通用型植物RNA提取试剂盒(Dnase I)优惠促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括通用型植物RNA提取试剂盒(Dnase I)优惠促销在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：通用型植物RNA提取试剂盒(Dnase I)优惠促销
品牌：百奥莱博
规格：50次
英文名：Universal Plant RNA Extraction Kit
产地：国产|进口
本试剂盒适用于快速提取植物组织RNA，使用独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶，然后用乙醇调节结合条件后，RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，DNase直接在柱上消化残留DNA，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物，蛋白等杂质去除， 最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。

试剂盒特点：
1.完全不使用有毒的Beta-巯基乙醇，*酚，*仿等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。
2.简捷，单个样品操作一般可在40分钟内完成，世界上最简单快速的试剂盒。
3.配套DNase I 柱上消化，得到的RNA不残留DNase消化，可直接用于反转录荧光定量PCR、二代测序、芯片、RACE等实验。
4.世界领先，是同类产品中适应性最广泛的试剂盒，可以提取包括水稻、玉米、小麦、拟南芥、番茄、烟草和一般多糖多酚如棉花、冬青等植物。
5.多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280典型的比值达1.9～2.2，无DNA残留,可直接用于荧光定量PCR、RT-PCR、芯片、二代测序、Northern-blot等各种实验。

试剂盒组份：

 

组份	50次
裂解液RPA	50ml
去蛋白液RW1	40ml
漂洗液RW	10ml
RNase-freeH2O	10ml
DNaseBuffer	1.25ml×2/td>
Rnase free DNaseI	0.25ml
吸附柱和收集管	50套

注意事项：
1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机。
2. 需要自备乙醇，研钵(可选)。
3. 裂解液RPA和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作时戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。

提示：第一次使用前请先在漂洗液RW 瓶加入指定量无水乙醇!

1. 直接研磨法（推荐）:
a. 新鲜植物组织称重后取100mg 迅速剪成小块放入研钵（冰冻保存或者液氮保存样品可直接称重后取100mg 放入研钵）， 加入1 ml 裂解液RPA 室温下充分研磨成匀浆，注意应该迅速研磨让组织和裂解液RPA 立刻充分接触以抑制RNA酶活性。
b. 将裂解物转入离心管，剧烈摇晃振荡15 秒，13,000rpm 离心5-10 分钟，沉淀不能裂解的碎片。
c. 取480μl 裂解物上清（在不超过RNA 吸附柱能力的情况下可以取更多或者全部上清，这样可以提高产量）转到一个新离心管。加入上清体积一半的无水乙醇(0.5 体积)，此时可能出现沉淀，但是不影响提取过程，立即吹打混匀，不要离心。
d. 立刻接操作步骤的步骤3。

2. 液氮研磨法:
a. 取500μl 裂解液RPA，转入1.5ml 离心管中。
b. 液氮中研磨适量植物组织成细粉后，取50mg 细粉转入上述装有RPA 的离心管, 立即用手剧烈振荡20 秒，充分裂解。
c. 用吸头吹打混匀帮助裂解或者剧烈涡旋震荡直到得到满意匀浆结果(或者电动匀浆30 秒)，可以剪切DNA，降低粘稠度和提高产量。
d. 将裂解物13000rpm 离心5-10 分钟，沉淀不能裂解的碎片。
e. 取裂解物上清（在不超过RNA 吸附柱能力的情况下可以取更多的上清，这样可以提高产量）转到一个新离心管。加入上清体积一半的无水乙醇(0.5 体积)，此时可能出现沉淀，但是不影响提取过程，立即吹打混匀，不要离心。
f. 立刻接操作步骤的步骤3。
注意：以上液氮研磨法用户可以根据需要加倍处理，可以提高产量。也就是使用1ml 的裂解液RPA和100mg的样品。

3. 将混合物(每次小于720μl，多可以分两次加入)加入一个吸附柱 中，（吸附柱放入收集管中）13000rpm 离心2 分钟，弃掉废液。确保离心后液体全部滤过去，膜上没有残留，如有必要，可以加大离心力和离心时间。

4. 加350μl 去蛋白液RW1，室温放置1 分钟，13,000rpm 离心30 秒，弃掉废液。

5. DNase I 工作液配制：取45μl DNase I buffer 和5μl RNase free DNase I 在离心管轻轻吹打混匀成工作液（处理多个离心柱子要按照比例放大制备工作液）。

6. 向吸附柱 中央加入50μl 的DNase I 工作液，室温（20-30℃）放置15 分钟。
注意：直接将工作液滴在膜中央上，不要让工作液滴在O 型圈或是离心柱管壁上。

