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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
4℃运输
- 保质期:
长期
- 英文名:
RNA Long-term Preservative Solution
- 库存:
671
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")RNA长效保存液现货供应,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:RNA长效保存液现货供应
规格:1.5mL
英文名:RNA Long-term Preservative Solution
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
编号:BTN3100
本品是一种能高效抑制RNase活性的新型小分子混合物,用于防止RNase对RNA的降解作用。
产品特点:
1.高效抑制 RNase,保存在 RNA保存液中的RNA可以在抵抗100 ng/mL的RNase A的降解作用达 36小时,效果比人胎盘RNase抑制蛋白和RVC更有效。
2. 耐高温,100℃保温30分钟后活性不受任何影响。
3. 抗氧化,不需要DTT。
4. 有效pH范围广。
5.产品为淡红色液体,可以-20℃保存两年。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| RNA保存液 | 1.5ml |
| LiCl溶液(10M) | 1.5ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:4℃运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
将本产品直接用于溶解 RNA沉淀(跟使用 RNase-free 水一样),然后 放置在适当温度下保存(一般在-20℃)。保存在 RNApreserve中的RNA可以直接电泳,不影响Northern杂交。但由于RNA保存液会抑制后续酶反应,所以如果RNA要用于RT-PCR等反应,需要预先用 LiCl沉淀去除RNA保存液(将1/3倍体积的LiCl加入溶液中,4℃12000~15000g离心20-30分钟,弃上清,用75%乙醇洗一次既得RNA沉淀)。
疑难解答:
Q:本产品抑制 RNase的Ki值是多少?
A:本产品是混合物,不能确定其Ki值。
Q:百奥莱博的液相RNase清除剂和RNA保存液都可以保存 RNA,都能灭活/抑制溶液中 2 ng/μL左右的RNase,它们的主要区别何在?
A:一是原理不同。前者通过共价修饰使 RNase 失活(类似于DEPC);后者通过竞争抑制保护 RNA(类似于RNase Inhibitor)。二是兼容性不同。前者与很多后续反应兼容,故 RNA可以直接使用;后者会抑制很多后续反应,需要去除后在使用 RNA。三是稳定性不同。后者比前者更稳定,更耐热。
我公司的RNA长效保存液现货供应,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
·即用型蓝白T载体D型(无RNA启动子,有MCS)
编号:BTN120514
英文名称:Instant Blue-White Vector T,Type D
规格:20次
本产品是用Xcm I酶切线性化的DNA片段,其两个末端的5´都有一个突出的T,可以用于快速克隆具有加尾活性的耐热酶(如Taq DNA聚合酶)扩增得到的PCR片段。
产品特点:
1. 由于是通过酶切制备,所以载体两端的带T率为100%,远高于用Taq DNA聚合酶和TdT末端转移酶在平末端载体加尾得到的T载体。
2. 克隆的阳性率一般在90%以上,缩短了筛选过程。
3. 插入位点两侧有多克隆(CMS)位点,便于对克隆的PCR片段进行近一步的分析。
4. 来源于pUC19质粒,两侧无RNA聚合酶启动子。
5.可以使用pUC/M13 Forward和Reverse测序引物测定插入片段的序列。
6. T克隆位点位于β-半乳糖苷酶的α 肽编码区内,可以进行蓝白斑筛选。
7.含有丝状噬菌体f1 复制起始子,可以制备单链DNA。
产品组成:
| 组分 | 规格 |
| 即用型蓝白T载体D型(10ng/μL) | 60μl |
| 阳性对照(35ng/μl) | 30μl |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期两年。
质粒图谱
多克隆位点
RNA长效保存液现货供应关键词:RNA Long-term Preservative Solution,RNA长效保存液,BTN3100
