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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
436
- 英文名:
Plus One Step Cloning Kit
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃,避免反复冻融
- 规格:
25T|5×25T
特别提示:包括一步法快速克隆试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:一步法快速克隆试剂盒
英文名称:Plus One Step Cloning Kit
产品货号:SY0285
产品规格:25T|5×25T
本试剂盒是一款简单、快速、高效的DNA定向克隆产品,该试剂盒可以将PCR产物定向克隆至任意载体的任意位点,可高效克隆50 bp~10 kb片段。将载体在克隆位点进行线性化,并在插入片段PCR引物5’端引入线性化克隆载体末端序列,使得插入片段PCR产物5’和3’zuì末端分别带有和线性化克隆载体两末端对应的完全一致的序列 (15bp~25bp)。将这种两端带有载体末端序列的PCR产物和线性化克隆载体按一定比例混合,在重组酶的催化下,仅需反应15 min即可进行转化,完成定向克隆。克隆阳性率可达95%以上。克隆载体酶切产物或PCR产物和插入片段PCR产物可以不进行DNA纯化直接用于重组克隆,极大的简化了实验步骤。
试剂盒中2×Enzyme Premix预混了重组酶和重组反应所需缓冲液,并添加了独特的重组增强因子,可显著提高重组克隆效率,即便使用低效率感受态细胞 (107cfu/μg)也可实现高效克隆 (100cfu/ng Vector),重组体系还兼容常规酶切、PCR反应体系。
产品用途:该试剂盒可用于快速克隆、高通量克隆、无缝克隆和DNA定点突变。
产品组份:
2×Enzyme Premix————250μl
500 bp control insert(30ng/μl)————5μl
pUC 19 control vector, linearized (50ng/μl)————5μl
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期一年。
实验流程概览:
1)线性化克隆载体制备;
2)插入片段扩增引物设计;
3)插入片段PCR扩增;
4)进行重组反应;
5)反应产物转化、涂板;
6)克隆鉴定。
我公司销售的一步法快速克隆试剂盒现货供应,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验1. 原理 RT—PCR 是一种将 cDNA 合成与 PCR 技术结合分析基因表达的快速灵敏的方法,主要用于对表达信息进行检测或定量分析, 还可以用来检测基因表达差异而不必构建 cDNA 文库克隆 cDNA。 RT-PCR 的模板可以为总 RNA 或 poly(A) 选择性 RNA 。逆转录反应可以使用逆转录酶,以随机引物、oligo(dT) 或基因特异性的引物(GSP)起始。 在实际应用中,RT—PCR 又常常分为一步法 RT—PCR 和两步法 RT—PCR。 2. 特点 一步法
【公告】丁香通试用中心:10月免费试用装精选(10月18日有更新)
。 2. 鼠尾直接PCR试剂盒(常温裂解):一步法 PCR;处理鼠尾样本无需加热;用于高通量鉴定、筛选。 3. 通用植物直接PCR试剂盒:无需进行 DNA 纯化;高效特异性扩增样品;用于多种植物叶片的处理。 4.EDTA抗凝血直接PCR试剂盒:无需预处理血液;世界上血液耐受能力最强的 PCR 反应体系;安全可靠。 5.植物总RNA提取试剂盒:整套试剂盒RNase-Free;RNA得率高;质量高;安全快速。 有奖免费试用: RIPA裂解液(中) 火晶梯度PCR仪 康宁SORENSON
逆转录反应,作为分子生物学研究的基本技术之一,已经广泛应用到多个研究领域,可以说是科研人员进行 RNA 功能研究的看家本事。 众所周知,逆转录的应用领域有以下 6 种: 逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR) 定量RT-PCR(RT-qPCR) cDNA 克隆和文库构建 cDNA 末端快速扩增(RACE) 基因表达芯片 RNA 测序(RNA-Seq) 今天,小编就整理了一些贴士,帮助大家在面对 6 种不同的应用时,如何正确选择逆转录酶。 逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR) 在 RT
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