超纯总RNA提取试剂盒(TRIzol法) RNA纯化

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售")，产品线涵盖超纯总RNA提取试剂盒(TRIzol法) RNA纯化在内的分子生物学试剂产品，还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。

名称：超纯总RNA提取试剂盒(TRIzol法) RNA纯化
品牌：百奥莱博
编号：ALH011
规格：20次|50次
英文名：Ultra Pure Total RNA Fast Extraction Kit
产地：国产|进口
本试剂盒适用于动植物组织、动植物培养细胞的总RNA提取，采用改进的异硫*酸胍/酚一步法(TRIzol法)裂解细胞和灭活RNA酶，然后总RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤,去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除，最后低盐的RNase free water将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。

产品特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.结合了异硫*酸胍/酚一步法试剂稳定性好，纯度高和离心柱方便快捷的优点，不需要异丙醇沉淀和乙醇洗涤过程，RNA可以直接从离心柱上洗脱避免了过度干燥不易溶解问题。
3.独特的RL裂解液配方，可以有效的消除基因组污染。
4.多次漂洗去蛋白过程，提取RNA纯度更高。
5.有效的去除了5S在总RNA中含量，提高了纯度。

试剂盒组份：

 

组份	20次	50次
裂解液RL	20ml	50ml
去蛋白液RE	15ml	25ml
漂洗液RW	5ml	10ml
RNase-free H2O	10ml	10ml
吸附柱和收集管	20套	50套

储存条件：室温，有效期一年。(裂解液RL需4℃避光保存)

注意事项：
1. 第一次使用前请先在漂洗液RW瓶中加入指定量乙醇，加入后请及时打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!
2. 本试剂盒抑制RNA酶效果极佳，所有离心步骤如未加说明，均可在常温进行。
3. 裂解液RL和去蛋白液RE中含有刺激性有害化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4. 考虑到环保问题，本试剂盒不含有实验室常用试剂*仿，使用前需要自备*仿。
5. 常规的琼脂糖凝胶电泳和变性胶电泳均可以用来分析RNA的质量。好的RNA产物在电泳后应该可以看到明显的二条优势核糖体RNA带，分别为~5Kb（28S），~2Kb（18S），条带亮度比值约为2：1。有时候也可以看到~0.1kb和0.3Kb(5S，tRNA)带。但有时候根据不同的物种如某些植物组织可以看到4，5条带也属于正常现象，如果RNA未成熟的前体或者不均一核RNA、小核RNA提取出来也可能看到介于7Kb和15Kb之间的不连续的高分子量条带。
6. 检测OD260/OD280吸光度比值时，如需稀释RNA样品应该用TE（PH 8)，如果用水稀释后检测，由于一般水离子强度和PH值低，会使OD280升高，从而使比值降低。
7. 加入裂解液RL匀浆后，加*仿前，样品可在–60℃～70℃ 保存一个月以上。
8. 若提取细菌RNA，推荐细菌RNA提取试剂盒（目录号：ALH027和ALH029）。