·DNA Shuffling试剂盒
编号:BTN131178
英文名称:DNA Shuffling Kit
规格:10次
DNA Shuffling即DNA分子的体外同源重组,它是一种分子水平上的定向进化(directed evolution)技术,它以一个或多个基因为起始材料,通过先随机断裂成小片段,再进行互为模板和引物的PCR(无外加引物),最后再进行常规PCR(外加引物)等处理,最后得到含有大量DNA重组突变的PCR产物。其原理示意图如下:
产品特点:
1.即开即用,用户只需要提供样品DNA模板,无需单独准备各成分。
2.操作手册经过优化,1-2天即可完成,节省大量优化时间。
3.本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| PCR Mix 3.0,2× | 1.5mL |
| DNase I溶液(1U/μL) | 10μl |
| 溶液A,10× | 60μl |
| 溶液B,10× | 60μl |
| 超纯水 | 1mL |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,保存期限一年。
使用方法:
1.待突变基因片段的制备:待突变基因片段可以用含此基因的质粒为模板、用PCR法或酶切法制备。制备时需保证含此基因(或此基因的一部分)的DNA片段总长度不要超过1kb,同时比DNA shuffling终产物(第二轮PCR产物)长200-400bp。每次DNA Shuffling实验至少需要2μg起始DNA片段(如果含几个基因片段,则彼此的比例为1:1),并且必须通过胶回收的方法回收,以便彻底去除残留的质粒模板、引物和非特异扩增产物等。最后需用分光光度法准确定量。
2.提前准备37℃和75℃水浴,同时新鲜配制0.1U/μL的DNase工作液放冰上待用(必须在用时才配制,方法是将1μl 本试剂盒提供的1U/μL的DNase I溶液和1μl溶液A和8μl超纯水混合)。此溶液需在24小时内使用。
3.在一个离心管中,按顺序加入下列成分:
| 成分 | 用量 |
| 待突变基因片段(第1步制备) | 2μg |
| 溶液A | 5μl |
| 溶液B | 5μL |
| DNase I工作液(第2步制备) | 2μL |
| 超纯水 | 36μL |
4.充分轻柔吹打混匀后37℃水浴8分钟,然后立即放75℃水浴处理10分钟以灭活DNase I。
5.在2-3%琼脂糖凝胶上电泳,用常规的胶回收法回收25-150bp范围的所有片段待用。注意:一定要加合适的DNA marker以便确定片段范围,最好使用本公司生产的绿如蓝核酸染料(可见光型)作为电泳染料以避免用UV照射DNA,否则UV使DNA发生的交联将极大降低后续扩增效果。
6.分光光度法精确测定回收片段的浓度。
7.在PCR管中按顺序加入0.5μg上步回收得到的回收片段、50μl 2×PCR Mix、加超纯水到100μl。
8.按下面的PCR反应参数进行第一轮无引物PCR:
| 过程 | 温度 | 时间 |
| PCR前变性 | 94℃ | 150s |
| PCR反应(40循环) | 94℃ | 30s |
| 47.5℃ | 45s | |
| 72℃ | 10s,每次循环后增加5s | |
| PCR后延伸 | 72℃ | 10min |
9.取5-10μl进行电泳检测,然后进行PCR回收,得到第一轮PCR产物。
10.将回收的第一轮PCR产物1μl原液作为模板设置3管第二轮PCR反应。
| 成分 | 用量 |
| 回收的第一轮PCR产物 | 1μL |
| PCR Mix 3.0,2× | 50μL |
| 自备DNA Shuffling引物 | 各1μM |
| 超纯水 | 加水到100μL |
11.按下列PCR参数进行第二轮PCR。
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 活化 | 94℃ | 150s |
| PCR反应(25次循环) | 94℃ | 30s |
| 47.5℃ | 45s | |
| 72℃ | 60s,每次循环后增加5s | |
| PCR后延伸 | 72℃ | 10min |
12.电泳检测,回收预期大小的PCR产物,用于后续的构建克隆文库实验(略)。
疑难解答:
Q:易错PCR和DNA Shuffling有何区别?
A:前者引入的是点突变,后者引入的是重组突变。示意图如下:
RNA长效保存液现货供应关键词:RNA Long-term Preservative Solution,RNA长效保存液,BTN3100
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