超敏感可脱色PAGE胶蛋白染色试剂盒北京厂家

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超敏感可脱色PAGE胶蛋白染色试剂盒北京厂家由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于科研目的生化试验项目，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多超敏感可脱色PAGE胶蛋白染色试剂盒等蛋白质研究产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：超敏感可脱色PAGE胶蛋白染色试剂盒北京厂家
品牌：百奥莱博
编号：ALH378
规格：250ml|1000ml
英文名：PAGE protein staining kit
产地：国产|进口
本试剂盒适用于快速检测PAGE胶上的微量蛋白质，它的敏感度几乎可以达到银染的敏感度（ng级水平或者更高），但是比银染简单、稳定、重复性高。染色液所含有的成份和PAGE胶中的SDS、TRIS共同作用形成特殊复合物沉淀在胶基质中形成白色的背景染色。有蛋白的地方，蛋白质的存在干扰这种复合物沉淀的形成，因此蛋白条带仍旧保持透明无色，在黑色的背景下，就可以清晰见到透明的蛋白条带。

试剂盒组份(250ml)：
染色液—————————250ml
显色液—————————250ml
脱色液—————————125ml

产品特点：
1.电泳后采用两个简单步骤，15分钟内完成全部过程。
2.环保染料，完全不含有各种醋酸、甲醇等有毒有刺激性成份。
3.蛋白条带为不透明白背景上的透明条带，灵敏度为传统方法的10倍以上（纳克级或者更高）。
4.可逆染色，完全不影响蛋白性质，不影响抗体抗原结合性质。如果需要可以脱色15分钟后继续做蛋白电洗脱（切下特定条带脱色后洗脱下来可以用来做抗原生产使用）、定量、Western blot实验、质谱分析、N末端测序等。
5.在普通双蒸水中可以保留一年以上，不退色，缩小，蛋白质不扩散，一年后依然可以用来做Western blot等蛋白微分析。

操作步骤：
1. 染色
1) 电泳后用清水冲洗胶30-60 秒钟，然后将PAGE 胶放置于一个透明的玻璃培养皿中，根据胶大小倒入适量的染色液（确保胶都浸没在染色液内，20-25ml 足够染色一块普通的8×10cm mini 胶了），摇床上轻摇染色10-15 分钟(10-15%胶15 分钟，5-7.5%胶可缩短时间到10 分钟)。
2) 倒弃染色液，加入20-25ml 的显色液，立刻同时用手轻摇胶显色0.5-1 分钟（将透明培养皿放在一个黑色（暗）背景上观察条带出现情况，此时在不透明的白背景上应该看到透明的蛋白条带，不要显色时间过长，过长反而会降低分辨率）。
3) 看到满意条带后，用清水冲洗1-2 分钟后，放置于蒸馏水中保存。
2. 脱色
1) 根据个人需要将所需目的条带切下后或者直接整块胶加入适量脱色液，摇床上轻摇10 分钟或者直到脱色完全，最后用清水冲洗几次。
2) 现在胶可以用于蛋白电洗脱，Western blot 等操作，或者可以再用传统方法永久染色。

问题与解决方法
●没有见到条带可能的原因分析
1. 应该把透明培养皿放在黑色背景上看，条带为黑背景上面透明的条带。
2. 染色过头了。染色时要在暗背景上监测蛋白条带出现情况，一旦见到满意条带要立刻用蒸馏水冲洗停止染色。对于已经染色过头的胶，可以用脱色液部分脱色（胶脱色后，还可以再次反复染色）。
3. 蛋白浓度太低了，检测上样蛋白的浓度。
●干胶后，条带不见了可能的原因分析
这是一种可逆的负染色方法，干燥以后蛋白条带就和背景区分不出来了，因此不可以做成干胶。如果要长期保存，可以脱色后再用传统方法染色保存。
●染色后未脱色即直接转膜做Western blot效果不好可能的原因分析
应该脱色后才转膜做Western blot。