操作步骤（实验前请先阅读注意事项）
 提示：第一次使用前请先在漂洗液RW 瓶中加入指定量无水乙醇!
1. 匀浆处理
a. 组织
将组织在液氮中磨碎，每50~100mg组织加1ml的裂解液RL后匀浆。组织样品容积不能超过RL容积的10%。
b. 单层生长的细胞
直接往直径3.5 cm的培养板中加入1ml的RL溶解细胞，并用移液枪轻轻吹打混匀。依据培养板的面积而不是依据细胞的数量来决定所需的RL量（每10cm2加1ml）。一般情况下，普通大小的细胞培养瓶，加入1ml的RL, 迅速轻摇使RL充分和瓶底所有细胞接触裂解细胞并灭活RNA酶，轻轻用移液枪反复吹打混匀。当RL量不足时可导致抽提的RNA中污染有DNA。
c. 悬浮生长的细胞
通过离心来沉淀细胞，小心弃上清。每5~10×106的动物细胞或植物细胞加1ml的RL。在RL试剂中用移液枪反复吹打来裂解细胞。在加入RL前应避免洗涤细胞，否则会增加mRNA降解的可能性。
2. 将匀浆样品剧烈震荡混匀，在15～30℃条件下孵育5分钟以使核蛋白体完全分解。
3. 可选步骤：4℃的条件下12,000rpm 离心10分钟，小心取上清转入一个新的RNase free的离心管中。当样品富含蛋白质、脂肪、多糖或是细胞外物质例如肌肉、脂肪组织或植物的块茎部分时可能需要一额外的分离步骤。匀浆化后在2~8℃的条件下以12,000rpm离心10分钟，移除匀浆中不溶解的物质，余下的沉淀中包含有细胞外膜、多糖、以及高分子量DNA，而上层的超浮游物含有RNA。
4. 每1ml RL加0.2ml*仿。盖紧样品管盖，剧烈振荡15秒并将其在室温下孵育3分钟。
5. 于4℃12,000rpm 离心10分钟，样品会分成三层：下层有机相，中间层和上层无色的水相，RNA存在于水相中。水相层的容量大约为所加RL体积的50%，把水相小心转移到新管中（不要触碰中间层），记录水相体积。
6. 加入水相体积一半也就是0.5倍体积的无水乙醇，混匀（此时可能会出现沉淀）。得到的溶液和可能沉淀一起转入吸附柱中（吸附柱套在收集管内，若一次不能将全部溶液和混合物加入吸附柱中，请分两次转入吸附柱中。) ，12,000rpm离心45秒，弃废液，将吸附柱重新套回收集管。
7. 加500μl 去蛋白液RE，12000rpm 离心45 秒，弃废液。
8. 加入500μl漂洗液RW（请先检查是否已加入无水乙醇!），12000rpm 离心45秒，弃废液。
9. 重复步骤8一次。
10. 将吸附柱放回空收集管中，13000rpm离心2分钟，尽量除去漂洗液, 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
11. 取出吸附柱，放入一个RNase free离心管中，根据预期RNA产量在吸附膜的中间部位加50-80μl RNase free water，室温放置2分钟，12000rpm 离心1分钟。如果需要较多RNA，可将得到的溶液重新加入离心吸附柱中，离心1分钟，或者另外再加30μl RNase free water，离心1分钟，合并两次洗脱液。洗脱体积越大，洗脱效率越高，如果需要RNA 浓度较高，可以适当减少洗脱体积， 但是最小体积最好不少于30μl，体积过小降低RNA 洗脱效率，减少RNA产量。

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更多有关超纯总RNA提取试剂盒(TRIzol法) RNA纯化的价格及使用说明等，请联*(代"系")我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：

·柱式高纯质粒小量提取试剂盒(不含内毒素)
编号：ALH081
英文名称：High purity plasmid free rapid extraction kit (centrifugal column type)
规格：50次
本试剂盒采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞，通过独特的内毒素清除剂选择性结合离心除去内毒素，然后离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA，再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其它细菌成分去除，最后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。

试剂盒组份(50次)：
平衡液—————————————5ml
RNaseA(10mg/ml)————————150μl
溶液P1—————————————15ml
溶液P2—————————————15ml
溶液N3—————————————15ml
内毒素清除剂——————————5ml
漂洗液WB————————————15ml
洗脱缓冲液EB——————————15ml
吸附柱和收集管(2ml)———————50套

试剂盒特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.独特的去蛋白液配方，可以高效去除核酸酶。即使是核酸酶含量丰富的菌株如JM系列、HB101也可以轻松去除。有效防止了质粒被核酸酶降解。
3.独特内毒素清除配方，清除内毒素效果一般小于＜0.1 EU/ug。
4.快速、方便， 不需要使用有毒的*酚、*仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。获得的质粒产量高、纯度好，
5.直接可以用于转染、酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。

注意事项
1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2. 提取质粒的量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。一般高拷贝质粒，建议接种单菌落于1.5-4.5 ml加合适抗生素的LB培养基， 过夜培养14-16个小时，可提取出多达20μg的纯净质粒。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb的大质粒，应适当加大菌体使用量，使用5-10 ml过夜培养物，同时按比例增加P1、P2、N3的用量，其它步骤相同。
3. 得到的质粒DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带，也可能为2条或者多条DNA条带，这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成，与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过90%。
4. 质粒DNA确切分子大小， 必须酶切线性化后，对比DNA分子量Marker才可以知道。处于环状或者超螺旋状态的的质粒，泳动位置不确定，无法通过电泳知道其确切大小。
5. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA，不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱，但应该确保pH大于7.5，pH过低影响洗脱效率。用水洗脱质粒应该保存在－20℃。质粒DNA如果需要长期保存，可以用TE缓冲液洗脱（10mM Tris-HCl，1mMEDTA，pH 8.0），但是EDTA可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。