7. 向吸附柱 中加入350μl 去蛋白液RW1， 12000rpm 离心30 秒，弃废液，将吸附柱放回收集管中。

8. 加入500μl 漂洗液RW（请先检查是否已加入无水乙醇!），13000rpm 离心30秒，弃掉废液。加入500μl 漂洗液RW，重复一遍。

9. 将吸附柱 放回空收集管中，13000rpm 离心2 分钟，尽量除去漂洗液， 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。

10. 取出吸附柱，放入一个RNase free 离心管中，根据预期RNA 产量在吸附膜的中间部位加30-50μl RNase free water（事先在70-90℃水浴中加热可提高产量），室温放置1 分钟，12000rpm 离心1 分钟。

11. 如果预期RNA 产量>30μg，加30-50μl RNase free water 重复步骤10，合并两次洗液，或者使用第一次的洗脱液加回到吸附柱重复步骤一遍(如果需要RNA 浓度高)。

洗脱两遍的RNA洗脱液RNA浓度高,分两次洗脱合并洗脱液的RNA产量比前者高15–30%，但是浓度要低，用户根据需要选择。

注意：如果不需要做荧光定量PCR，仅仅做普通的反转录，克隆基因片段，可以省略DNA 酶柱上消化的步骤，具体就是第4 步骤的“加350μl 去蛋白液RW1”改成“加700μl 去蛋白液RW1”，同时省略步骤5，6，7。

储存条件：室温，有效期12个月(DNase I及其Buffer需-20℃保存)

本品别名：通用型植物RNA提取试剂盒(Dnase I)|植物通用RNA提取试剂盒|通用植物RNA提取试剂盒|通用植物RNA纯化试剂盒

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·miRNA荧光定量PCR检测试剂盒
编号：ALH190
英文名称：miRNA fluorescent quantitative PCR detection kit
规格：50μl×50次
本试剂盒采用SYBR Green I 嵌合荧光法的原理进行miRNA 荧光定量检测。本试剂盒包含miRNA 荧光定量检测的所有试剂，包括2×miRNA qPCR Mix和Reverse primer。2×miRNA qPCR Mix（含Sybr Green）是专门为miRNA 定量检测而研发的新一代预混形式的荧光定量PCR 检测试剂，其中的DNA polymerase 采用的是抗体修饰的热启动形式， 配合特殊的Buffer 体系，使反应特异性更好，灵敏度更高，并能在更广的范围内进行准确定量。（该试剂盒须与miRNA对应cDNA第一链合成试剂盒（ALH189）配套使用。）

试剂盒组分(25次)：
2 x miRNA qPCR Mix(With Sybr Green)———————1.25 ml
Reverse primer(10μM)——————————————55μl

需自备的试剂：
1. 分子生物学实验级别的水（无核酸酶）
2. 待检测miRNA对应的qPCR上游引物（Forward primer）

Forward Primer设计原则：
1. 遵循引物设计的最普遍原则。
2. 以成熟的miRNA 序列为基础，将U替换成T，这是最基础和最简单的设计方法。
3. 试剂盒中提供的下游引物的Tm 值为65℃，设计上游引物的Tm 值要尽量保证在65℃左右。
4. 若按照原则2 的方式直接设计的引物其Tm 值过低，可以在引物的5’端添加几个碱基（最好为G或C碱基）；也可以在’3端添加1 个或几个A 碱基；或者5’端和3’端同时修饰。
5. 若按照原则2 的方式直接设计的引物其Tm 值过高，可以在引物的5’或3’端去掉几个碱基。

注意事项：
1. miRNA 第一链cDNA 的加入量不要超过real time PCR 体积1/10。
2. 对于特殊的检测体系中，高含量的cDNA 模板易导致非特异性扩增，根据所检测miRNA 的丰度适当的稀释cDNA（10倍或者100倍）。
3. 本品中含有荧光染料Sybr Green，I保存本品或配制PCR 反应液时应避免强光照射。
4. 2×miRNA qPCR Mix不含参比染料ROX，客户并根据qPCR仪器技术指导决定是否需要加ROX参比染料，用于消除信号本底以及校正孔与孔之间产生的荧光信号误差。

