂A为例进行详述，请根据具体凝胶大小，确定实际所需染色液用量，再按比例改变各组分用量。
以100ml试剂A为例，在一干净烧杯中加入下列组分搅拌混匀即可。试剂A需要新鲜配制。
去离子水：80 mL
试剂A1：0.2 g
试剂A2：10 mL
试剂A3：10 mL

2 配制试剂B（以100ml为例）
所需要配制的试剂B（即显色液）的体积跟PAGE胶的大小相关，一般的mini-PAGE胶需要20-30mL。本方案以配制100ml试剂B为例进行详述，请根据具体凝胶大小，确定实际所需试剂B用量，再按比例改变各组分用量。
以100ml 为例，在一干净烧杯中加入下列组分搅拌混匀即可。试剂B需要新鲜配制。
去离子水：89.5 mL
试剂B1：10 mL
试剂B2：0.5 mL

3 染色
1）PAGE电泳结束后，将PAGE胶转移到装有去离子水的瓷盘中，进行漂洗，2min/次，共2次。
2）将PAGE胶转移到适当体积的试剂A，使试剂A在轻柔摇晃过程中能够淹没PAGE胶。室温染色10min。
3）倒掉试剂A，用去离子水快速漂洗2次，每次30秒。
4）将PAGE胶转移到适当体积的试剂B，使试剂B在轻柔摇晃过程中能够淹没PAGE胶。室温摇晃直到颜色显现，一般需要10min左右。
5）将PAGE胶置于适当背景下照相。

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·第一链cDNA Synthesis Super Mix for RT-qPCR(+gDNA wiper)
编号：SY0292
英文名称：First Strand cDNA Synthesis Super Mix for RT-qPCR(+gDNA wiper)
规格：200T
本品基于Reverse Transcriptase ，该酶是在M-MLV (RNase H-) Reverse Transcriptase基础上经过多点突变得到的全新逆转录酶，热稳定性提高，在50℃下活性最高，且可耐受高达55℃的反应温度，适用于具有二级结构的RNA模板的逆转录，能稳定可靠地合成cDNA。

RNA模板首先用4×gDNA wiper Mix短暂处理，可彻底去除残留的基因组DNA污染，保证后续的定量结果更加可靠，并且可简化qPCR引物设计，无需跨外显子/内含子仔细设计；随后直接加入5×Super Mix II，即可立即进行逆转录。

5×Super Mix II中含有逆转录反应所需的所有组分 (Buffer、dNTP、Reverse Transcriptase、RNase inhibitor、Random primers/Oligo dT primer mix) ，并可同时终止4×gDNA wiper Mix，保证cDNA的完整性。RNA模板的体积最多可加到总体积的60%，非常适合于低浓度RNA模板的逆转录反应。4×gDNA wiper Mix和5×Super Mix II在-20℃不会冻结，使用方便。

该产品适用于两步法RT-qPCR检测，针对qPCR进行特别优化，比例优化的Random primers/Oligo dT primer mix，使cDNA合成可从RNA转录本的各个区域起始，最大程度保证了qPCR结果的可重复性。逆转录产物兼容SYBR Green和探针法qPCR。

产品组份：
RNase free ddH2O————1 ml×2
4×gDNA wiper Mix————400 μl
5×Super Mix IIa————400 μl
5×Control Mixb————40 μl

a 包含Buffer、dNTP、Reverse Transcriptase、RNase inhibitor、Random primers/Oligo dT primer mix。
注：与First Strand cDNA Synthesis Super Mix for RT-qPCR(SY0291)中的5×Super Mix成分不同，不可以混用。
b 除不含Reverse Transcriptase外，其余成分与5×Super Mix II相同，用于配制对照反应。

质量控制

所有组分经检测均无核酸外切酶，核酸内切酶，RNase残留。
功能检测：以1 pg-1 μg HeLa cell total RNA为模板，测试qRT-PCR性能。以6个数量级的模板量的对数值对Ct值做标准曲线，R2>0.990，斜率在-3.20到-3.60之间；在1 μg HeLa cell total RNA中混入100 ng human genomic DNA，经gDNA wiper Mix处理后，进行qRT-PCR，对照反应的Ct值>40。

储存条件：-20℃。


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·细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒
编号：SY0470
英文名称：Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit
规格：50T
细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒采用了经典的碘化丙啶染色(Propidium staining，即PI staining)方法进行细胞周期与细胞凋亡的分析。

碘化丙啶 (Propidium，PI) 是一种双链DNA荧光染料，其嵌入双链DNA后可以产生荧光，并且荧光强度和双链DNA的含量成正比。细胞内的DNA被PI染色后，可以用流式细胞仪对细胞进行DNA含量测定，根据DNA含量的分布情况，进行细胞周期和细胞凋亡分析。

PI染色后，假设G0/G1期细胞的荧光强度为1，那么含有双份基因组DNA的G2/M期细胞的荧光强度的理论值为2，正在进行DNA复制的S期细胞的荧光强度为1-2之间。凋亡细胞由于细胞核发生浓缩以及发生DNA片段化 (DNA fragmentation) 导致部分基因组DNA片断在染色过程中丢失，因此凋亡细胞PI染色后呈现明显的弱染，即荧光强度小于1，在流式检测的荧光图上出现所谓的sub-G1峰，即凋亡细胞峰。

细胞凋亡也可以用流式细胞仪观察细胞光散射的变化来检测。 细胞发生凋亡时，由于胞浆和染色质浓缩、核碎裂，产生凋亡小体，使细胞的光散射性质发生变化。凋亡前期，染色质皱缩，细胞密度增加，前向角光散射色显著降低。凋亡后期，细胞产生凋亡小体，前向角光散射和侧向角光散色都显著降低。

本试剂盒通常应用于培养的贴壁或悬浮细胞的细胞周期与细胞凋亡检测。如果用于组织的细胞周期与细胞凋亡检测，则必须把组织消化成单细胞状态，才可以进行检测。

注意事项

1）本试剂盒需要使用流式细胞仪进行检测。
2）细胞处理需轻柔，尽量避免人为的损伤细胞。
3）为防止不同批次细胞在实验时所处周期不同导致重复性差，可以在实验前进行细胞的同步化处理。实验细胞应处于对数生长期，贴壁细胞一般在50～80%汇合度时收集为宜。
4）400目筛网过滤是用来将粘在一起的细胞团滤掉，留下单细胞，否则会出现人为的多倍体干扰。如果没有条件过滤，请在染色之前将细胞轻弹以分散，再进行染色。
5）荧光染料均存在淬灭问题，保存和使用过程中请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

储存条件：-20℃，避光

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