储存条件：室温，有效期12个月。


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·寡核苷酸纯化回收试剂盒
编号：ALH105
英文名称：Oligonucleotide purification kit
规格：50次
本试剂盒使用特殊的结合缓冲液能够高效纯化>15nt的单链或者双链DNA和RNA。特别适用于从标记反应（地高*(代"辛")标记，同位素标记，生物素标记等）混合物中回收小片段标记探针，去除未反应的核苷酸、短oligos、染料、酶、盐离子等。典型的回收率高达80-90%，每个离心吸附柱每次可吸附的 DNA 量为 10µg 。使用本试剂盒回收的RNA或者DNA可适用于in Situ Hybridization、Northern blot、RNAi、Gel shift assay、Ligation、Sequencing、Microarray analysis等实验。

试剂盒组份(50次)：
平衡液————————————5ml
结合液OB———————————30ml
漂洗液RW———————————10ml
RNase-free H2O————————10ml
吸附柱和收集管(2ml)-—————50套

试剂盒特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。
2.使用了优质结合液，不含传统结合液的碘化*和高*酸盐，不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。
3.独特的配方保证了该试剂盒比一般试剂盒回收效率大大提高。并且适用于回收单链或者双链DNA和RNA。
4.快速、方便，不需要使用有毒的*酚、*仿等试剂，也不需要乙醇沉淀。

注意事项
1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机。
2. 结合液中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要立即用大量清水或者生理盐水冲洗。
3. 本试剂盒适用于无选择性的回收溶液中所有核酸片段，如需选择性回收特定片段，同时去除其他不同大小片段，请选择胶回收试剂盒。
4. 虽然本试剂盒推荐用于回收小片段或者寡聚核苷酸(>15nt)，但是也可以高效回收<10kb的较大片段DNA或者RNA。
5. 回收RNA应该用本试剂盒带的RNase free H2O来洗脱。并保存在-70℃。DNA片段也可以根据需要用TE缓冲液洗脱（10mM Tris-HCl，1mM EDTA，pH 8.0），如果担心EDTA可能影响下游反应，使用时可以适当稀释。或者可以直接用（10mM Tris-HCl pH 8.0）洗脱。

储存条件：室温，有效期12个月。


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橄榄油 Polyquaternium-10 8001-25-0
胆色素染色液(改良Fouchet法)   2×100ml
ARB11855 人糖化血红蛋白A1c ELISA代测服务 Human glycated hemoglobin a1c ELISA KIT
9002-17-9 Xanthione oxidase  黄嘌呤氧化酶
单宁酶 Span 60 9025-71-2
Seliwanoff试剂   100ml
ARB11366 人前列环素(PGI)Elisa定量检测 Human prostacycline,pgi ELISA KIT
BTN90302 *化锰溶液,PCR级 MgCl2,PCR Grade
ARB13785 豚鼠白三烯D4(LTD4)酶标法分析 Guinea pig leukotriene d4,lt-d4 ELISA KIT
FMOC-D-*丙*酸 QAE Sephadex A-50 86123-10-6
SJ0743 小鼠白细胞分离液
RNA纯化试剂盒 
6160-80-1 4-MUG  4-甲基伞形酮-β-D-葡糖苷酸
ARB14119 大鼠*卫蛋白(cAlproteIn)Elisa方法检测 
25322-68-3 PEG20000  聚乙二醇
ARB13206 小鼠高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)代做ELISA实验 Mouse high mobility group protein b1,hmgb-1 ELISA KIT
*甲酰胺 HMB 55-21-0
N-羟yi基乙二*(代"胺")-N,N′,N′-三乙酸三* Chrome Blue K 207386-87-6
ARB10541 人半乳甘露聚糖(GM)含量测试 Human galactomannan (GM) ELISA KIT

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