储存条件：-20℃，有效期6个月。


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·微量样品RNA提取试剂盒
编号：ALH022
英文名称：Total RNA Extraction Kit From a small amount of sample
规格：50次
本试剂盒最小处理量可以处理10个以上的组织细胞。本试剂盒是在无*酚、*仿RNA快速提取技术基础上，采用基因组DNA清除柱技术确保有效清除gDNA残留，得到的RNA不需要DNase消化，可直接用于PCR、荧光定量PCR等实验。独特的裂解液迅速裂解微量样品的细胞和灭活细胞RNA酶，然后裂解混合物通过一个基因组DNA清除柱，基因组DNA被清除而RNA穿透滤过。滤过的RNA用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于特制离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物，蛋白等杂质去除， 最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。

试剂盒组份：
裂解液RLT Plus—————————20 ml
去蛋白液RW1———————————40ml
漂洗液RW————————————10ml
RNase-free H2O—————————10ml
70%乙醇————————————10ml RNase-free H2O
Carrier RNA——————————310μg
基因组DNA清除柱和收集管————50套
RNA吸附柱和收集管———————50套
微量研磨杵———————————3根

储存条件：室温，有效期半年。(Carrier RNA需-20℃保存)

产品特点：
1.完全不使用有毒的*酚，*仿等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。
2.快速，简捷，单个样品操作一般可在30分钟内完成。
3.独特研发成功基因组DNA清除柱技术确保有效清除gDNA残留，得到的RNA不需要DNase消化，可直接用于PCR、荧光定量PCR等实验。
4.多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280典型的比值达1.9～2.0，基本无DNA残留,可用于RT-PCR，Northern-blot和各种实验。

注意事项：
注意事项
1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 样品处理量绝对不要超过基因组吸附柱和和RNA吸附柱处理能力，否则造成DNA残留或者产量降低。如细胞处理量不超过5×10^5，组织不超过5mg。
3. 一般本试剂盒最小处理量可以处理10个以上的组织细胞。
4. 裂解液RLT Plus 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. Carrier RNA 储存液的配制：在第一次使用Carrier RNA 时，将Carrier RNA（310μg）溶解在1 ml RNase-free H2O 中，将溶液分装后储存于-20℃，此时该溶液的浓度为310 μg/ m（l 310 ng/μl）；该储存液应避免反复冻融，冻融次数不能超过3 次。（当处理的细胞量小于5000 个或者处理组织量小于10μg时，请在裂解液中加入20ng Carrier RNA。）
6. Carrier RNA 工作溶液的配制（以配制10 次用量为例）：将5μl Carrier RNA储存溶液加入34μl 裂解液RL 中，用移液器混匀，将混匀后的溶液6μl 加入54μl 裂解液RL 中， 此时Carrier RNA 终浓度为4 ng/μl，取5μl 终浓度为4 ng/μl 的Carrier RNA 加入裂解液中。
7. 预防RNase 污染，应注意以下几方面：
1) 经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌，可能导致RNase 污染。
2) 使用无RNase 的塑料制品和枪头避免交叉污染。
3) RNA 在裂解液RLT Plus 中时不会被RNase 降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase 的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4 小时，塑料器皿可在0.5 M NaOH 中浸泡10 分钟，然后用水彻底清洗，再灭菌，即可去除RNase。
4) 配制溶液应使用无RNase 的水。（将水加入到干净的玻璃瓶中，加入DEPC 至终浓度0.1%( v/v)，37℃放置过夜，高压灭菌。）
8. 关于DNA 的微量残留：
一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留（DNase 消化也无法做到100%无残留），本试剂盒由于采取了本公司独特的缓冲体系和基因组DNA 清除柱技术，绝大多数DNA 已经被清除，不需要DNase消化，可直接用于反转录PCR和荧光定量PCR。个别特殊情况如DNA 含量过于丰富造成残留或者要进行严格的mRNA 表达量分析荧光定量PCR，我们建议在进行模板和引物的选择时：
1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA 中的连接区,这样DNA 就不能作为模板参与扩增反应。
2) 选择基因组DNA 和cDNA 上扩增的产物大小不一样的引物对。
3) 将RNA 提取物用RNase-free 的DNase I 处理以提高效果。本试剂盒还可以用于DNase I 处理后的RNA 清洁(cleanup),请联*(代"系")我们索取具体操作说明书。
4) 在步骤去蛋白液RW1 漂洗前，直接在吸附柱 上进行DNase I 处理。请联*(代"系")我们索取具体操作说明书。


通用型植物RNA提取试剂盒(Dnase I)优惠促销关键词：植物通用RNA提取试剂盒,Dnase I,通用植物RNA纯化试剂盒,通用植物RNA提取试剂盒,通用型植物RNA提取试剂盒(Dnase I)

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