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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
626
- 英文名:
Plasmid Maxi Preparation Kit
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
室温
特别提示:包括质粒大量抽提试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:质粒大量抽提试剂盒
英文名称:Plasmid Maxi Preparation Kit
产品规格:20次
本试剂盒是一种用于从大肠杆菌中进行大量质粒的快速抽提的试剂盒。本试剂盒采用了一种新型的离子交换柱。在特定条件下,使质粒能在离心过柱的瞬间,结合到质粒纯化柱上,在一定条件下又能将质粒充分洗脱,从而实现质粒的快速纯化。无需酚*仿抽提,无需酒精沉淀,6个样品只需不足90分钟即可完成。
两步过柱纯化,使质粒纯度进一步提高,达到转细胞级要求。每个质粒纯化柱可以结合的质粒量的上限大于500微克。每个纯化柱可用于抽提100毫升左右用LB培养过夜的大肠杆菌。抽提所得质粒的OD值一般在1.80左右。抽提获得的质粒量会受质粒拷贝数等因素影响。抽提获得的质粒DNA的OD值也会因菌种不同等原因而略有波动。
由本试剂盒所得质粒可直接用于转染细胞,DNA测序,PCR,基于PCR的突变,体外转录,转化细菌,内切酶消化等。本试剂盒抽提的含Firefly luciferase或Renila luciferase报告基因的质粒,用Lipofectmine 2000或Fugene 6转细胞,报告基因检测结果表明仅0.5微克受SV40启动子控制的质粒转化12孔板内的一孔原代贴壁细胞,总RLU值约为五百万,测定时间为10秒。
内毒素(endotoxin)含量低。用对内毒素敏感的细胞转染受内毒素响应的报告基因质粒,与进口品牌的大抽试剂盒相比,毫不逊色。
产品组份:
溶液I (悬浮液)———————————105ml
溶液II (裂解液)——————————105ml
溶液III (结合液)——————————150ml
溶液IV (洗涤液)——————————84ml×3 (第一次使用前每瓶加入126ml无水乙醇)
溶液V (洗脱液)——————————90ml
溶液VI (DNA纯化结合液)——————210ml
RNase A (100mg/ml)————————105μl
大抽质粒纯化柱及废液收集管————20套
注意事项:
1)第一次使用前把试剂盒提供的RNase A全部加到溶液I(悬浮液)中,混匀,并在瓶上做好标记。加入RNase A后4℃存放。
2)第一次使用前在每瓶溶液IV(洗涤液)中加入54ml无水乙醇,混匀,并在瓶上做好标记。
3)温度较低时,溶液II和溶液III可能会有沉淀产生。使用前必须检查一遍。如有沉淀,37℃水浴加热溶解,混匀后使用。溶液II请勿过分剧烈混匀,否则会产生大量气泡。
4)溶液II使用完后,一定要盖紧瓶盖,防止被空气中二氧化碳酸化。
5)溶液II有强碱性,溶液II和溶液III对人体都有刺激性,操作时请小心,并注意适当防护。
6)本试剂盒所有操作均在室温进行,操作时无需冰浴。所有离心也均在室温进行。
7)废液收集管在一次抽提中需多次使用,切勿中途丢弃。
8)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存条件:室温,有效期一年。
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按一下步骤操作,连续两次均抽不出任何东西,请高手指点! 抽提用作转染的重组质粒DNA(用5ml菌液) 所用试剂盒为Promega公司的Wizard○R Purefection Plasmid DNA Purification System,能够去除对细胞有害的细菌内毒素。具体操作步骤如下: (1) 将5ml 培养过夜的阳性菌在室温(24℃)下10000×g离心10 min。弃上清,将离心管倒置至吸水纸上去除剩余水分。 (2)加入250µl 重悬液,振荡至完全重悬。 (3)加入250µ
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