储存条件：室温避光，有效期12个月。

本品别名：PAGE胶微量蛋白染色试剂盒(可脱色)|可逆微量蛋白染色试剂盒|超敏感可脱色PAGE胶蛋白染色试剂盒

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·超纯总RNA提取试剂盒(TRIzol法)
编号：ALH011
英文名称：Ultra Pure Total RNA Fast Extraction Kit
规格：20次|50次
本试剂盒适用于动植物组织、动植物培养细胞的总RNA提取，采用改进的异硫*酸胍/酚一步法(TRIzol法)裂解细胞和灭活RNA酶，然后总RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤,去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除，最后低盐的RNase free water将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。

产品特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.结合了异硫*酸胍/酚一步法试剂稳定性好，纯度高和离心柱方便快捷的优点，不需要异丙醇沉淀和乙醇洗涤过程，RNA可以直接从离心柱上洗脱避免了过度干燥不易溶解问题。
3.独特的RL裂解液配方，可以有效的消除基因组污染。
4.多次漂洗去蛋白过程，提取RNA纯度更高。
5.有效的去除了5S在总RNA中含量，提高了纯度。

试剂盒组份：

 

组份	20次	50次
裂解液RL	20ml	50ml
去蛋白液RE	15ml	25ml
漂洗液RW	5ml	10ml
RNase-free H2O	10ml	10ml
吸附柱和收集管	20套	50套

储存条件：室温，有效期一年。(裂解液RL需4℃避光保存)

注意事项：
1. 第一次使用前请先在漂洗液RW瓶中加入指定量乙醇，加入后请及时打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!
2. 本试剂盒抑制RNA酶效果极佳，所有离心步骤如未加说明，均可在常温进行。
3. 裂解液RL和去蛋白液RE中含有刺激性有害化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4. 考虑到环保问题，本试剂盒不含有实验室常用试剂*仿，使用前需要自备*仿。
5. 常规的琼脂糖凝胶电泳和变性胶电泳均可以用来分析RNA的质量。好的RNA产物在电泳后应该可以看到明显的二条优势核糖体RNA带，分别为~5Kb（28S），~2Kb（18S），条带亮度比值约为2：1。有时候也可以看到~0.1kb和0.3Kb(5S，tRNA)带。但有时候根据不同的物种如某些植物组织可以看到4，5条带也属于正常现象，如果RNA未成熟的前体或者不均一核RNA、小核RNA提取出来也可能看到介于7Kb和15Kb之间的不连续的高分子量条带。
6. 检测OD260/OD280吸光度比值时，如需稀释RNA样品应该用TE（PH 8)，如果用水稀释后检测，由于一般水离子强度和PH值低，会使OD280升高，从而使比值降低。
7. 加入裂解液RL匀浆后，加*仿前，样品可在–60℃～70℃ 保存一个月以上。
8. 若提取细菌RNA，推荐细菌RNA提取试剂盒（目录号：ALH027和ALH029）。

