碱性磷酸酶(来源于大肠杆菌)说明书

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名称：碱性磷酸酶(来源于大肠杆菌)说明书
规格：200U
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
编号：YT405
英文名：Alkaline Phosphatase
本品是一种热敏感的，可以催化DNA、RNA、核糖核苷酸和脱氧核糖核苷酸水解释放5′或3′末端磷酸基团的酶，也可以脱去蛋白质丝*酸、苏*酸或酪*酸残基上的磷酸基团。本酶是一种新型碱性磷酸酯酶，在我司的多种内切酶和PCR缓冲液中可保持100%活性，对于各种类型的DNA 5′末端的去磷酸化均可在37℃孵育10分钟即可完成，并且75℃孵育5分钟即可完全失活。

碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase, AP/ALP/AKP/ALKP/ALPase/Alk Phos)常被称作碱性磷酸酯酶(EC 3.1.3.1)，是一类水解酶，通过水解磷酸单酯将底物分子上的磷酸基团除去，并生成磷酸根离子和自由的羟基，其去磷酸化作用的底物包括核苷酸、蛋白质和生物碱等，并在碱性条件下最为有效。该酶是一组同功酶的统称。

经限制性内切酶酶切的质粒5′端带有磷酸基团，在进行基因克隆时为避免质粒自连，可以使用本酶去除5′末端磷酸基团。脱去5′末端磷酸基团的质粒不能发生自连。

特点：快速去磷酸化，只需37℃孵育10分钟即可；快速失活，75℃孵育5分钟即可完全失活；使用方便，在各种内切酶和PCR缓冲液中保持100%活性，可以和质粒DNA的消化同时进行；操作步骤简单，对于5′或3′突出末端、平端等各种DNA的脱磷酸化采用完全相同的操作步骤；可直接用于连接反应，经本酶脱磷，并75℃孵育5分钟失活后可直接用于后续的连接反应。

用途：通过去除载体或DNA片段5′末端的磷酸基团，防止载体或DNA片段自连；质粒DNA的同时内切酶消化和脱磷；通过5′末端脱磷，为5′末端磷酸化放射性标记准备模板；去除DNA、RNA 5′或3′末端的磷酸基团；用于蛋白质丝*酸、苏*酸、酪*酸残基的去磷酸化。

来源：大肠杆菌表达，表达基因为一种细菌碱性磷酸酯酶基因。

酶活性定义：37℃10分钟内，催化1μg 线性化的pUC19 DNA5′末端脱磷所需的酶量定义为一个活力单位。

纯度：不含DNA外切酶和内切酶，不含RNA酶。

酶储存溶液：20mM HEPES-NaOH(pH7.4)，1mM MgCl2，0.1mM ZnCl2，0.1% Triton X-100，50%(v/v)glycerol。

Reaction Buffer(10X)：100mM Tris-HCl(pH8.0 at 37℃)，50mM MgCl2，1M KCl，0.2% Triton X-100，10mM 2-mercaptoethanol，1mg/ml BSA。

失活或抑制：75℃加热5分钟可以使本酶失活。金属离子螯合剂对本酶有抑制作用。

储存条件：-20℃

碱性磷酸酶(来源于大肠杆菌)说明书正在火爆热销，除此之外，为您推荐下别热销产品：

·SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(6X)
编号：YT052
英文名称：SDS-PAGE Sample Loading Buffer，6X
规格：2ml
本品是一种经过改良的以*酚蓝为染料，6倍浓缩的蛋白上样缓冲液，可以用于常规的SDS-PAGE蛋白样品的上样。

注意事项：
1. SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(6X)中含少量DTT，有轻微刺激性气味，但不含剧毒的巯基乙醇。
2. SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(6X)必须完全溶解后再使用。

储存条件：-20℃，有效期一年。


·总抗氧化能力检测试剂盒(FRAP法)
编号：YT312
英文名称：Total Antioxidant Capacity Assay Kit with FRAP method
规格：100次
本试剂盒是一种采用Ferric Reducing Ability of Plasma(FRAP)方法，可以对血浆、血清、唾液、尿液等各种体液，细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液、或各种抗氧化物溶液的总抗氧化能力进行检测的试剂盒。本试剂盒可以检测100个样品。

试剂盒组份：
TPTZ稀释液——————15ml
TPTZ溶液———————1.5ml
检测缓冲液——————1.5ml
FeSO4•7H2O——————200mg
Trolox溶液 (10mM)———0.1ml

活性氧ROS主要包括羟基自由基、超氧自由基和过氧化*。在细胞或组织的正常生理代谢过程中会产生活性氧，同时一些环境因子例如紫外照射、γ射线照射、吸烟、环境污染等也可以诱导活性氧的产生。活性氧产生后，可以导致细胞内脂、蛋白和DNA等的氧化损伤，诱发氧化应激(Oxidative stress)，继而导致各种肿瘤、动脉粥样硬化、风湿性关节炎、糖尿病、肝损伤、以及中枢神经系统疾病等。

机体中存在多种抗氧化物，包括抗氧化大分子、抗氧化小分子和酶等，可以清除体内产生的各种活性氧，以阻止活性氧诱导的氧化应激(oxidative stress)的产生。一个体系内的各种抗氧化大分子、抗氧化小分子和酶的总的水平即体现了该体系内的总抗氧化能力。因此测定血浆、血清、尿液、唾液等各种体液，细胞或组织等裂解液中的总抗氧化能力具有非常重要的生物学意义。

植物或中草药抽提液、或各种抗氧化物溶液的总抗氧化能力的检测可以用于检测各种溶液的抗氧化能力的强弱，可以用于筛选强抗氧化能力的药物。

FRAP法测定总抗氧化能力的原理是酸性条件下抗氧化物可以还原Ferric-tripyridyltriazine(Fe3+-TPTZ)产生蓝色的Fe2+-TPTZ，随后在593nm测定蓝色的Fe2+-TPTZ即可获得样品中的总抗氧化能力。由于反应在酸性条件下进行，可以抑制内源性的一些干扰因素。并且由于血浆等样品中的铁离子或亚铁离子的总浓度通常低于10μM，因此血浆等样品中的铁离子或亚铁离子不会显著干扰FRAP法的检测反应。由于反应体系中的铁离子或亚铁离子是和TPTZ螯合的，样品本身含有的少量金属离子螯合剂通常也不会显著影响检测反应。



本试剂盒提供了抗氧化物Trolox作为对照。Trolox是一种维生素E的类似物，水溶性较好，抗氧化能力和维生素E相近。本试剂盒方便快捷，加入待测样品后3-5分钟即可进行吸光度测定，通常10-20个样品可以在十多分钟内检测完毕。

注意事项：
1. 在酸性条件下呈蓝色或接近蓝色的试剂会对本试剂盒的检测产生干扰，需尽量避免。
2. 如果样品中含有外加的较高浓度的铁盐或亚铁盐，会干扰测定。但血浆、血清、细胞或组织裂解液等样品中含有的微量的铁盐或亚铁盐不会干扰测定。
3. 样品中不能添加DTT、巯基乙醇等影响氧化还原反应的物质，也不宜添加Tween、Triton和NP-40等去垢剂。
4. 测定时需可以测定A593的酶标仪一台(测585-605nm也可以)或可以测定微量样品的分光光度计一台。
5. TPTZ对人体有刺激性，请注意适当防护。

储存条件：-20℃，有效期12个月。


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