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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
706
- 英文名:
DNA Phosphorylation Kit
- 保质期:
6个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
2~8℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")DNA磷酸化试剂盒价格厂家,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:DNA磷酸化试剂盒价格厂家
规格:20次
品牌:百奥莱博
英文名:DNA Phosphorylation Kit
编号:BTN130813
人工合成的PCR引物、linker和adaptor的5´端一般都是-OH基团而不是-PO4基团(除非额外付费要求在人工合成时加上-PO4基团),而任何DNA连接酶都不能将一个DNA分子5´端的-OH基团和另一个DNA分子3´端的-OH基团进行连接,因此通过人工合成的DNA片段和天然DNA 之间的连接效率一般都比天然DNA 彼此的连接效率低(天然DNA 4个端口均可连接,人工合成的DNA跟天然DNA 有2个端口可以连接,人工合成的DNA之间没有任何端口可以连接),尤其是在平末端连接时。本公司开发的DNA 磷酸化产品能将DNA分子5´端的-OH基团磷酸化。
产品特点:
1.可以快速把DNA的5´端的-OH基团变成-PO4基团,使人工合成的DNA(包括PCR产物)跟天然DNA一样有高的连接效率。
2. 既可以对单链DNA进行磷酸化处理,也可以对双链DNA片段同时磷酸化处理。
3.处理后的DNA可以直接用于连接反应、克隆等,不需要纯化。
4. 本产品足够20次DNA的磷酸化实验。
| 成分 | 规格 |
| 10×TPK缓冲液 | 50μl |
| ATP溶液(10mM) | 100μl |
| T4 多核苷酸激酶(10U/μL) | 20μl |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期为6个月。
使用方法:
一:双链DNA片段(5´端为-OH基团的)的磷酸化
注意:如果是PCR产物,一定要先胶回收,不能使用没经过纯化的PCR反应液,因为其中的残留PCR引物会耗掉大量的激酶,降低PCR产物的磷酸化效率。
1、在微量离心管中配制下列反应液(20μL):
| 成分 | 用量 |
| PCR胶回收片段 | 2μL(不超过10pmol) |
| 10×TPK缓冲液 | 2μl |
| ATP溶液(10mM) | 5μl |
| T4 多核苷酸激酶(10U/μL) | 1μl |
| 超纯水到 | 20μl |
2、37℃反应30分钟。
3、70℃热处理5分钟,灭活酶。
4、可直接用于后续克隆(加入量不要超过总体积的1/5)。
二:单链DNA片段的磷酸化
注:单链DNA 包括局部双链的DNA。引物,linker,adaptor,Oligo探针等均按此操作处理。
5、在微量离心管中配制下列反应液(20μL):
| 成分 | 用量 |
| 单链DNA片段 | 5-10 pmol |
| 10×TPK缓冲液 | 2μl |
| ATP溶液(10mM) | 1μl |
| T4 多核苷酸激酶(10U/μL) | 1μl |
| 超纯水到 | 20μl |
6、37℃反应30分钟。
7、70℃热处理5分钟,灭活激酶。
8、可直接用于后续克隆(加入量不要超过总体积的1/5)。如果使用浓度高,则可能需要乙醇沉淀法浓缩DNA。如果单链DNA的浓度低于5pmol,还需要在乙醇沉淀时加入核酸助沉剂。沉淀得到的DNA可溶解在适量的水中。
附:乙醇沉淀浓度DNA(本试剂盒不提供相关试剂,下列操作仅供参考:
1、在DNA溶液中加入0.1倍体积的3 M 乙酸*溶液(pH5.2)。
2、再加入2.5倍体积的无水乙醇和4uL 核酸助沉剂。
3、混匀后12000g 4℃离心10分钟,小心弃上清。
4、加入1mL 70%乙醇,短暂离心3分钟后小心弃上清。
5、短暂离心5秒,吸弃残留液体(约30-50μL)。
6、室温放置2分钟干燥后加入适量的超纯水溶解DNA,立即使用或放-20℃长期保存。
我公司的DNA磷酸化试剂盒价格厂家,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
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规格:10次
·SDS-PAGE预制胶
编号:BTN100915
英文名称:Instant SDS-PAGE Gel
规格:10块
本产品是一种高性能低成本聚丙*(代"烯")酰胺预制凝胶,广泛应用于遗传学,分子生物学,细胞生物学,微生物学,植物学等各个学科领域中蛋白质的分离及分子量的测定。本产品是将凝胶事先配制好,制成预制胶,使用者可直接上样进行电泳。
产品特点:
1.分辨率高,条带清晰,电泳效果极佳;
2.保存期长,常温12个月;
3.胶夹打开极为轻松,无需起撬工具;
4.专利loading guide,加样方便;
5.兼容目前市场各种电泳槽,如BIORAD(11/3/Tetra System),天能和君意东方等;
6.可用于SDS变性及非变性电泳;
7.8%,12%及6%-18%梯度等多种不同浓度供选择;
8.电泳时间短,在200V电压下,电泳30分钟即可完成。
使用效果:
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 预制胶 | 10块 |
| 电泳缓冲液粉末 | 1包 |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
自备试剂:SDS-PAGE上样液。
使用方法:
1.在操作前请将产品配套的电泳缓冲液粉末溶解至3L待用。
2.撕开包装取出胶,将预制胶固定在电泳槽(Bio-Rad Mini-PROTEAN(11/3/Tetra System)或Hoefer Mighty Small(SE 250/ SE 260/ SE 280))中,加入电泳缓冲液没过梳齿部位,推荐的缓冲液使用量为300mL。
3.双手按住梳子左右部位将其平稳缓慢拔出,上样后电泳。使用150v -200v电压,30-40分钟,电泳过程中无需变换电压。
4.电泳结束后,取出胶板。由于本预制胶特殊设计,胶夹很容易打开。使用镊子或者梳子即可轻轻撬开。
北京百莱博科技有限公司专业生产克隆与表达产品,欢迎来电咨询选购DNA磷酸化试剂盒价格厂家。
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