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- 百奥莱博
- BTN130828-AGI
- 北京
- 2025年07月11日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
516
- 英文名：
DNA Dephosphorylation Kit
- 保质期：
6个月
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
低温运输，-20℃
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应北京DNA去磷酸化试剂盒价格厂家，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。
北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应北京DNA去磷酸化试剂盒价格厂家，产品信息：
类别：克隆与表达
英文名：DNA Dephosphorylation Kit
| 产品名 | 产品编号 | 包装规格 |
| DNA去磷酸化试剂盒 | BTN130828 | 20次 |
规格：20次
品牌：百奥莱博
英文名：DNA Dephosphorylation Kit
编号：BTN130828
分子克隆时，载体的自连极大降低了连接效率，而对载体DNA 两个5´端的-PO4基团进行去磷酸化处理可以抑制自连反应。此外在进行DNA或RNA5´端标记前，也需要将其本来的-PO4基团去除再加上标记基团。本公司开发的DNA去磷酸化产品就是针对这一目的而开发。
产品特点：
1.基于细菌碱性磷酸酶，反应在较高温度进行，效率更高。
2. 把DNA和RNA 5´端的-PO4基团变成-OH基团，丧失连接能力。
3. 模板可以是单链，也可以是双链，既可以是DNA，也可以是RNA。
4.处理后的核酸纯化后可以直接用于连接反应和标记反应。
5. 本产品足够20次去磷酸化实验。
试剂盒组成
| 成分 | 规格 |
| 10×去磷酸缓冲液 | 100μl |
| 细菌碱性磷酸酶(0.5U/μL) | 50μl |
| 超纯水 | 1ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期为6个月。
使用方法：
注意：dNTP和ATP 也是碱性磷酸酶的底物，所以如果核酸溶液中有dNTP和ATP，一定要先将其去除。否则它们会耗掉大量的碱性磷酸酶，降低DNA 去磷酸化效率。
1、在微量离心管中配制下列反应液(50μL)：
| 成分 | 用量 |
| DNA片段 | 不超过10pmol |
| 10×去磷酸缓冲液 | 5μl |
| 细菌碱性磷酸酶 | 2.5μl |
| 超纯水到 | 50μl |
2、65℃反应30分钟。如果是RNA样品，建议在37℃反应30分钟。
3、酚*仿抽提去除酶活性，乙醇沉淀DNA 待用(见附)。
附：酚/*仿抽提DNA、乙醇沉淀浓缩DNA(本试剂盒不提供相关试剂，需要从本公司另购相关试剂，下列操作仅供参考)：
1、在50μl DNA溶液中加入50μl超纯水增加体积，以免纯化过程中DNA 丢失。如果有必须，可以加入和4μL 核酸助沉剂提高回收效率。
2、加入100μL 酚/*仿/异戊醇25：24：1 混合液震荡半分钟混匀，室温12000g离心3分钟，转移上清到新离心管中。
3、重复上步操作一次。
4、加0.1倍体积(即10μL)的3 M 乙酸*溶液(pH5.2)。
5、再加入2.5倍体积(即250μL)的无水乙醇。
6、混匀后12000g 4℃离心10分钟，小心弃上清。
7、加入1mL 70%乙醇，短暂离心3分钟后小心弃上清。
8、短暂离心5秒，吸弃残留液体(约30-50μL)。
9、室温放置2分钟干燥后加入适量的超纯水溶解DNA，立即使用或放-20℃长期保存。
北京DNA去磷酸化试剂盒价格厂家专业优质供应商：北京百奥莱博科技有限公司
关键词：DNA Dephosphorylation Kit,BTN130828,DNA去磷酸化试剂盒
我公司拥有专业生化试剂实验和销*(代"售")经验，为专业的您提供专业的服务。种类丰富，*基酸类、酶类、维生素类、DNA去磷酸化试剂盒、缓冲剂类、色素类、植物激素及核酸类、碳水化合物类、抗生素类均有销*(代"售")。品牌代理，质量保障，其产品涉及生命科学的所有领域，包括生化试剂，抗体，ELISA试剂盒等等。
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填补Qiagen空白的植物RNA提取试剂盒（包括多糖多酚困难样品）
、多酚、次级代谢产物丰富的情况下，TRIzol类方法无法防止多糖多酚对于RNA/DNA分相的干扰，要么残留大量DNA，要么残留大量多糖、多酚或者次级代谢产物，氧化破坏RNA，或者残留这些多糖多酚，色素代谢产物等抑制下游的反转录等反应。限于技术水平的限制，市面上绝大多数的国产厂家是使用TRIzol的方法进行改良，无论是不是加了离心柱。但是实践证明，改良不能从根本上解决问题。判断是否试剂盒使用这种改良的方法非常简单：是否裂解液含有苯酚的味道和使用氯仿，如果使用到了氯仿就是TRIzol方法的改良
下，trizol类方法无法防止多糖多酚对于RNA/DNA分相的干扰，要么残留大量DNA，要么残留大量多糖、多酚或者次级代谢产物，氧化破坏RNA，或者残留这些多糖多酚，色素代谢产物等抑制下游的反转录等反应。限于技术水平的限制，市面上绝大多数的国产厂家是使用trizol的方法进行改良，无论是不是加了离心柱。但是实践证明，改良不能从根本上解决问题。判断是否试剂盒使用这种改良的方法非常简单：是否裂解液含有苯酚的味道和使用氯仿，如果使用到了氯仿就是TRIzol方法的改良。 第二种试剂盒失败的原因：直接裂解过柱
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