操作步骤（实验前请先阅读注意事项）
 提示：第一次使用前请先在漂洗液RW 瓶中加入指定量无水乙醇!
1. 匀浆处理
a. 组织
将组织在液氮中磨碎，每50~100mg组织加1ml的裂解液RL后匀浆。组织样品容积不能超过RL容积的10%。
b. 单层生长的细胞
直接往直径3.5 cm的培养板中加入1ml的RL溶解细胞，并用移液枪轻轻吹打混匀。依据培养板的面积而不是依据细胞的数量来决定所需的RL量（每10cm2加1ml）。一般情况下，普通大小的细胞培养瓶，加入1ml的RL, 迅速轻摇使RL充分和瓶底所有细胞接触裂解细胞并灭活RNA酶，轻轻用移液枪反复吹打混匀。当RL量不足时可导致抽提的RNA中污染有DNA。
c. 悬浮生长的细胞
通过离心来沉淀细胞，小心弃上清。每5~10×106的动物细胞或植物细胞加1ml的RL。在RL试剂中用移液枪反复吹打来裂解细胞。在加入RL前应避免洗涤细胞，否则会增加mRNA降解的可能性。
2. 将匀浆样品剧烈震荡混匀，在15～30℃条件下孵育5分钟以使核蛋白体完全分解。
3. 可选步骤：4℃的条件下12,000rpm 离心10分钟，小心取上清转入一个新的RNase free的离心管中。当样品富含蛋白质、脂肪、多糖或是细胞外物质例如肌肉、脂肪组织或植物的块茎部分时可能需要一额外的分离步骤。匀浆化后在2~8℃的条件下以12,000rpm离心10分钟，移除匀浆中不溶解的物质，余下的沉淀中包含有细胞外膜、多糖、以及高分子量DNA，而上层的超浮游物含有RNA。
4. 每1ml RL加0.2ml*仿。盖紧样品管盖，剧烈振荡15秒并将其在室温下孵育3分钟。
5. 于4℃12,000rpm 离心10分钟，样品会分成三层：下层有机相，中间层和上层无色的水相，RNA存在于水相中。水相层的容量大约为所加RL体积的50%，把水相小心转移到新管中（不要触碰中间层），记录水相体积。
6. 加入水相体积一半也就是0.5倍体积的无水乙醇，混匀（此时可能会出现沉淀）。得到的溶液和可能沉淀一起转入吸附柱中（吸附柱套在收集管内，若一次不能将全部溶液和混合物加入吸附柱中，请分两次转入吸附柱中。) ，12,000rpm离心45秒，弃废液，将吸附柱重新套回收集管。
7. 加500μl 去蛋白液RE，12000rpm 离心45 秒，弃废液。
8. 加入500μl漂洗液RW（请先检查是否已加入无水乙醇!），12000rpm 离心45秒，弃废液。
9. 重复步骤8一次。
10. 将吸附柱放回空收集管中，13000rpm离心2分钟，尽量除去漂洗液, 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
11. 取出吸附柱，放入一个RNase free离心管中，根据预期RNA产量在吸附膜的中间部位加50-80μl RNase free water，室温放置2分钟，12000rpm 离心1分钟。如果需要较多RNA，可将得到的溶液重新加入离心吸附柱中，离心1分钟，或者另外再加30μl RNase free water，离心1分钟，合并两次洗脱液。洗脱体积越大，洗脱效率越高，如果需要RNA 浓度较高，可以适当减少洗脱体积， 但是最小体积最好不少于30μl，体积过小降低RNA 洗脱效率，减少RNA产量。


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·大量细菌基因组DNA提取试剂盒
编号：ALH139
英文名称：Bacterial massive genomic DNA Extraction Kit
规格：20次|50次
本试剂盒用于快速的从各种细菌中大量提取基因组DNA。细菌样品加入细胞核裂解液(或者通过溶菌酶或者其它一些酶帮助裂解细胞壁后)，首先在强去污剂作用下裂解细胞释放出基因组DNA，接着加入RNase A去除RNA，然后蛋白沉淀液选择性沉淀去除蛋白，最后纯净的基因组DNA通过异丙醇沉淀并重溶解于DNA溶解液。

试剂盒组份（20次）：
细胞核裂解液———————90ml×2
蛋白沉淀液————————60ml
DNA溶解液————————10ml
RNaseA(10mg/ml)—————500μl

产品特点：
1.不需要使用有毒的*酚等试剂。
2.快速，简捷，单个样品操作一般可在30分钟内完成。
3.结果稳定，产量高，OD260/OD280典型的比值达1.7～1.9，长度可达50 kb -150kb，可直接用于构建文库，PCR，Southern-blot和各种酶切反应。

注意事项：
1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到3,000xg，可容纳50ml 离心管的台式离心机。
2. 用户需自备异丙醇、70％乙醇、0.5M EDTA 和Lysozyme（溶菌酶）(用于革兰氏阳性菌)、lysostaphin(用于某些难裂解的革兰氏阳性菌)、水浴箱。
3. 开始实验前将需要的水浴先预热好备用。
4. 本试剂盒为溶液型，可以很容易的按照比例扩大或者缩小每次处理的细菌细胞量，请联*(代"系")我们索取其它处理量的操作手册。

储存条件：室温，有效期12个月。

·大量植物RNA提取试剂盒(含DNA清除柱)
编号：ALH039
英文名称：Total RNA Extraction Kit From Plant Massive Cell & Tissue
规格：10次
本试剂盒适用于植物组织细胞总RNA大量提取，在无*酚、*仿RNA快速提取技术基础上，又采取基因组DNA清除柱技术可以有效清除gDNA残留，得到的RNA一般不需要DNase消化，可直接用于PCR、荧光定量PCR等实验。独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶，植物RNA助提剂帮助结合多糖多酚并通过离心去除，然后裂解混合物用乙醇调节RNA结合吸附到基因组DNA清除柱，基因组DNA被清除而RNA被选择性洗脱滤过。滤过的RNA用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜， 再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物，蛋白等杂质去除， 最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。

