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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输,-20℃保存
- 保质期:
长期
- 英文名:
HinfI Restriction Endonuclease
- 库存:
774
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京限制性内切酶HinfI厂家,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京限制性内切酶HinfI厂家
英文名:HinfI Restriction Endonuclease
编号:BTN17-0090
规格:2000 U
产地:国产|进口
HinfI限制性内切酶识别位点:
5´...G↓A N T C...3´
3´...C T N A↑G...5´
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| HinfI,10U/μL | 2000U |
| Buffer A,10× | 1.0mL |
| Buffer B,10× | 1.0mL |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存。
贮存Buffer:10mM Tris-HCl(pH7.4 at 25℃),100mM KCl,1mM DTT,1mM EDTA,0.2mg/mL BSA,50% glycerol。
1×Buffer A:10mM Tris-HCl(pH8.5),10mM MgCl2,100mM KCl,0.1mg/mL BSA。
1×Buffer B:33mM Tris-acetate(pH7.9 at 37℃),10mM 醋酸*,66mM 醋酸*,0.1mg/ml BSA。
活性定义:一个活性单位是指50μL反应体系中,37℃条件下,1小时内将1μg的lambda DNA片段完全分解所需的酶量。
热灭活:65℃加热20分钟
使用方法:
1.单酶切DNA:
①在离心管中加入下列溶液:
| 成分 | 用量 |
| nuclease-free water | 16μL |
| 10×Buffer A | 2μL |
| DNA(0.5-1μg/μL) | 1μL |
| HinfI | 0.5-2μL |
②轻柔混匀,短暂离心。
③37℃孵育1-16小时。
2.双酶切或多酶切DNA:
需选择适当的可以兼容两个或多个内切酶的缓冲液(一般Buffer B可作为双酶切Buffer),然后参考上表设置反应体系。如果没有合适的缓冲液可以选择,可以在一种酶消化完毕后进行纯化,纯化完毕后再进行另外一种酶切反应。
3.直接酶切PCR产品:
①在离心管中加入下列溶液:
| 成分 | 用量 |
| PCR reaction mixture | 10μL(约0.1~0.5μg DNA) |
| nuclease-free water | 18μL |
| 10×Buffer A | 2μL |
| HinfI | 1-2μL |
②轻柔混匀,短暂离心。
③37℃孵育1-16小时。
更多有关北京限制性内切酶HinfI厂家的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
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北京限制性内切酶HinfI厂家关键词:HinfI Restriction Endonuclease,BTN17-0090,限制性内切酶HinfI
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文献和实验和耐药性相关突变。 3.4 DNA 甲基化常用检测方法 近年来涌现出很多 DNA 甲基化的检测技术,目前依据对目标 DNA 的预处理手段可将甲基化检测技术分为 3 类: 3.4.1 基于限制性酶切预处理的甲基化检测技术 这种方法是利用甲基化敏感性限制性内切酶对甲基化区域不切割的特性,将 DNA 消化为不同大小的片段后再进行分析。常用的经典酶对是 Hpa II - Msp I(识别序列 CCGG )。随后进行 Southern 或 PCR 扩增分离产物,以明确目标片段的甲基
均匀后在 95 ~ 97 ℃变性 5 ~ 10min 。 2. 加 Taq DNA 聚合酶 2U ,液体石蜡 50 μ l 覆盖放置水分蒸发,将样品置 PCR 扩增仪中完成扩增反应,变性,退火,延伸温度时间及 Mg2 + 的浓度随扩增引物及区段的不同而改变。 4 )限制性内切酶消化 取 5 μ l PCR 产物分别用 2 个单位限制性内切酶(如 HinfI )在总体积为 12 μ l 的反应体积中酶解, 37 ℃保温
。DNA 的一级结构不稳定,会因为水解、非酶甲基化、氧化损伤和酶降解等出现降解。 细胞中存在核酸酶,如果核酸酶处理不干净,残留在纯化的核酸样本中,从而降解靶核酸。微生物如细菌产生的限制性内切酶也会是一个降解 DNA 的因素。有些细菌的 DNA 酶属于热稳定的核酸酶,在扩增中期可水解基因组和引物 DNA。 核酸和引物也因为其不能与 DNA 聚合酶结合而出现不扩增。如蛋白质、多糖、细胞碎片、脂类等对 PCR 的抑制作用,很可能就是通过对 DNA 的物理包裹作用而使其不能与聚合酶接触。 乳胶
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