本试剂盒特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的*酚，*仿等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。
3.快速，简捷，单个样品操作一般可在60分钟内完成。
4.独特的植物RNA助提剂可以有效结合多糖多酚,提高清除效果。
5.多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280典型的比值达1.9～2.0，基本无DNA残留,可用于RT-PCR，Northern-blot和各种实验。

试剂盒组份：

组份	10次
裂解液RLT	100 ml
裂解液RLT Plus	50ml
去蛋白液RW1	120 ml
漂洗液RW	25ml×2
RNase-freeH2O	10ml
PLANTbalb	10ml×2
基因组DNA 清除柱和收集管	10套
吸附柱和收集管	10套

注意事项：
1. 所有的离心步骤均可在室温完成，使用可容纳50ml 离心管的离心机。
2. 需要自备乙醇，一次性注射器（可选），研钵。
3. 裂解液RLT 和裂解液RLT Plus和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，需要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4. 植物组织裂解是否充分直接影响到RNA 提取的质量和产量，本试剂盒中提供的裂解液RLT，主要成分为异硫*酸胍，适用于大多数植物组织的裂解，但有些植物组织（例如玉米的乳白色胚乳）或丝状真菌，由于次级代谢产物较特殊，异硫*酸胍使样品产生固化，导致RNA 无法提取，此时可以向我们索取另一种裂解液RLC，将解决该问题。
5. 关于DNA 的微量残留:
一般说来任何总RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA 的微量残留,本试剂盒由于采取了本公司独特的缓冲体系和选择了特殊吸附能力的吸附膜，在大多数RT-PCR 扩增过程中极其微量的DNA 残留（一般电泳EB 染色紫外灯下观察不可见）影响不是很大, 如果要进行严格的mRNA 表达量分析如荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时：
1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA中的连接区,这样DNA就不能作为模板参与扩增反应。
2) 选择基因组DNA和cDNA上扩增的产物大小不一样的引物对。
3) 将RNA提取物用RNase-free的DNase I 处理。本试剂盒还可以用于DNase I处理后的RNA清洁(cleanup),请联*(代"系")我们索取具体操作说明书。
4) 在步骤去蛋白液RW1漂洗前，直接在吸附柱上进行DNase I处理。请联*(代"系")我们索取具体操作说明书。
6. RNA 纯度及浓度检测:
完整性：RNA 可用普通琼脂糖凝胶电泳(电泳条件：胶浓度1.2%；0.5×TBE 电泳缓冲液；150v，15 分钟)检测完整性。由于细胞中70%-80%的RNA 为rRNA，电泳后UV 下应能看到非常明显的rRNA 条带。动物rRNA 大小分别约为5 kb 和2kb，分别相当于28S 和18S rRNA。动物RNA 样品中最大rRNA 亮度应为次大rRNA 亮度的1.5-2.0 倍，否则表示RNA 样品的降解。出现弥散片状或条带消失表明样品严重降解。
纯度：OD260/OD280 比值是衡量蛋白质污染程度的指标。高质量的RNA，OD260/OD280 读数（10mMTris, pH7.5）在1.8-2.1 之间。OD260/OD280 读数受测定所用溶液的pH 值影响。同一个RNA 样品，假定在10mM Tris，pH7.5 溶液中测出的OD260/OD280 读数1.8-2.1 之间，在水溶液中所测读数则可能在1.5-1.9之间，但这并不表示RNA 不纯。
浓度：取一定量的RNA 提取物，用RNase-free 水稀释n 倍，用RNase-free 水将分光光度计调零，取稀释液进行OD260, OD280 测定，按照以下公式进行RNA浓度的计算：终浓度（ng/μl）= (OD260)×(稀释倍数n)×40

储存条件：室温，有效期6个月。


超敏感可脱色PAGE胶蛋白染色试剂盒北京厂家关键词：PAGE胶微量蛋白染色试剂盒(可脱色),超敏感可脱色PAGE胶蛋白染色试剂盒,可逆微量蛋白染色试剂盒

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